温度对奶牛冻精解冻后活力的影响
提高奶牛性控冻精受胎率的注意措施
精， 这样 能确保 聚集 在 输 精 管 内 的获 能 精 子在 其 排
卵后 的活力 旺盛 ， 从 而增 加卵子 的受 精机 会 。 来自５ 加 强饲 养管 理
营 养也是 影 响奶 牛受 胎率 的重要 因素 之一 。母 牛正常 发情 、 排卵、 受精 及妊娠 的物质基 础是 膘情 良 好 。当母 牛 营养失 衡 时 ， 会 影 响其 牛 殖 激 素 的正 常
在 采取性 控冻 精 对 奶 牛数 量 进 行 快 速扩 繁 时 ，
１ 受体 选 择
最好 选 择育 成 青 年奶 牛 ， 年龄为 １ ５ ～２ Ｏ月 龄 ，
体重 为 ３ ５ ０ ｋ ｇ 。这是 由于成年 母 牛 因妊娠 、 泌乳、 产 犊 等生 理负担 重 ， 导 致营 养处 于负平 衡状态 ， 或 者缺 少某些 矿物质 、 维 生素等 ， 从 而影响 精子 和受精 卵 的 成活 ， 最 终影 响受 胎 率 。青 年 母 牛不 仅 没 有 上述 情 况， 且其 生殖 生理 性 能 良好 ， 子宫 内环 境 适 宜 ， 能够 确保 精 子和受 精 卵 的成 活 ， 因 此适 宜 选 其 作 为最 佳 受体牛 。另外 ， 也 可选择 经产 奶牛 作为受 体 ， 但必须 确保 体 况 良好 、 健康 ， 没有 生殖 疾病 ， 发情 规律 正常 ， 且要仔 细检 查其子 宫 内环境 。当无 法确保 所选 受体 母牛子 宫 内环境 是 否 良好 时 ， 可 在 配种 前 一 个 情 期
而影 响 卵 泡 成 熟 和 排 卯 。 在 生 产 中 ， 建 议 对 奶 牛 实
精单 位 ， 以达 到从 源头上 确保性 控冻 精质 量 的 目的。
做好 性控 冻精 的运输 和保 存Ｔ 作 。液氮贮 存罐 移 动时 ， 必须 提 握 罐 柄 ， 做 到轻拿轻放 ， 避免冲撞。 装 车运输 时 ， 要 将 防震 软 垫 加 在 罐 底 ， 罐 体 要 加 外 套， 之后 装入 木箱 ， 并进 行 栓 系 固定 ， 避 免 倾 倒 。此 外， 南于 液氮容 易 挥 发 ， 需 要 配 有 专 人 押运 ， 并在 运 输 途 中随 时进行检 查 ， 确保 液氮水 平 面保持在 ２ ０ ｃ ｍ
70°C解冻颗粒精液对提高母牛受胎率的试验
70°C解冻颗粒精液对提高母牛受胎率的试验
裴继昌;赵文灵
【期刊名称】《黄牛杂志》
【年(卷),期】1992(018)001
【摘要】为了探索70℃解冻颗粒精液对提高母牛受胎率的效果,我们用公牛的颗粒冻精分别进行了70℃和40℃解冻及配种受胎率的对比试验,试验结果表明,用70℃解冻颗粒精液给母牛配种的情期受胎率为77.50％(31/40),比用40℃解冻颗粒精液给母牛配种的情期受胎率43.24％(16/37)高34.26个百分点,经显著性检验,差异极显著(P<0.01)。
现将试验方法和结果报道如下。
【总页数】2页(P56-57)
【作者】裴继昌;赵文灵
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S823.34
【相关文献】
1.不同温度解冻精液对母牛受胎率影响的试验 [J], 赵文灵;张桂花
2.用VB12作颗粒冻精解冻液提高母牛冷配受胎率的研究 [J], 张扬;宋飞
3.在颗粒精液中加入缩宫素可以提高母牛受胎率 [J], 方红
4.颗粒精液干解冻提高母牛受胎率试验 [J], 许中强;马志军
5.用维生素B_(12)解冻颗粒冻精提高母牛受胎率的试验 [J], 姜学锋;田双庆;贾得良;胡爱民;梁红军
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不同解冻温度对细管冻精精子活力的影响
研究与探讨Y 1642019年5月·下不同解冻温度对细管冻精精子活力的影响陈玉萌（新疆生产建设兵团第九师团结农场农业发展服务中心 834602）摘 要 寻找肉牛精子最佳解冻温度的影响。
温度是精子最敏感的外界因素之一。
实践证明，牛精液冷冻效果好坏与解冻温度有很大关系。
牛冷冻精液质量的好坏，直接影响受胎率，影响着养殖户的经济效益。
而冻后精子活力及生存时间（解冻后37℃保存4小时精子活力）又是冷冻精液质量中最重要的两项指标。
为此，可以通过本试验了解不同解冻温度对牛冷冻精子复苏的影响，找出适宜牛细管冷冻精液的最佳解冻温度。
目的是寻找最佳的解冻温度及解冻时间，从而提高精子冻后活力，提高受胎率。
在生产实践中根据具体情况选用适合的解冻温度和解冻时间。
关键词 肉牛；冷冻精液；解冻温度；精液质量牛、羊精液冷冻保存技术研究主要开始于20世纪50年代，Polge[1]等用甘油作冷冻保护剂，在-79℃保存牛精液并用于输精，于1951年产下世界上第一头冷冻精液牛犊。
