黄曲霉毒素检验方法
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一、目的
规范实验室检验方法。
二、内容
(一)试验准备
1、标定荧光计。
(1)、将仪器后的电源开关打开。
(2)、按SELECTTEST键,直至显示出AflaTest,按ENTER。
(3)、荧光计显示:START CALBRATION…OPEN THE LID
INSERT RED VIAL
打开仪器盖,将红色的真菌毒素标定管放入。一定要确认标定管是
否已放到了仪器的底部。
(4)、仪器显示:HIGHCAL 22PPB
如果这个值正好是所选分析方法规定的设定值,请按ENTER键。否则,从键盘上所规定的设定值,确认准确无误后,按ENTER键。
(5)、仪器显示:READING HIGH CAL…SA VING HIGH INENSTTY
OPEN THE LID
INSERT GREEN VIAL
打开仪器盖取出红色的标定管,插入绿色的真菌毒素标定管。一定
要确认标定管是否已充分插入仪器的底部。
(6)、仪器显示:LOW CAL 1.0PPB
如果这个值正好是所选分析方法规定的设定值,请按ENTER键.否则,
从
键盘上所规定的设定值,确认准确无误后,按ENTER键。
(7)、仪器显示:READING LIW CAL…SA VING HIGH INTENSITJY 接着显示:OPEN THE LID
INSERT GREEN VIAL
打开仪器盖取出绿色的标定管。
(8)、仪器显示:VICAM V1.3 READY
按SELECT TEST键,仪器显示: AFLATEST, 按ENTER键。
(9)、仪器显示:START RUN TEST OPEN THE LID (10)、插入黄色的真菌毒素标定管,其读数应该在分析方法的测定范围内。
(11)、荧光屏计标定工作完毕,可经进行样品分析了。荧光计每
周需要标定一次。如果需要重新标定,请按STOP键,再按OPIONS 键,直至仪器显示:CALIBRATE TEST
然后按ENTER键,仪器显示:AFLATEST
如果不是这样,按SELECT TEST键,直至仪器显示:AFLATEST,
按
ENTER键。然后,按照上面所述操作步骤进行。如果进行样品分析,按SELECT TEST键,直至仪器显示:AFLATEST键。
2、配制AflaTest显色液(一天配制一次)。
3、配制甲醇/水(60:40体积比)溶液(每周配制一次,或根据需要
配制)。
4、试剂空白试验(1ml甲醇+1ml显色液置于测试管中),荧光计读数
应为0。
5、纯水空白试验(2ml纯水置于测试管中),荧光计读数应为0。
(二)样品提取
1、称取25克磨细的样品,5克氯化钠,置于搅拌杯中。
2、加入125ml甲醇/水(60:40)溶液。
3、盖上搅拌杯的盖子,高速成搅拌1分钟。
4、取下盖子,将提取物到入折叠滤纸上,滤液收集于干净的容器中。
(三)提取物的稀释
1、移取20ml上步的滤液,置于干净的容器中。、
2、用20ml纯水将滤液稀释,混匀。
3、将上步稀释液通过玻璃纤维滤纸过滤,滤液收集于玻璃注射器筒中,量取10ml。
(四)分离柱色谱操作
1、将上步10 ml滤液(10ml=1.0g的样品),以1-2滴/秒的流速全部通过AflaTest-P亲和柱,直到空气进入到亲和柱中。
2、将10 ml纯水以2滴/秒的流速通过亲和柱中。
3、将7.2步再重新操作一次, 直到空气进入到亲和柱中。
4、用1ml色谱级甲醇以1-2滴/秒的流速淋洗亲和柱,将所有样品
淋洗液收ml玻璃试管中。
5、将1ml AflaTest显色液加到测试管的淋洗液中,混匀后,将测试管置于已标定好了的荧光计中。60秒后,读数。
(五)、如果要结束试验,按STOP键。