血细胞分析仪测定原理与参数解析
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➢血细胞分析仪检测参数原理
一、白细胞系列参数检测原理 二、成熟红细胞系列参数检测原理 三、血小板系列参数检测原理 四、血红蛋白浓度测定检测原理
一、白细胞系列参数检测原理
1、流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法 检测通道:
➢ (1)4DIFF通道:利用激光流式细 胞术、核酸荧光染色技术,采用专一
三、激光散色法流式细胞术检测原理
➢ 如细胞(或其他颗粒)用荧 光染料染色,则染色后的细胞( 或其他颗粒)被激光照射时,可 产生不同波长的荧光散射,可用 检测器接受散射荧光。将来自各 种散射光的信息进行综合分析, 即可准确区分正常类型的细胞( 其他颗粒)。激光散射法在区别 体积相同而类型不同的细胞特征 时,比电阻抗法血细胞分群更准 确。故激光散射法已成为现代五 分类血液分析仪的主要检测原理 之一。
胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒
细胞(百分率和细胞计数绝对值)和
未成熟粒细胞(百分率和细胞计数绝 对值)。
白细胞分类–4DIFF散点图
1、流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法
检测通道:
➢ (2)WBC/BASO通道:
在碱性溶血剂作用下,除 嗜碱性粒细胞外的其他所 有细胞均被溶解或萎缩, 随后用流式细胞术计数嗜 碱性粒细胞,从而得到 WBC/嗜碱性粒细胞百分率 和细胞计数绝对值及 WBC/BASO散点图。
溶血剂解红细胞和血小板,而白细胞
膜仅部分溶解出现小开口,核酸荧光
染料聚次甲基进入受损的白细胞内, 与DNA、RNA和细胞器结合,使之着 色。染色后白细胞色深(未成熟粒细
胞、异常细胞染色更深,成熟白细胞
荧光染色浅),红细胞不染色,血小
板稍染色。因荧光强度与细胞所含核 酸量成比例,从而得到4DIFF白细胞散 点图,包括中性粒细胞和嗜碱性粒细
血细胞分析仪测定原理 与参数解析
202பைடு நூலகம்年4月20日星期一
➢简 介 ➢血细胞分析仪检测原理 ➢血细胞分析仪检测参数原理 ➢检测参数(报警) ➢临床应用
➢简 介
➢ 自动血细胞分析仪,早年称血细胞技术
仪,已是目前国内外临床检验最常用的筛检 仪器之一。
➢
20世纪50年代初,美国W.H.Coulter
➢ 当细胞(或其他颗粒)通过激光束被 照射时,细胞(或其他颗粒)因本身的 各种特征(如体积大小、染色程度、细 胞成分浓度或细胞核密度等),可阻挡 或改变激光束的方向,产生与细胞(其 他颗粒)特征相应的各种角度的散色光 。置放在石英毛细管周围不同角度的信 号检测器(光电倍增管)接受到特征各 异的散色光。来自低角度散色光(或称 前向散色光)的信息,反映细胞(或其 他颗粒)的数量和表面体积大小;来自 高角度散色光(或称侧向散色光)的信 息,反映细胞(或其他颗粒)的内部颗 粒、细胞核等复杂性。
白细胞分类–白细胞、 嗜碱性粒细胞散点图
1、流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法
检测通道:
➢ (3)未成熟粒细胞信息(IMI)
通道:用射频、电阻抗和细胞化学
➢ 电阻抗法可精确测量出细胞(或 类似颗粒)的大小,是三分类血细 胞分析仪的主要应用原理。电阻抗 法还与光学检测原理组合应用于五 分类血细胞分析仪中。
电阻抗法细胞计算原理
二、射频电导法
➢ 射频指射频电流,是每秒变化大 于10000次的高频交流电磁波。电导 性即电的传送性能。高频电流能通过 细胞壁。用高频电磁探针渗入细胞膜 脂质层可测定细胞的导电性,提供细 胞内部化学成分、细胞核和细胞质( 如比例)、颗粒成分(如大小和密度 )等特征性信息。电导性特别有助于 鉴别体积虽相同、但内部结构性质不 同的细胞(或相似体积的颗粒)如淋 巴细胞和嗜碱性粒细胞两者直径虽均 9~12um,但在高频电流检测时,因 两类细胞不同核质比例而出现不同的 检测信号。射频电导法结合其他检测 原理一起应用于血细胞分析仪中。
➢血细胞分析仪检测原理
一、电阻抗法 二、射频电导法 三、激光散射法
一、电阻抗法血细胞计数原理
➢ 悬浮在电解质溶液中的血细胞相 对于电解质溶液为非导电颗粒,其 电阻比电解质溶液大,利用两者导 电性能的差异,体积大小不同的血 细胞(或类似颗粒)通过计数小孔 时,可引起小孔内、外电流或电压 的变化形成与血细胞数量相当、体 积大小相应的脉冲电压,从而间接 区分出细胞群,并分别进行计数, 这就是电阻抗原理即库尔特原理。
激光散射法系统基本组成
名称 光源 鞘流 细胞悬液
组成及评价
气体(氦-氖、氩气等)激光或固体(半导体)激光(单色 光);钨光源(多色光)
维持颗粒于液流中央,顺序、单个、恒速向前流动,即流 体动力学聚集
被检测细胞(颗粒)的悬液,由气压导入流动池
光检测器
接受来自各种角度的散射光或吸收光信号,并转换成相应 特征的电信号
射频电流检测原理
三、激光散色法流式细胞术检测原理
➢ 将经试剂稀释、染色
、球形化的细胞(或其 他颗粒)悬液注入鞘液 流中央,单个细胞随悬 液和鞘流液两股液流整 齐排列,以恒定流速定 向通过石英毛细管。
鞘流技术 1.检测光;2.细胞流;3.前鞘流;
4.后鞘流;5.流液方向
三、激光散色法流式细胞术检测原理
➢ “精度高、速度快、易操作、功能强”
是血细胞分析仪的强劲优势,还可和血涂 片制备和染色仪进行组合,由后者完成血 细胞分析仪检测后的形态学复检。
➢ 现代血细胞分析仪的功能有:1.全血细
胞计数功能(红细胞、白细胞和血小板计 数及其相关的计算参数).2、白细胞分类功 能(三分类或五分类白细胞百分率和绝对 值).3、血细胞计数和分类功能的扩展功能 ,包括:有核红细胞计数、网织红细胞计 数及其相关参数检测;未成熟粒细胞、幼 稚粒细胞、造血干细胞计数;未成熟血小 板比率;淋巴细胞亚型计数;细胞免疫表 型检测等。
申请了粒子计数法的技术专利,在世界上研
发了第1台电子血细胞技术仪,并应用于临
床,开创了血细胞计数的新纪元。从此,随
着基础医学和高科技,特别是计算机软件技
术的发展,其检测原理逐渐完善,检测技术
不断创新,检测的参数显著增多。
➢ 传统手工法显微镜血细胞计数或分类
方法,不仅速度慢,而且因操作过程的随 机误差、实验器材的系统误差和检测方法 的固有误差,检测的精密度不高。