紫斑牡丹组培快繁技术研究

关 键词 ：紫班牡丹； 组织培养； 快繁技术 ；培养基 中图分 类 号 ：￥ ８．１ ６ ５１ 文 献标 识码 ：Ａ 文章 编 号 ：１０ — ４３ ２ １ ）０ ０ ２— ２ ０ １ １６ （０ １—０ ６ ０ １
Ｓ ｕ ｙ ｏ ｓｕ ｌ ｒ ｎ ｐ ｄ Ｐ ｏ ａ ａ ｉ ｎ Ｔｅ ｈ ｉ ｕ ｆＰ ｅ ｎ ａ ｒ ｃ ｉ ｔ ｄ ｎ Ｔｉｓ ｅ Ｃｕ ｔ ｅ ａ ｄ Ｒａ ｉ ｒ ｐ ｇ ｔｏ ｃ ｎ ｑ ｅｏ ａ ｏ ｉ ｏ ｋ ｉ ｕ
２５ 个 ／ 。 当Ｎ Ａ浓 度 为 ０ ５ｍ ／ Ａ ． ０ 株 Ａ ． ｇ ０ Ｌ、Ｉ Ａ为 ０ ， 时 ６Ｂ － Ａ浓度 为 ３０ｍ ／的植 株 分化 苗 数 最多 ，为３２ ． ｇＬ ． ０ 个／ ；６ Ｂ 浓 度 为４０ｍｇ 时 次之 ，为２６ 个／ ； 株 －Ａ ． ／ Ｌ ． ０ 株
表３ 培养温度对紫斑牡丹继代培 养的影响
培
（ ） ℃
２ ０ ２ ４ ２８
其余处理的培养室温度条件均为（４ ３ ℃。 ２＋ ）
２ 结 果与分 析
２ 不同培养基对继代增殖的影响 ． １ 从表１ 可以看 出，将继代苗接种在附加相同激 素的４ 种培养基上 ，当６ Ｂ 浓度为 １ ｇ 、Ｎ Ａ 一Ａ ．ｍ ／ ０ Ｌ Ａ 为０ ｇ 时，以Ｎ 的植株分化苗数最多 ，为３ ０ ．ｍ ／ ５ Ｌ ６ ． １ 个／ ；１ Ｓ ５ 株 ／ Ｍ 、Ｂ 次之 ，分别为２ ０ ． 个／ ； ２ ． 、２１ 株 ７ ０
ｍ ／ Ａ ＋ ５ 白糖＋ ． ｇ 琼脂）上培养 ，经５ ｇ Ｎ Ａ ２． ｇ Ｌ ０ ６ Ｌ ０／ ６ ｄ 成无性 繁殖 系后 待用 。 长 １ ． 基本培养基对紫斑牡丹继代增殖的影响 ．２ ２ 在 ４ 种培养基Ｎ 、Ｂ 、１ Ｍ （ ６ ５ ／ Ｓ 大量减半 ） Ｓ ２ 、Ｍ 中分别 附￣ Ｎ Ａ０ ｓ ，接种紫斑牡丹继代苗 ， Ｉ Ａ ．ｍ ／ ３ ５ Ｌ 每处理
供试 的紫斑牡丹 由甘肃省临夏回族 自治州东
收稿 日期 ：２ １ ＿ ９ ０ ０ ｌ０ — ６
作者简介 ：祁文烈（９９ ） 男， 东乡 ， １５一 ， 甘肃 人 农艺师， 主要从事脱毒马铃 薯种薯繁 育推广工作 。 系电话 ： ） １９０６２ 联 （ １ ３３４ ８ｏ ０３
Ｅ ｍ ｉ ｘｎｊ ｉａ ｏ — ａ ：ｄｘｙ＠ｓ ． ｍ ｌ ｎｅ
从生长 良好 、健壮、无
三级保 护植 物 ，收录于 《 中国植物 白皮 书——稀 有和濒危植物》 一书中＿ 。紫斑牡丹花大色艳香 ２ ］ 浓 ，花瓣基部有独特 的大紫斑 ，具有极高的观赏
价值 ，同时具有抗旱 、抗寒 、抗病和耐瘠薄等特
病害的紫斑牡丹பைடு நூலகம் 株上剪取４ｃ 左右嫩梢 ，在无 ｍ
菌条件下切成０ 左右 、带幼嫩腋芽的茎段 ，放 ．ａ ５ｍ