目前，养牛业中已广泛应用冷冻精液人工授精[2]，该技术极大地促进了牛生产性能的改进和新品种的培育。
我国牛的冷冻精液剂型除颗粒冻精外，还有细管冻精。
细管冻精有很多优点，冷冻时受温比较均匀，冷冻效果好，精液利用率高，值得推广，大大提高了受胎率，可以培育出体格健壮、遗传性能优越的犊牛。
优势不受地区、季节、公牛年龄的限制，运输方便，细管冻精有效保存时间长，对进行牛冷冻精液的解冻方法的优化研究具有重要的现实意义。
1 材料与方法1.1 供试冻精的选择购于吉林市繁殖改良站的肉牛细管型冷冻精液提供的0.5毫升。
1.2 解冻用具专用的消毒杯、温度表、自备的凉开水、电炉、温度计试验时这些用具随身携带。
1.3 方法在温水解冻范围内设计五个温度区：38℃、38.5℃、39℃、39.5℃、40℃。
设定解冻时间为10s、20s、30s三个档。
解冻后，通过光学显微镜在400- 600倍条件下，室温20℃情况下，检查解冻后精液的活力。
牛细管冻精解冻后不同输精时间对受胎率的影响
试 验 研 究2021年第3期新农民牛细管冻精解冻后不同输精时间对受胎率的影响邬隅波（贵州省石阡县农业农村局，贵州 铜仁 555100）摘要：牛细管冻精解冻后不同输精时间对受胎率的影响，结果表明，牛细管冻精解冻后30min、60min、90min后给发情母牛输精，母牛受胎率分别为88.5％、78％、69.6％。
关键词：细管冻精；输精时间；受胎率当今随着畜牧业的快速发展，肉牛人工授精技术在全国各地被广泛的运用。
牛冷冻精液配种技术是在常温人工配种基础上发展起来的先进繁殖技术，冻配技术极大地促进了牛生产性能的改进和培育新品种，现代化养牛过程中冷冻精液配种已成为母牛最常见的配种方式。
贵州省石阡县有得发展草食家畜的优势条件，全县共存栏黄牛、水牛10.66万头。
为了提高牛的生产性能，20世纪70年代末，我县开始引进了夏洛莱、安格斯黄牛，摩拉、尼里水牛种公牛，通过自然交配来改良本地品种。
近些年来，石阡县加大了牛人工授精推广力度，一是加强对人工输精人员基础知识和基本操作技能的培训，不断提高了人工输配人员的技术水平，二是增强人工输配人员的服务能力和服务意识，目前全县19个乡镇（街道）已建立牛人工授精品种改良点。
牛的冷冻精液配种是一项难度较大、技术要求较高的先进繁殖技术，必须认真严格执行牛冷冻精液人工授精技术操作规程。
一严 输精器械消毒要严，受配母牛的外阴要用高锰酸钾消毒水清洗干净。
二准 把握输精时间和输精部位要准。
三快 从液氮罐中取出细管冻精、解冻和输精的过程要快。
四慢 输精时插入输精枪（或针）、精液注入速度和输精完后取出输精枪（或针）要慢，即慢插、轻注和缓出。
牛的发情持续时间受年龄、品种、饲养管理、营养和劳役等诸多因素的影响，适时输精的时间略有差异。
通常黄牛较适宜的输精时间是发情后36~48h，一般母牛在清晨或上午发情，可在下午或傍晚输精；下午或傍晚发情的母牛可在第二天上午或中午输精。
为了提高受胎率，可对发情的母牛在一个情期内输精两次，即在母牛发情后12~18h进行第一次输精，间隔12~18h再进行第二次输精。
奶牛性控冻精人工授精影响因素分析
奶牛性控冻精人工授精影响因素分析发布时间：2021-01-18T13:47:09.567Z 来源：《城镇建设》2020年10月第30期作者：艾斯卡尔·吾斯曼1 阿米娜·毛依冬2[导读] 用分离X和Y精子的性控精液进行人工授精是控制家畜性别之最简单可行的方法。
艾斯卡尔·吾斯曼1 阿米娜·毛依冬21.新疆阿克苏地区温宿县畜禽品种改良站 8431002.新疆阿克苏地区温宿县畜牧兽医站843100摘要：用分离X和Y精子的性控精液进行人工授精是控制家畜性别之最简单可行的方法。
然而，低密度性控精液输精效果还不如常规人工授精，许多技术环节都有待改进。
以常规冻精和稀释常规冻精为对照，研究解冻方法、输精时间和部位、不同精液来源和输精员以及育成和经产牛等因素对性控冻精人工授精妊娠率的影响。
结果显示, 精液解冻水浴温度和持续时间对人工授精效果有显著影响，性控精液对解冻水浴温度更敏感；性控冻精和稀释常规冻精比常规冻精对输精时间要求更严格；3种精液输精到排卵卵泡同侧子宫角基部受胎率都显著高于输精于子宫体和同侧子宫角前端；3种精液育成牛受胎率(80%)都显著高于经产牛(50 %)；于输精同时注射促排卵素3号明显提高性控冻精受胎率；经严格挑选、能够从事胚胎移植操作的技术熟练输精员之间性控冻精受胎率差异不显著；在所设计的不同条件下，性控冻精与稀释同样倍数的常规冻精行为相似，说明精子分离过程没有对精子造成特殊损伤。
研究结果说明，精确控制人工授精各个技术环节可以实现消除性控与非性控、低密度与高密度精液之间的差别，获得高妊娠率。
关键词:性控精液；人工授精；影响因素；奶牛1 材料与方法1.1受配奶牛2015-2018年分别在试验基地进行奶牛性控冻精的应用研究。
