仪器分析研究生复习提纲答案.doc

研究生复习提纲

1.色谱法定性和定量的依据是什么？

答.色谱定性的依据是保留值，定量的依据是m=fA

色谱定性分析方法:1、用保留时间定性2、用峰高增加法定性3、与其他仪器连用定性（如：GC-MS）

定量分析方法:1、归一化法2、外标法3、内标法

用保留值定性的依据是：当固定相和操作条件严格固定不变时，任何一种物质都有确定不变的保留值，通过比较已知物和未知物的保留值，就可以确定色谱图中某一色谱峰代表什么物质。

2.什么叫程序升温？它有什么作用？

答.程序升温色谱法，是指色谱柱的温度按照组分沸程设置的程序连续地随时间线性或非线性逐渐升高，使柱温与组分的沸点相互对应，以使低沸点组分和高沸点组分在色谱柱中都有适宜的保留、色谱峰分布均匀且峰形对称。程序升温具有改进分离、使峰变窄、检测限下降及省时等优点。对于沸点范围很宽的混合物，往往采用程序升温法进行分析。在气相色谱中多采用程序升温技术解决洗脱色谱的一般问题，而在液相色谱中多采用梯度洗脱技术解决这一问题。

3.什么叫梯度洗脱？它有什么优点？

答：梯度洗脱就是在分离过程中，让流动相的组成、极性、pH等按照一定程序连续变化，使样品中各组分能在最佳的分配比下出峰，使保留时间短、拥挤不堪、甚至重叠的组分，或保留时间过长而峰形扁平的组分获得很好的分离，特别适合样品中组分的分配比值范围很宽的复杂样品的分析。梯度洗脱十分类似气相色谱的程序升温，两者的目的相同。不同的是程序升温是通过程序改变柱温，当流动相和固定相不变时，分配比的变化是通过温度变化引起的。而液相色谱是通过改变流动相组成、极性、PH来达到改变分配比的目的，一般柱温保持恒定。

4.为什么用分离度R作为色谱柱的总分离效能指标？

答：塔板理论和速率理论都难以描述难分离物质对的实际分离程度，即柱效为多大时，相邻两组分能够被完全分离。难分离物质对的分离度大小受色谱分离过程中两种因素的综合影响：保留值之差——色谱分离过程中的热力学因素；区域宽度——色谱分离过程中的动力学因素。考虑色谱分离过程的热力学因素和动力学因素，引入分离度(R)来定量描述混合物中相邻两组分的实际分离程度。分离度R由三项的乘积决定。第一项为动力学因素项，表现在色谱峰的宽度，由色谱柱性能决定。第二项为热力学因素项，决定于色谱峰问的距离。第三项为分配比项，影响组分的保留时间。

5.根据速率理论，色谱柱的板高H由哪些因素决定？试给出最佳流动相流速U

和最小板高

最佳H

的计算公式。

最小

答：H首先取决柱子填充均匀程度和固定相颗粒大小。气相载气流速、柱温和载气分子质量影响纵向扩散。液相固定相性质，组分在固定相和流动相的扩散系数影响传质阻力。因液相中纵向扩散很小，塔板高度H主要由传质阻力项决定，即流速越大，H越大。气相中纵向扩散明显，低流速时增大流速H降低，流速继续增大，传质阻力增大，H增大。

计算公式：

6.以固定相和流动相的极性及组分出峰顺序说明什么是正相色谱和反相色谱。

答：在液一液分配色谱中，对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定液的极性，称为正相分配色谱(色谱柱称为正相柱)，适合极性化合物的分离，极性小的组分先流出，极性大的组分后流出。反之流动相的极性大于固定液的极性时，称为反相分配色谱(色谱柱称为反相柱)，适用于非极性化合物的分离，出峰顺序与正相分配色谱相反。

7.

HPLC GC

流动相1．流动相可为离子型、极性、弱

极性、非极性溶液，可与被分析

样品产生相互作用，并能改善分

离的选择性；

2．液体流动相动力黏度为

10-3 Pa·S，输送流动相压力高达

2～20Mpa

1．气体流动相为惰性气体，不

与被分析的样品发生相互作

用；

2．气体流动相动力黏度为

lO-5 Pa·s，输送流动相压力仅

为0.1～0.5MPa

固定相1．分离机理：依据吸附、分配、

筛析、离子交换、亲和等多种原

理进行样品分离，可供选用的固

定相种类繁多；

2．色谱柱：固定相粒度小，为5～

10微米；填充柱内径为3～6 mm，

柱长10～25 cm，柱效为103～

104；毛细管柱内径为0．Ol～0．03

mm，柱长5～10 m，柱效为104～

105；柱温为常温

1．分离机理：依据吸附、分配

两种原理进行样品分离，可供

选用的固定相种类较多；

2．色谱柱：固定相粒度大，

为0．1～0．5 mm；填充柱内

径为1～4 mm，柱长l～4 m，

柱效为102～103；毛细管柱内

径为0．1～0．3 mm，柱长10～

100 m，柱效为103～104；柱

温为常温～300℃

检测器选择性检测器：UVD，PDAD，

FD,ECD通用型：ELSD、RID

选择性检测器：NPD，FPD，ECD

通用型：TCD、FID（有机物）

进样方式样品制成溶液样品学加热气化或裂解

应用范围可分析低相对分子质量低沸点样

品；高沸点、中分子、高分子有

机化合物(包括非极性、极性)；离

子型无机化合物；热不稳定，具

有生物活性的生物分子

可分析低相对分子质量、低沸

点有机化合物；永久性气体；

配合程序升温可分析高沸点有

机化合物；配合裂解技术可分

柝高聚物

仪器组成高压输液系统、进样系统、分离

系统和检测系统气路系统、进样系统、分离系统、温控系统、检测记录系统

8.什么是质谱？质谱图给出物质的哪些信息？

答：以离子的质荷比(m／z)大小依次排列的图或表称为质谱（MS）。根据质谱图中的分子离子峰(Mt)可以获得样品分子的相对分子质量信息；根据各离子峰(分子离子峰、同位素离子峰、碎片离子峰、亚稳离子峰、重排离子峰等)及其相对强度和氮数规则，可以确定化合物的分子