人洗 衣粉 溶液 中浸泡 ５ｍｎ ｉ，用 自来 水连 续 冲洗
性 ，是牡丹遗传改 良的宝贵野生种质资源 ［ 。临 夏是 紫斑牡 丹 的主要 原产 地 区 ，“ 河州牡 丹 ” 文化底 蕴深 。紫斑牡丹通常在 自然状态下生根萌芽率较
低 ，用种子难 以繁育 ，而传统的无性繁殖周期长 ，
ｌ — ０ ｉ、在超净工作台上用７ ％酒精消毒４ ５ ２ ｎ ｍ ５ ０ Ｓ 后 ，用０１％升汞消毒 １ ｉ，再用无菌水 冲洗５ ． ５ ０ｍｎ
次 ，然 后 接 种 在 培 养 基 （． ｍｇ ＋ 一 Ａ ０５ １ Ｃ ＭＳ ６ Ｂ ＋ ． ０ Ｌ
ｕ ｉ ｇ ｔ ｅ Ｂ ｄ ｓ ｅ ｉ ｇ ａ ｘ ｌｎ ｓ ｈ ｅ ｕｔ ｈ ｗ ｄ ｔ ａ ｅ ｄ ｆ ｒ ｎ ｉｔ ｎ ｒ ｔ ｓ ｔ ｅ ｈ ｇ ｅ ｔｗｈ ｎ ６ Ｂ ｃ ｎ ｅ ｔａｉｎ ｉ １０ ｓ ｕ — ｅ ｄ ｎ ｓ ｅ ｐ ａ ｔ．Ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｓ ｏ ｅ ｈ ｔｔ ｉ ｅｅ ｔ ｉ ａｅ ｗａ ｉｈ ｓ ｅ 一 Ａ ｏ ｃ ｎｒ ｔ Ｓ ． ｎ ｈ ｓ ｈ ａｏ ｈ ｏ
２ ６
甘肃农 业科 技
２１ ０ １年 第 １ ０期
Ｇ ｎ ｌ Ａ ｒ ｃ． ｎ ｅ ｈ ． Ｎｏ １ ２ １ ａ ￥ ｇ ．Ｓ ｉａ ｄ Ｔ ｃ ｎ Ｚ ． ０ ０ １
紫斑牡丹组培快繁技术研究
祁文烈 ，章文江
（ 肃省 东 乡族 自￣－农 业技 术推 广站 ， 甘 肃 东 乡 ７ １０ ） 甘 ｇｇ － ３４ ０ 摘 要 ：以临夏紫斑牡丹芽苗为材料 ，在不同培养基、激素、培养条件下继代增殖培养的结果表明。当６ 一
的６ Ｂ 、Ｉ Ａ Ａ ，具 体处理见表２ 一 Ａ Ａ 、Ｎ Ａ ，接种紫斑
牡丹继代苗 ，培养２ ～ ０ 后观察统计分化苗数。 ５ ３ ｄ １ ． 培养温度对紫斑牡丹继代增殖 的影 响 将 ．４ ２ 紫斑牡丹继代苗接种在上述４ 种培养基上 ，在相对 湿度为７ ％条件下 ，分别放置在２ 、２ 、３ ｃ的恒 ５ ０ ５ ＯＣ 温箱 内培养３ ，调查分化 、生长情况 。 ０ ｄ １ 培养条件 ． ３
Ｑ ｎ ｌ ，Ｚ Ｎ ｎｊ ｎ Ｉ Ｗｅ—ｉ ＨＡ ＧＷｅ－ｉ ｇ ｅ ａ
（ｍ ｏ ｏ ｏｕａ ｚ ｇＡ ｒ ｕ ｕａ Ｔ ｃｎｑ ｅｉ Ｄ ｎｘａｇＮ ｔ ｎ ｉ ｕｏｏ ｏ ｓ ｏｎｙ Ｄ ｎｘ ｎ ａ ｓ ３４ ０ Ｃ ｉａ Ｓ ｆ ｎＦ ｒ ｐ ｌｒｉ ｇ ｃｌ ｒｌ ｅｈ ｉ ｏ ｇｉｎ ａｏ ａｔ Ａ ｔｎｍ ｕ ｕ ｔ， ｏｇｉ ｇＧ ｎｕ７ ０ ， ｈ ） ｉ Ｐ ｉｎ ｉ ｔ ｕ ｎ ｉ ｌｙ Ｃ ａ １ ｎ