试验中受配奶牛除特别说明外均为大于16月龄、体况良好和发情周期正常的育成牛。
1.2 精液性控冻精为流式细胞分离仪分离后冷冻保存的X精子。
性控冻精的规格为 0.25 mL/支，每支含2 ×106个精子, 活力≥0.3，X 精子含量≥90 %。
种公牛冷冻精液品质的影响因素及提高措施
种公牛冷冻精液品质的影响因素及提高措施种公牛冷冻精液的品质对繁殖业的发展起着至关重要的作用。
优质的种公牛冷冻精液能够提高种公牛的繁殖效益，提高遗传进步速度，促进畜牧业的发展。
种公牛冷冻精液品质的影响因素较多，包括饲养管理、环境因素、种公牛自身等多个方面。
提高种公牛冷冻精液品质的措施主要包括饲养管理的优化和技术措施的改进等。
一、品质影响因素：1.饲养管理：饲养管理是影响种公牛冷冻精液品质的关键因素之一。
合理的饲养模式和管理方法能够提高种公牛的身体健康状况，增加精液的产量和质量。
关键的饲养管理措施包括：（1）合理的饲喂：提供充足、均衡的饲料，保证种公牛摄入足够的营养物质，同时要避免过度饲喂引起的肥胖问题。
（2）定期体检：定期对种公牛进行体检，发现和治疗疾病，提高种公牛的身体健康状况。
（3）合理的运动：种公牛需要适度的运动来保持良好的体态和心理状态，同时有助于提高精液质量。
2.环境因素：环境因素也是影响种公牛冷冻精液品质的重要因素。
良好的环境条件有利于种公牛的生长发育和生殖功能的正常发挥。
（1）合适的温度和湿度：温度和湿度对种公牛的生理状态有着重要影响。
要提供合适的温度和湿度环境，防止过热或过冷导致种公牛不适。
（2）良好的通风条件：保持空气流通，防止精液受到异味、有害气体的污染，保证精液的纯度和品质。
3.种公牛自身：种公牛自身的状况也是影响冷冻精液品质的重要因素。
种公牛的遗传背景、年龄、健康状况等都会对冷冻精液产量和质量产生影响。
（1）遗传背景：选种公牛时要选择优良的遗传背景，具有较高的遗传力和繁殖能力。
（2）年龄：种公牛的年龄对精液品质有一定影响，一般来说，2-5岁的公牛产生的冷冻精液品质较好。
（3）健康状况：种公牛的健康状况对冷冻精液品质影响较大，要定期进行体检和治疗，保持良好的健康状态。
二、提高措施：2.技术措施的改进：改进技术措施也是提高种公牛冷冻精液品质的重要途径。
具体做法包括：（1）精液采集技术的优化：采用无创伤的精液采集方法，减少对种公牛的伤害和压力，提高精液的纯度和品质。
种公牛冷冻精液品质的影响因素及提高措施
种公牛冷冻精液品质的影响因素及提高措施1. 引言1.1 背景介绍种公牛冷冻精液的质量直接影响到种牛的繁育效果和繁殖性能。
随着畜牧业的发展，人们对种公牛冷冻精液品质的要求也越来越高。
种公牛冷冻精液品质受到多种因素的影响，包括公牛个体的遗传背景、生理状态、环境条件等。
在畜牧生产中，通过研究和控制这些影响因素，可以提高种公牛冷冻精液的质量，提高繁育效果，实现优良种牛的传承和繁衍。
深入研究种公牛冷冻精液品质的影响因素，制定科学合理的提高措施，对于推动畜牧业的发展具有重要意义。
本文将围绕种公牛冷冻精液品质的影响因素及提高措施展开研究，旨在为畜牧生产提供科学依据和指导。
1.2 研究意义种公牛冷冻精液品质是影响种马繁殖效率和遗传进展的重要因素。
通过对种公牛冷冻精液品质的深入研究，可以更好地了解影响精液质量的因素，进一步提高种牛的繁殖效率和优化遗传进展。
种公牛冷冻精液品质的提高可以提高种公牛的繁殖能力，增加优质种源的供给，促进良种畜禽的生产发展。
2. 正文2.1 影响种公牛冷冻精液品质的因素1. 公牛本身的质量：种公牛的遗传背景、体质状况、年龄等因素会直接影响其精液的品质。
一般来说，健康、年轻、遗传优良的公牛产生的精液质量更高。
2. 精液采集和贮存过程：精液采集的方法、频率、时长以及贮存的条件和时效性都会影响精液的品质。
不当的采集方法或者贮存条件会导致精子活力下降，从而影响精液的质量。
3. 精液处理技术：包括离心、稀释、冷冻等操作的技术水平和操作规范性都会对精液的品质产生重要影响。
如果操作不当或者技术不过关，可能会导致精子活力下降或者受到损伤。
4. 疾病和环境因素：种公牛本身患有疾病、饲养环境不良、气候异常等因素也会对精液品质产生负面影响。
需要确保公牛的健康和生活环境的优良。
种公牛冷冻精液品质受多方面因素影响，包括公牛本身质量、精液采集和贮存过程、精液处理技术以及疾病和环境因素等。
为了提高精液的品质，需要全面考虑这些因素，并采取相应的措施进行管理和改善。
奶牛精液冷冻技术探讨
养殖与饲料2016年第8期摘要奶牛的人工授精技术已经是普遍采用的一种繁殖方法，对奶牛养殖业有很大的促进作用，其发展主要是由于精液冷冻保存技术的成功研制及推广的缘故。
本文详细阐述了奶牛精液冷冻保存的原理、精液冷冻保护剂、冷冻保护技术。
