光合细菌的培养操作教程

光合细菌的培养操作教程

1、配制光合细菌菌液：

（1）配制比例：

光合细菌培养基、清水、菌种的配制比例为：0.5:80:20。

示例1：0.5公斤（500克）培养基+ 80升水+ 20升菌种（接种），配成100升的光合细菌菌液。

示例2（少量培养）：0.05公斤（50克）培养基+ 8升水+ 2升菌种（接种），配成10升的光合细菌菌液。

（2）配制方法：

下面以配制100升光合细菌菌液为例来说明配制方法：

①溶化培养基：取培养基0.5公斤（500克），用少量水溶化（可以用50℃左右的热水，溶化培养基的速度会快些），搅拌均匀，然后倒入一个容量在100升以上的容器中；

②配制培养液：往容器中加水到80升，80升培养液配制完成；

③接种：再加入20升菌种，并搅匀，100升菌液配制完成；

④装瓶（袋）：将配制好的菌液装入干净的透明容器（瓶、壶、塑料袋等），容器中留5%的空气在里面，密封待用。

菌液配制说明及注意事项：

a. 以上各成分的数量是以配制100升菌液为例来说明配制方法的，如配制其他数量的光合细菌菌液，各成分数量按比例增减即可;

b. 培养用水源的选择：

一般含杂菌较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水都可以，如井水、河水、自来水、蒸馏水和纯净水等，甚至干净的池塘水也行。

从经济、实用的角度考虑，地下水（如井水）含杂菌低，是最理想的培养水源；

清洁的地表水也可使用,如河水、池塘水等；

含氯量较高的自来水应敞口放置两天或调PH值至偏碱后使用；

蒸馏水及纯净水固然很好，但成本太高，可用于提纯菌种；

c. 培养用容器的选择：

必须为透明容器并清洗干净，透明的容器可让光合细菌最大限度的吸收到充分的光线，少量培养如饮料瓶、食用油壶等，规模培养如透明塑料桶、透明塑料袋等。

d. 菌种的接种量：

一般接种量为20-50%，即培养液与菌种的比例为4:1（4升培养液加1升菌种）到1:1（1升培养液加1升菌种），接种量最低不能低于20%。

接种量越高，光合细菌菌种越容易形成优势菌群而抑制其他杂菌生长，培养速度快，且培养成熟的浓度更高。但产出效率也越低，光合细菌易老化。

接种量越低，培养产出效率越高，但如果低于20%的接种量，光合细菌不容易形成优势菌群，培养初期易染杂菌，培养的成功率低。

我们推荐的接种量为20%，如果用太阳光培养，推荐的接种量为25-40%。

e. 容器不要装满培养液，留5%左右的空气在里面；实践证明, 光合细菌在微厌氧的条件下生长最好，也就是说，要留有一定的空气给它，又要适度的密封，光合细菌长得最好，还便于摇动均匀, 留一点空气在容器内，反而比不留空气长得快。

f. 如果有条件，您手上有PH试纸的话，可以测一下配好的菌液的PH值，一般菌液PH值在6.5-7.5之间；

2、光照培养：

通过以上操作，我们就有了配制好了的光合细菌菌液，现在，我们就要对菌液施以光照，这样，光合细菌有了培养基的营养物质，又获得了光照的能量，满足了光合细菌生长所需要的条件，光合细菌能够得到快速的生长和繁殖。

通过光照，菌液中的光合细菌开始生长，生长过程中，红色会越来越深，菌液越来越浑；几天后，菌液长成深红色并呈浑浊状态即为成熟，此时PH值为8.0-9.0。

根据您培养的数量，培养方法分为少量培养和规模培养；根据光照光源的不同，可分为灯泡培养和太阳光培养。

（1）少量培养：

如果您初次接触光合细菌，手上用于培养的菌种数量少，或者平时光合细菌用量较少，您可以采用少量培养的方法。

少量培养多使用白炽灯泡作光源，用白炽灯泡培养稳定性高，培养出来的光合细菌质量好，菌液浓度高，颜色鲜艳，可用作规模培养用的菌种。

少量培养方法非常简单，在气温高于30℃时（如夏季或春秋季里较热的时节），只需将菌液瓶围成一个圈，中间吊一个40-100W的白炽灯泡(钨丝灯，可发热的)，灯泡与瓶子距离在10-20公分，准备一个温度计监测培养温度，控制培养温度在30-38℃之间；

在气温低于30℃时（如冬季或春秋季里较冷的时节），我们可以使用纸箱保温培养,或用塑料布将全部菌液和灯泡遮盖起来以保温。

使用纸箱培养，用白炽灯泡作光源对菌液进行光照，同时灯泡本身发热，纸箱起保温作用，可提升纸箱内温度。

制作培养用纸箱：准备一个纸箱（如电脑纸箱、电视机纸箱等），纸箱顶部开一小半口(方便取放菌液瓶子)，纸箱中间悬挂一个40-100瓦的白炽灯(钨丝灯，可发热的)，在纸箱侧边钻一个小洞，从小洞中插入一根温度计(方便掌握箱内温度)，如右图：

箱内控制培养温度在30-38℃之间，温度太高可以在纸箱上戮孔散热或敞开培养，温度太低可以盖住纸箱上口，或在纸箱外用保温材料（如旧衣服、旧棉被等）加以包裹以提升箱内温度。

少量培养说明及注意事项：

①灯泡与瓶子距离在10-20公分，太远光照强度弱，太近光照太强；

②控制培养温度在30-38℃（菌液温度在28-35℃），最高不超过40℃，最低不低于25℃

③菌液瓶子至少每天摇动2次。

④由于热胀冷缩，在培养一天后，可以旋开瓶盖，放气排压，再盖上。

⑤培养好的光合细菌，又可以当菌种用，无限循环培养下去，不会老化或退化。菌种要保存好，放在阴凉干燥有光线的地方，同时要注意：夏天三个月、其他季节六个月要转培养一次，以保证菌种活力。

（2）室内规模培养：

在地面制作小池子，用来固定将要放在里面的塑料培养袋（也可以用木方来固定），将菌液装入塑料薄膜袋子中（可以使用虾苗袋子），塑料薄膜袋子两头密封好，进行培养，见右图：

使用60-100瓦白炽灯，灯与液面距离为20公分左右，每平方米用2-3个，室内设置加热装置，夏天则不需要，主要是冬天需要加热，北方有暖气片，南方可以使用煤炉（注意把煤气用管道排出室外），南方冬天也可以用电热丝，不过比较耗电。

这种方法的缺点是无法搅拌。只能静止培养，培养时间稍长一点。

（3）太阳光培养：

用太阳光作为光源培养，只需把菌液用一个大的不易破损的塑料袋装好（注意：使用太阳光培养时，塑料袋的培养成功率最高，其次是5升装的食用油壶），放在太阳底下晒即可，