ｍｔ ，Ｎ Ａ ｉ０５ｍ ／， ｅ ｅｎｅ ａ ｅｅ ｃ ｌｏｓｂｕｔｒ ａ ｄｄ ｅｅｔ ｔｎｗ ｅ － Ａｉ ３ ｅＥ Ａ ． ｇ ｔ ｏｉ ｗ ｓ ｎｆ ｉ ｃｌ ｅ ｎ ｉ ｒｎｉｉ ｈ ｎ６ Ｂ ． ｓ Ｌｈ ｐ ｓ ｂ ｉ ａｔ ｕ ｕ ｆ ａｏ ｓ ０—５０ｍ ，＇Ａ ． ｍｇ ，ｒ ． ｇＬ Ｉ Ａ ｉ０５ ／ ｏ ｓ Ｌ Ｎ Ａ ｉ００ ，＇ － Ａｉ ３ ／． ｅｄ ｅｅｔ ｔｎｓｅｌ ｇ ｕ ｅ ａ ｘｍ ｍ ｗ ｅ ｅ ｉ ｔｓ ０ ｘ ｒ ａｖ ｕ ｉｉ Ａ ． ｍｇ ６ Ｂ ． ｍｇ ｉ ｒｎｉｉ ｅｄｉ ｓ ｍｂｒ ｓ ｍａｉ ｕ ｈｎｔ ｇ ００Ｌ ， ｌｔｅｈ ｍ ｄ ｙ ｓ ５ Ｌ ｓ ０ Ｌ ｆ ａｏ ｎ ｎ Ｗ ｈ ｌｈｉ３ ｅ ｉ ｔ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔ ｅ ｓ ｂ ｕ ｕ ｅ ｃ ｌ ｒ ｆＰ ｅ ｎａ ｒｃ ｉ ｉ ｄｆ ｒ ｔ ｕｔｒ ｍ ｄｕ ｈ ｒ ｏ ｅ， ｕｔ ｅ ｃｎ ｉ ｏ ｓｗ ｓ ｓ ｄｅ ｓ ｒ ｃ ： ｈ ｕ ｃ ｌ ｒ ｕｔ ｅ ｏ ａ ｏ ｉ ｏ ｋｉ ｎ ｉｅｅ ｌ ｅ ｅ ｉｍ， ｏｍ ｎ ｓ ｃ ｌ ｒ ｏ ｄ ｉ ａ ｔ ｉ ｔ ｕ ｆ ｎ ｃ ｕ ｕ ｔｎ ｕ ｄ
基本 培养 基Ｎ 、Ｂ 、ＭＳ ，白糖２ ．ｇＬ ６ ５ 中 ５０ ／、琼 脂 ６０ｇ ． ／ Ｌ，１ 中 白糖 １．ｇＬ ／ ＭＳ ２ ２５ ／、琼 脂３０ｇＬ Ｈ ． ／。ｐ ５５ ．，光 照 １ ／，光 照 强 度 ３０ ０Ｌ 。 除 １ ．外 ， ４ｈｄ ０ ｘ ．４ ２
６ Ｂ 浓度为２ ｇ 时最低 ，为０ ５ 株。 －Ａ ．ｍ ／ ０ Ｌ ． 个／ ５ ２３ 培 养 温度 对 继代 培养 的影 响 ．
从 表３ 以看 出 ，温 度 为２ 、２ Ｃ 可 ４ ８ｃ时植 株 分化 Ｉ
苗数最多 ，均为３ 个／ ；２ ． 株 ２ ０℃时次之 ，为２１ ． 个／ 株 ；３ ０℃时最少 ，为 １ 个／ 。观察 表明 ，３ ． 株 ３ ０℃ 时幼苗褐变率加剧 ，生长势弱 ，甚至有死亡现象。
甘肃 农业 科技
２１ ０ １年 第 ｌ ０期
Ｇ ｎ ｕ Ａ ｒ ｃ． ｎ ｅ ｈ ． Ｎ ． ０ ２ １ ａ ｓ ｇ ．Ｓ ｉａ ｄ Ｔ ｃ ｎ ｏ １ ０ １
２ ７
殖的影 响
在基本 培养基Ｎ 上分别 附加不同浓度 ６
６ Ｂ 浓度为３ ｇ 时分化苗数最多， ． 个／ ； －Ａ ．ｍ ／ ０ Ｌ 为３１ 株 Ｏ ６ Ｂ 浓度 为 １ ～ ． ｍ ／时 ，分化苗 数为２ ４ －Ａ ． ２ ｇ ０ ０ Ｌ ． ０
３ ０
３ 小 结 与讨论
Ｍ 最 少 ，为 １ ０ ／ 。褐 变 率 以Ｍ 最 高 ，为 Ｓ ．个 株 ８ Ｓ
６ ％；Ｂ 、１ Ｓ ０ ５ ／ Ｍ 次之 ，分别为４ ％、１％；Ｎ 最 ２ ５ ５ ６
低 ，为０ 。
表 １ 不同培养基对紫斑牡丹继代增殖的影响