关键词奶牛精液；冷冻技术；保护剂奶牛精液冷冻技术探讨姚强1孙广义2陈丽丽1赵庆彬1王穆峰1吴志国31.天津市奶牛发展中心，天津300384；2.天津惠孚饲料有限公司，天津300316；3.河北省沧州市动物疫病预防控制中心，河北沧州061001收稿日期：2016-05-12姚强，女，1979年生，兽医师。
奶牛的人工授精技术早在20世纪50年代左右就已经在畜牧业发达的国家普遍推广使用。
我国在20世纪70年代也逐渐普及推广，尤其是精液冷冻技术的成功研制，使得精液能够长期保存，对促进我国奶牛业的发展起了很大的作用。
1奶牛冷冻精液的意义奶牛冷冻精液主要用于品种改良，可以充分发挥种公牛的种用价值，对其利用率大大提高。
采用冷冻技术长期保存精液，每年1头良种公牛就可以和1万头以上的母牛配种；可以加快品种改良进度，短时间内获得杂交优势种群。
冷冻精液不受时间、地域的限制，可以大范围地利用良种种公牛，还可以减少种公牛的饲养数量，节省饲养成本。
2精液冷冻保存的原理精液的冷冻就是利用液氮（-196℃）、干冰（-79℃）为冷源，将精液经过特殊处理，保存在超低温下，此时精子的生理代谢活动受到抑制，一旦升温又可以恢复精子的活力，这样就可以达到精液长期保存利用的目的。
3精液冷冻保护剂利用精液冷冻保护剂是为减轻精液在冻融过程中对精子的损伤，提高精子的存活力和活动力。
目前，最常用的冷冻精液保护剂就是甘油，但甘油不仅有保护作用，还会对精子造成一定的损伤，开发新型的保护剂一直是重要的研究课题。
冷冻稀释液是精子的载体，能为精子提供代谢物质，调节精子的受精能力，稀释液的组成成分对精子有很大的影响。
姜方等[1]通过试验证明海藻糖和牛血清白蛋白不管是单独使用还是配伍使用都会对冻后的精子品质有显著影响。
职业技能考试复习资料--家畜繁殖-理论知识+操作技能
职业技能考试复习资料--家畜繁殖-理论知识一、判断题1．家畜的卵巢能分泌雌激素和孕激素。
（√ ）2．松弛素能使家畜的肌肉松弛。
（×）3．孕马血清促性腺激素来自于妊娠母马的子宫粘膜。
（×）4．单侧隐睾的公畜能够生育后代、故可作为种畜。
（×）5．牛孕后发情可能造成流产。
（√ ）6．马的子宫内膜有100个左右子宫内阜，将来能发育母体胎盘。
（×）7．子宫能调节卵巢的机能。
（√ ）8．少量的性激素与孕激素有抗衡作用。
（×）9．睾丸间质细胞能分泌睾酮。
（√ ）10．家畜生产力是评定家畜品种优劣的重要依据。
（√ ）11．鲜胚移植，受体和供体不用搞发情同期化。
（×）12．超数排卵是在母畜的乏情期内注射促性腺激素。
（×）13．营养不良和管理不善可造成家畜不育。
（√ ）14．精液稀释的目的是增加一次采精可配的母畜数。
（√ ）15．猪发情鉴定主要用外部观察法。
（×）16．牛常用手握法采精。
（×）17．的排卵左侧较右侧多，白天比夜间多。
（×）18．娠二个月左右可见腹围增大。
（√ ）19．一年四季都有可以发情。
（×）20．哈白猪属瘦肉型品种。
（×）21．福特牛是兼用型品种。
（×）22．通过牙齿可鉴定奶牛的年龄。
（√ ）23．猪的精液中精子密度较大。
（×）24．牛冷冻精液解冻后活力在0.3以上才能使用。
（√ ）25．牛的妊娠诊断可以用雌激素探查法。
（√ ）26．安静发情是指母畜发情时没有外在表现。
（√ ）27．附睾是精子最后成熟的地方。
（√ ）28．刚从睾丸排出的精子不具有受精能力。
（√ ）29．发情周期的实质是卵泡与黄体的交替存在。
（√ ）30．猪的子宫角弯曲呈绵羊角状。
（×）31．牛的妊娠期为150天。
（×）32．牛患有子宫内膜炎时表现为长期发情。
（×）33．马的卵巢为肾形，位于骨盆腔。
奶牛性控冻精使用技术操作要点及注意事项
奶牛性控冻精使用技术操作要点及注意事项性别控制是指雌性动物通过人为地干预而繁殖出人们所期望性别后代的一种繁殖新技术。
奶牛XY精子分离性别控制技术是指将牛的精液根据含X染色体和Y 染色体精子的DNA含量不同而把这两种类型的精子有效的进行分离后，将含X染色体的精子分装冷冻后，用于牛的人工授精，而使母牛怀孕产母牛犊的技术；这种根据精子X、Y染色体的不同而分装冷冻的冻精就叫性控冻精；使用我公司的牛性控冻精产品对发情母牛进行配种可以使90%以上的受配怀孕母牛产母牛犊。
一、奶牛性控冻精在生产中使用的重要意义（一）奶牛公、母犊牛的价格差一般在1000元以上，母牛同样的饲养管理成本和怀孕时间，用性控冻精冷配，可以使怀孕母牛的产犊效益显著提高。
（二）使用性控冻精可以显著的提高母牛数和群体产奶量，这是因为与常规冷冻精液配种相比，使用性控冻精，可以大量的繁殖出母牛后代，最终使母牛数和产奶量都得到提高，从而提高生产效益。
（三）使用性控冻精可繁殖出大量的优质高产的母牛后代，可以加快牛群的淘汰速度，提高生产效率。
