【挑战杯】(符小燕)漆酶高产菌株的筛选及产酶条件的优化

旗开得胜

大学生科技创新

漆酶高产菌株的筛选和产酶条件的优化

符小燕刁惠萍

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指导教师林俊芳研究员

学院名称食品学院专业名称03食品科学与工程

摘要

漆酶是一种含铜的多酚氧化酶（Laccase ，p－diphenol oxidase ,EC1.10.3.2)，具有降解木质素，去除酚类和芳胺类化合物的毒性作用，漆酶的造纸工业，环境保护，食品工业具有广泛的应用价值。本课题主要选取实验室现有的大型真菌，及从野外采集华南地区特色菌株进行产漆酶菌株的初筛，并进行产酶条件的研究。实验结果如下：

（1）用PDA－Bavendamn方法进行漆酶菌株的初筛。从69个土样和本

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实验室现有的大型真菌菌株共200株，筛选出两个漆酶野生菌株M1、M2及十六个大型真菌漆酶菌株。

（2）选取两个野生菌株M1、M2和一个大型真菌菌株（菌株2号）进行液体发酵，优化产酶培养条件。

①比较研究了天然马铃薯培养基中添加不同营养物质的培养基对菌株M1，M14的产酶的影响。与其他培养基相比，添加有淀粉的PDA培养基漆酶活性较高。

②对于菌株2号，摇瓶培养比静止培养能明显加快产酶的速度，缩短了最高产酶的天数。

③不同碳源对菌株2号漆酶的分泌的影响很大，产漆酶最好的碳源是麦芽提取物，其次是淀粉和葡萄糖，最低的是蔗糖。

④不同的葡萄糖添加量对菌株2号漆酶分泌影响不显著。

⑤不同的氮源对菌株2号分泌漆酶活性影响很大，与无机氮相比，有机氮对漆酶分泌影响较大。最佳的氮源是酪蛋白胨，其次是酵母膏，漆酶活性最低是硝酸铵。

⑥铜离子的菌株2号漆酶分泌影响较大，与对照（铜离子浓度0mmol/L）相比，添加铜离子达到终浓度为0.1mmol/L，漆酶最高活性提高3倍。

(3) 比较目前研究最多的漆酶菌株侧耳和菌株2号分泌漆酶最高酶活，得出本实验筛选得到的菌株2号的最高酶活明显比侧耳的高，差不多是侧耳分泌漆酶最高酶活的2倍。

关键词漆酶筛选产酶条件

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