１ ）试验结果表明 ，当６ Ｂ 浓度为 １ ｇ 、Ｎ Ａ 一Ａ ．ｍ ／ ０ Ｌ Ａ 为０ ｇ 时 ，以Ｎ 培养基适宜紫斑牡丹 的继代培 ．ｍ ／ ５ Ｌ ６ 养 ，分化苗数最多 ；当６ Ｂ 浓度为３ — ．ｍ ／ 、 一Ａ ． ５ ｇ ０ ０ Ｌ
Ｂ Ａ浓度 为 １ ｇ 、Ｎ Ａ为 ０５ｍ Ｊ ． ｍＣ ０ Ｌ Ａ ． ｇＬ时，分化 率最高 ；当 ６ Ｂ 一 Ａ为 ３ — ． ｍ 、Ｉ Ａ为 ０５ｍｇ ，或 Ｎ Ａ 为 ． ５０ ０ Ａ ． Ｃ Ｌ Ａ
００ ｇＬ － Ａ为 ３０ｍｇ ． ｍ ／ 、６ Ｂ ５ ． ／ Ｌ时均有利于牡丹 的继代分化 。接种后 当光照 为 ３００Ｌ 、相对 湿度 为 ７ ％，温度为 ０ ｘ ５ ２ 、２ ４ ８℃时分化 苗数最 多。
紫斑牡丹 （ａｏｉ ｒ ｋ ） Ｐｅｎ ｃｉ 属芍药科芍药属牡丹 ａｏ ｉ 种植物 ，是我 国特有 的濒危物种 ，也是所有牡丹 中受威胁程度最高的物种 ㈩ ，１８ 年被列为 国家 ９７
乡族 自治县马铃薯脱毒 中心提供 。
１ ． 试 验 设 计 及 方 法 ２
１ ． 外植体制备与消毒 ．１ ２
出苗率低 ，难以满足市场需求 。我们于２ １年６ ００ 月 进行 了紫斑牡丹组织培养快繁技术研究 ，现将结 果初报 如下 。
１ 材料 与方 法 １１ 供 试材 料 ．
ｌ瓶 ，每瓶接种５ ，培养３ Ｏ 株 ０ 后统计分化苗数及 ｄ 褐变率。
１． ６ ．３ ２ Ｎ 培养基添加不 同激素对紫斑牡丹继 代增
势弱 ］ 。用牡丹芽苗为外植体 时，污染较小 ，但
２ Ｎ 培养基添加不 同激素对继代增殖的影响 ． ６ ２ 从表２ 可以看 出，在Ｎ 培养基 中添加不 同激素 ６
后 ，当 ＩＡ浓 度 为 ０５ｍｇＬ Ａ 为 ０ ，６ Ｂ Ａ ． ／ 、Ｎ Ａ 时 － Ａ浓
不同季节采集 的芽苗长势存在一定 的差异 ，以秋
ＩＡ为 ０５ｍ ／，或 Ｎ Ａ为 ００ ｇＬ － Ａ为 ３０ Ａ ． ｇＬ Ａ ．５ｍ ／、６ Ｂ ．
ｍ ／时均 有利 于紫 斑牡 丹 的继 代分 化 。在光 照 ｇ Ｌ
个一 ０， ：一 ２２ ３ 株一 ＝Ｊ ＝ ２
３ ０ ｘ ０Ｌ 、相对 湿度为７％的条件下 ，以培养温度 ０ ５ 为２ 、２ ４ ８℃时分化苗数最多 。 ２ ）牡 丹组织培养 的外植 体除芽体 外 ，子房 、花 药 、心皮都可以形成愈伤组织 ，但褐变较重 ，长
Ｗａ ５ ｓ ７ ％， ｅ ｅａ ｕ ｅｗａ ４ ２ ℃ ａｔｒｉｏ ｕ ａｉｎ ｔｍｐ ｒ ｔ ｒ ｓ２ ， ８ ｆ ｃ ｌｔ ｅ ｎ ｏ
Ｋｅ ｒ ｓ：Ｐ ｅ ｎａｒｃ ｉ Ｔｓｕ ｕｔｒ； ｒｐ ｇｔ ｎｔｃ ｎｑ ｅ ； ｄｕ ｙ ｗｏ ｄ ａ ｏ ｉ ｏ ｋｉ ｉ ｅｃ ｌ ｅ Ｐ ｏ ａ ａｉ ｈ ｉｕ ｓ Ｍｅ ｉｍ ； ｓ ｕ ｏ ｅ