以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛产业的生产效益，同时与胚胎工程技术的结合可以使牛的品种改良一步到位。
二、性控冻精的特点（一）解冻后精子活力要比常规冷冻精液高，其原因是死精子和部分畸形精子在分选时被筛除；（二）性控冻精细管分装精子的密度显著地低于非性控冻精（性控：230万个/0.25ml，非性控：2500万个/0.25ml）；（三）奶牛含X染色体性控冷冻精液的存活时间相对于常规冷冻精液要短。
三、使用性控冻精进行人工授精的母牛的选择按下列步骤和标准执行。
首先是品种的选择，选择中、高产奶牛及其后代做为使用对象；其次是年龄和胎次，首选初配母牛和生产三胎内母牛；最后是营养和健康，膘情适中健康无疾病和繁殖疾病史。
四、性控冻精输精技术的操作要点和注意事项（一）准确的发情观察（步骤）1、每天早晚对放牧或在运动场运动牛群进行至少半小时的观察，记录接受爬跨的牛号；2、不能放牧或不能在运动场运动的牛，等到牛吃草挤奶后静卧休息时，观察其尾部分泌物的粘性和颜色，记录牛号；3、对外阴红肿爬跨其它牛只骚动不安的牛只记录牛号；4、对上述三种情况记录的牛只在观察完成后立即查阅繁殖记录，剔除产后时间不合适、正在进行繁殖疾病治疗和其它不适合进行配种的牛只；5、对观察到上述症状的适合冷配的空怀牛只，在10-12小时后进行直肠检查，首先判断子宫的大小和质地，然后检查两侧卵巢是否正常，是否有排卵卵泡，如果有排卵卵泡，根据卵泡的大小和质地推测排卵时间，判断在8小时之内排卵并适合进行冷配的牛只立即进行配种，对适合使用性控冻精的牛只（本手册第三条）用性控冻精配种，不适合的用常规冻精配；并做好包括子宫、卵巢情况和发情时间及输精时间和部位等内容的详细记录；（二）输精操作要点1、使用性控冻精配种时，配种时间尽量控制在排卵前6小时之内或排卵后4小时之内；使用性控冻精时，尽量缩短解冻与输精之间的时间，最好是解冻一支输一支；2、解冻方法：从液氮罐中取冻精时，提漏中的冻精不可超过液氮罐口，如果10秒钟内还没有将冻精取出，应将冻精立刻沉入液氮中然后再提到罐口重复操作；单支冻精取出后在空气中先停留5秒左右，然后放入38-40摄氏度清水中10秒中后取出用干脱脂棉擦干后剪断封口，装入输精器准备输精；3、输精器最好是使用一次性外套的，输精时要保证输精器的无菌和与输精器接触的部位及器具的干净卫生；输精部位一般在排卵侧子宫角或者是采用子宫体后拉法，也就是说，如果能够准确判断出排卵侧并能使输精器顺利的放到排卵侧子宫角就采用子宫角输精，否则，采用子宫体输精器后拉发法输精，保证两侧子宫角都能有精子进入和受精。
TCM199对奶牛冻精活力的研究
% 试验材料与方法 !"! 试验动物
供 采 精 公 牛 为 *+,-./01 品 种 一 头 ! 牛 号 2#345678! 来 源 加 拿大 ! 年龄 9 岁 "
将采集到的精液迅速放入保 温瓶内 ! 温度保持在 <9! ! 在试 验室内做肉眼直观检查 ! 然后取 一滴精液于 <=! 下做显微镜精液 活力检查 ! 用血细胞计数板计算 精子密度 " 将检验合格的原精加 入第一液 ! 在 <9! 水天平! 电子恒温显微 镜! 电冰箱! 水浴箱! 消毒柜! 液氮罐! 冷冻仪! 血细胞计数 板等 "
&7>01! 再 加 入 第 二 液 于 <9! 下
保持 53>01 后注入麦管 ! 将分装 好的麦管置于 ;! 条件下平衡 6 " ;? 待冷冻处理 " 5:;:< 稀释液配方 试验组配方
% 讨论与结论
经过本次试验可以看出 ! 试 验组和对照组冻精活力没有明显 差异 ! 即 789*(( 对 奶 牛 精 液 在 冷冻过程中没有直接提高活力的 作用 " 从解冻后保存时间上对比 看 ! 随时间的推移 ! 两组精子活 力均呈下降趋势 ! 符合其生理规 律 ! 但试验组下降速度缓慢 ! 解 冻 !3 精 子 活 力 测 定 值 仍 符 合 输 精要求 ! 解冻 *"3 精子活力才开 始下降 " 相反对照组下降速度较 快 ! 解 冻 43 精 子 活 力 测 定 值 已 接 近 临 界 值 ! 解 冻 !3 已 不 符 合 输精要求 ! 解冻 *"3 出现精子顶 体变形! 运动缓慢! 原地摆动! 精子大量死亡 " 由此可见 ! 奶牛 冻精中加入 789*(( 对 精 液 有 一 定的保护作用 ! 可以延长精子的 存活时间" 这对奶牛饲养量少! 没有冷冻设备 ! 需要异地输精的 奶农和小型奶牛场具有一定的现 实 意 义 " 789*(( 主 要 用 于 牛 卵 母细胞培养 ! 由于其效果好 ! 作 用明显 ! 目前已扩展到其它学科 和领域 " 胡军和等 $%"". 年 % 应 用 789*(( 对猪卵 母 细 胞 进 行 培
牛冷冻精液人工授精若干技术问题认知
牛冷冻精液人工授精若干技术问题认知作者：渊锡藩来源：《养殖与饲料》 2013年第1期本文就牛冷冻精液解冻温度及解冻后精液温度、牛冷冻精液细管的取用、精液细管安装于输精枪的要领、母牛的爬跨行为及生殖道排血现象、母牛受胎率统计、牛冷冻精液解冻温度及评定精子活力温度相关标准的表达等技术操作问题进行了探讨。
1 精液解冻温度和解冻后精液温度牛冷冻精液在升温解冻过程中,要求快速越过能形成冰晶的危险温区,达到《牛冷冻精液》标准(GB4143-2008)要求的解冻精子活力(应为0.35)。
该国家标准明确要求牛冷冻精液细管的解冻是“直接置于37 ℃ 水浴中解冻”。
牛冷冻精液从原来-196℃保存温度直接置37℃水浴中解冻,温度相差233℃,其目的就是使超低温的牛冷冻精子快速越过“危险温区”,以保持一定数量的呈前进运动的有效精子。
有的技术人员采用手搓、装入内衣口袋等用体温解冻牛冷冻精液细管的方法是不能达到快速解冻的目的的,因此这样的操作是错误的。
解冻后精液温度,即用于给发情母牛输入的经解冻后精液的温度。
要求在进入母牛生殖道后,解冻后精液的温度应呈直线上升,在此过程中,精液的温度不可出现回降。
输精时,将解冻后的精液升至37℃后,在外界气温环境下装入输精枪内,如果外界气温低于精液温度会使精液温度降低,然而精液输入母牛生殖道后,温度又会升至母牛体温。
精液温度这样反复升降(如图1所示),会降低解冻后精液的品质。
正确的解冻方法是:从液氮罐中取出牛冷冻精液细管迅速浸入37℃热水中(要求脱离液氮时间控制在10s以内)融化15s(融化后的精液温度需低于外界气温),取出后的精液细管继续升高至外界气温,然后装入输精枪内,再输入母牛生殖道内。
因此,牛冷冻精液的解冻温度绝对不可以认同为解冻后精液温度,错误地认为两者温度均为37℃。
2 冷冻精液脱离冷源时间的要求国家标准规定,从液氮罐取出的单支细管冷冻精液,从脱离液氮到浸入热水中解冻的时间间隔不得超过10s;而将盛装细管冷冻精液的提筒(袋)转移至另一液氮容器内时,脱离液氮的时间要求不得超过3s。
家畜精液冷冻技术研究进展
吕艳丽，刘刚，蒋桂荣，等.家畜精液冷冻技术研究进展［J ］.中南农业科技，2023，44（9）：226-230．中国畜禽遗传资源丰富，地方优良畜禽品种繁多，如北京番鸭、中山麻鸭、上海水牛、小尾寒羊、赤水竹乡鸡等。
这些优良的地方畜禽品种资源对中国畜牧业发展有重要作用。
随着生态环境的改变、新品种的大量引入、杂交技术的广泛应用、经济效应的影响等因素，导致部分地方优良品种逐渐杂化、群体数量急剧减少，甚至处于灭绝或濒临灭绝的状态，因此，畜禽遗传资源的保护迫在眉睫。
畜禽遗传资源保护的方法主要有活体保护（即保种场、保护区）、生物冷冻保存技术（即冷冻配子、细胞、胚胎等）、基因文库技术、体细胞克隆技术及分子遗传标记等［1］。
精液冷冻保存技术（Semen freezing ）是利用液氮（-196℃）或干冰（-79℃）等作为冷源，将动物的精液通过特殊处理后，在超低温环境中进行长期保存的一种方法。
该技术以其优势在濒危物种的资源保护工作中备受青睐，解决了人工授精受时间和空间限制的问题，为畜禽遗传资源保护提供了有利条件。
精液冷冻保存技术在奶牛、猪、羊、马等家畜遗传资源保存中取得了进展，并逐渐应用到生产实践中，是家畜遗传资源长期保存的有效方法。
本研究从精液冷冻技术的发展历程、细胞冷冻损伤机制、家畜精液的采集、精液品质检测、稀释液成分、精液稀释方法、冷冻及解冻方法等关键技术环节，对精液冷冻技术在家畜中的研究进展进行综述，以期为精液冷冻技术的应用发展提供参考。
1精液冷冻技术的发展历程精液冷冻技术研究已经受到国内外研究者的广泛关注。
1776年，Lazaro Spallanzani 发现，将人的精液埋藏在雪中一段时间，恢复温度后仍有少数精子可以存活［2］，这一发现为后来的精液冷冻技术打下了基础。
1949年，Polge 等［3］发现在牛精液冷冻保存时加入甘油对精子具有保护作用并且通过试验发现，在家禽精液稀释液中加入20%的甘油后放置在-80℃短暂冷冻保存，解冻后精液能够恢复活力。
始冻温度和解冻温度对犬冻后精子活率的影响
始冻温度和解冻温度对犬冻后精子活率的影响
宋春青;郝志明;刘洪柱;孙兆福;宋丽媛;申玉霞
【期刊名称】《畜牧兽医科技信息》
【年(卷),期】2009(000)003
【摘要】本试验以Tris-葡萄糖稀释液为基础稀释液,就冷冻起始温度和解冻温度对犬精子冻后活率的影响进行了研究.试验结果表明:始冻温度为-70℃时冻后精子活率最高,达0.6284±0.0408,明显优于始冻温度为-65℃和-75℃时的冻后精子活率(P ＜0.05);解冻温度为70℃时冻后精子活率最好,达0.6810±0.0324,明显优于60℃和65℃时的冻后精子活率(P＜0.05).
【总页数】2页(P30-31)
【作者】宋春青;郝志明;刘洪柱;孙兆福;宋丽媛;申玉霞
【作者单位】天津市西青区王稳庄兽医站,天津,300383;天津农学院,天津,300384;天津市西青区王稳庄兽医站,天津,300383;天津市西青区王稳庄兽医站,天
津,300383;天津市西青区王稳庄兽医站,天津,300383;天津市西青区王稳庄兽医站,天津,300383
【正文语种】中文
【中图分类】S8
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提高奶牛冷冻精液活力的正交试验
提高奶牛冷冻精液活力的正交试验
邱昌功;白军
【期刊名称】《中国奶牛》
【年(卷),期】1996(000)005
【摘要】冷冻精液的生产受多种因素的制约，若仅通过筛选初冻温度来增进活力，则冻后活力很不稳定。
利用正交试验排出影响冻后活力诸因素的主次顺序，解决好主要因素的矛盾，在生产中严格按照筛选后的最佳条件进行冷冻，是提高冻精质量的关键。
【总页数】3页(P14-16)
【作者】邱昌功;白军
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S823.34
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3.提高奶牛冷冻精液使用效果的措施 [J], 傅春泉;徐苏凌;徐玉花
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华
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牛细管冻精的解冻过程及注意问题
牛细管冻精的解冻过程及注意问题
苏成果
【期刊名称】《北方牧业：奶牛》
【年(卷),期】2006(000)005
【摘要】冷冻精液的解冻是能严重影响精液冷冻质量的重要环节，这个环节操作
不利将会造成精子在复苏过程中的大量死亡，而影响精液的活力和整体完整率。
使奶牛的受胎率下降，从而增加了奶牛的产犊间隔和饲养成本，造成了不必要的损失。
所以说冷冻精液的正确解冻对一个奶牛场很重要。
【总页数】1页(P48)
【作者】苏成果
【作者单位】北京奶牛中心良种场,北京102100
【正文语种】中文
【中图分类】S823.91
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温度对奶牛冻精解冻后活力的影响邱忠玉,桑国俊(甘肃省畜牧兽医研究所,甘肃平凉744000)摘 要:本研究对奶牛冻精解冻后在4 ,15 ,25 温度下分别保存2h,4h,6h,8h,10h的活力进行了测定。
结果表明,4 和15 保存到10h精子活力0.3810.0170和0.3790.0197,与初解冻接近(P>0.05);25 保存随时间延长精子活力呈下降趋势,和初解冻相比,6h为0.3490.0223(P<0.05),8h和10h分别为0.3020.0215和0.2630.0287(P<0.01)。
牛冻精解冻后在4 和15 保存10h以内,精子活力仍然维持在一个较高水平,符合输精要求,在此温度和时间范围内进行长距离携带,对精液质量影响小,可以达到预期的输精效果。
环境温度在25 左右时,冻精解冻后宜于4h以内进行输精。
关键词:奶牛;冻精温度;精子活力[中图分类号] S814.4 [文献标识码] A [文章编号] 1004 6704(2010)03 0011 03E ffects of T e m perature on Dairy D efrosti ng of Frozen Se m enQ I U Zhong yu,SANG Guo j u n(In stit u te of A ni ma lH u sband ry and Ve t erina ry of Gan s u province,P ingli ang Gan s u744000,China)Ab stract:Sper m ac ti v ity was m eas u red i n th i s study which kept i n4 ,15 ,25 for2h,4h,6h,8h and10h after defrosti ng, respecti ve l y.The results i nd i cated tha t spe r m ac tiv ity w as0.3810.0170and0.3790.0197a t4 and15 ,kept10h,wh i ch w as si m ilar w ith defrosti ng at t he very beg i nn i ng(P!0.05).Sper m acti v ity tended to be decreasi ng w ith long keeping ti m e a t25 ,com par i ng w ith defrosti ng at the very beg i nn i ng,sper m acti v ity was0.3490.0223kg(P<0.05)for6h,0.3020.0215kg and0.263 0.0287kg(P∀0.01)for8h and10h,respecti v ely.A fter de fro sti ng kept sperm at4 and15 for10h,spe r m acti v ity kept i n a higher l eve,l fi t for se m en depositi on,at this te m pera t ure and ti m e l ong d i stance carrying i m pired littl e o f qua lit y,can reach expec ted effects o f A I.In the ev ent o f env iron m en t temperature a t25 could be do A I in4h.K ey w ords:Bull frozen se m en,te m perature,sem en mob ility.人工授精技术的推广应用,加快了我国奶牛业的发展步伐,特别是人工授精技术在农村广大小型和散养奶牛户中的普及应用,加快了这一产业在农村的发展,明显提高了农村养殖业的经济效益。
目前奶牛配种主要采用细管冻精,因解冻和携带方便已为广大奶牛饲养者采用。
奶牛冻精解冻后要及时输精,放置时间过长会因营养物质的快速消耗而降低精子活力,从而影响母畜的受胎率。
由于农村奶牛饲养分散,无法集中输精,个别养殖户位置偏远,缺少或根本没有冻精保存设备,只能在冻精点将细管解冻后运往养殖点进行输精,由于冻精在携带过程中温度和时间不好掌握,难以保证精子在一个适当的环境内生存,影响冻精活力,降低配种效果,造[收稿日期] 2010 03 15[作者简介] 邱忠玉(1955 ),男,甘肃平凉人,本科,高级畜牧师,主要从事牛繁育研究与推广。
成不必要的经济损失。
本试验在奶牛冻精解冻后,在不同温度下进行保存,测定精子存活持久性和各时间段精子活力,通过不同保存温度和不同保存时间的对比,探讨解冻后的奶牛精液最佳保存环境和适宜的输精时段。
1 试验材料与方法1.1 试验动物供精公牛为牛号E T021207的一头6岁ho l s tei n牛。
1.2 试验器材电子天平,电子恒温显微镜,电冰箱,水浴箱,消毒柜,液氮罐,冷冻仪,血细胞计数板,细管等。
1.3 稀释液原料柠檬酸钠,果糖,甘油,卵黄,双蒸水,青霉素,链霉素。
1.4 试验方法1.4.1 采精方法 每周采精两次,采前刷拭牛体,11畜牧兽医杂志 第29卷 第3期 2010年清洁环境,避免采精器械污染。
手握式假阴道采集精液,假阴道温度控制在38 。
1.4.2 精液处理 将采集到的精液置入35 保温瓶内,在试验室内做肉眼直观检查,然后取一滴精液于显微镜下做原精精子活力检查,用血细胞计数板计算精子密度。
将检验合格的原精加入第一液,在35 水浴箱中放置10m i n,再加入第二液于35 保持10m i n,于18 室温下注入细管,将分装好的细管置于4 冷藏器中平衡2~3h,然后用液氮熏蒸法进行冷冻处理。
1.4.3 稀释液配方 第一液2.9%柠檬酸钠液80 mL,卵黄20m L,果糖2.8%。
第二液2.9%柠檬酸钠液70mL,卵黄20mL,果糖2.8%,甘油10mL。
每100mL加青、链霉素各5~10万I U。
1.4.4 试验设计与步骤 将用于试验的细管分别打上标记,平衡处理后进行熏蒸冷冻,熏蒸距离3 c m,熏蒸时间8m in。
冻精活力测定分两步进行。
第一步,冷冻结束30m i n后进行活力测定,每次测定10支细管,重复测定2次,分别记录。
第二步,将冻精解冻后置于4 、15 、25 温度下保存,分别于2h、4h、6h、8h、10h进行活力测定,每次每组测定10支细管,重复2次,记录各时间组精子活力。
解冻时将细管于38 水中放置8s取出。
1.5 数据处理全部试验数据用t检验法进行分析,做出差异显著性评定。
2 试验结果2.1 精液冷冻效果测试细管经冷冻在液氮中放置30m i n后解冻,直观检查,精液色泽﹑外观及均匀度正常;显微镜下观察,精子密度适中,顶体完整,呈直线快速运动。
精子活力为0.3980.0322,测定值在输精要求的正常值范围内。
2.2 不同保存温度精子活力测定解冻后将细管在4 、15 、25 温度下分别保存2h、4h、6h、8h、10h做镜检。
测定表明,在4 下保存2~10h,各时间段精子活力和初解冻变化不大,测定值无明显差异。
在15 下保存2~10h,各时间段精子活力和初解冻接近,变化也不明显。
在25 下保存2~10h,各时间段精子活力和初解冻比较,精子活力随时间的延长呈下降趋势,8h和10h 组下降幅度较大,精子活力降低,死亡精子逐渐增多。
详见下表。
表1 不同保存温度和时间精子活力对比时间n4 n15 n252h300.3790.0125300.3820.0123300.3810.0105 4h300.3820.0143300.3800.0151300.3720.0159 6h300.3800.0158300.3780.0165300.3490.0223 8h300.3760.0159300.3750.0178300.3020.0215 10h300.3810.0170300.3790.0197300.2630.02872.2.1 同一温度组内测定 4 保存:2h、4h、6h、8h和10h各组精子活力分别为0.3790.0125、0.3820.0143、0.3800.0158、0.3760.0159和0.3810.0170。
各组精子活力与初解冻测定值接近,显微镜下观察精子呈直线运动,运动快而有力。
5组之间与初解冻差异不显著(P>0.05)。
15 保存:2h,4h,6h,8h,10h各组精子活力分别为0.3820.0123,0.3800.0151,0.378 0.0165,0.3750.0178,0.3790.0197。
各组精子活力与初解冻测定值接近,从表形值看后3组测定值略呈下降趋势。
显微镜下观察,各组精子均为直线向前运动,个别有摆动前行现象。
各组之间与初解冻差异不显著(P>0.05)。
25 保存:2h,4h,6h,8h,10h各组精子活力分别为0.3810.0105,0.3720.0159,0.349 0.0223,0.3020.0215,0.2630.0287。
其中前2组精子活力与初解冻测定值接近,后3组活力明显下降。
显微镜下观察,6h组和8h组少量精子运动缓慢,前行无力;10h组出现精子转圈或原地摆动和断尾,死亡精子增多,活力明显下降。
经显著性测定,6h组与前两组差异显著(P<0.05),8h和10h 组与前两组相比差异极显著(P<0.01),与6h组相比差异显著(P<0.05),8h和10h两组相比较差异也极显著(P<0.01)。
2.2.2 不同温度组间测定 保存4 ,15 和25 各时间组比较,2h和4h两组精子活力测定值接近,差异不显著(P>0.05)。
25 保存6h精子活力比4 和15 两组分别低0.031和0.029,差异显著(P<0.05)。
25 保存8h精子活力明显低于其他两组,分别低0.074和0.073,差异极显著(P< 0.01)。
25 保存10h精子活力显著低于其他两组,分别低0.118和0.116,差异极显著(P<0.01)。
12Jour nal of Ani m a l Science and Veterinary M edic i n e Vo.l29 No.3 20103 讨论与结论从冻精初解冻看,精子活力为0.398,达到了2009版牛冻精制作国家新标准(!0.35),符合试验的要求。
每批次冻精同时投入三种保存温度试验组合,消除了因冻精活力的差异而影响试验结果。