人教版高中生物选修一专题二《微生物的培养与应用》知识点归纳
人教版高中生物选修一提分教程 专题2 微生物的培养与应用 课题1 第2课时 含答案
第2课时实验操作及实验结果[学习目标] 1.学会培养基的制备方法。
2.掌握大肠杆菌的纯化方法。
3.了解菌种保藏所用的方法。
知识点一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基知识梳理1.操作步骤2．倒平板(1)在火焰旁右手拿锥形瓶，左手□01拔出棉塞。
(2)右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过□02火焰。
(3)左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基(约10～20 mL)倒入培养皿，左手立刻盖上□03皿盖。
(4)待平板冷却凝固后，将平板□04倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上。
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。
你用什么办法来估计培养基的温度？提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
2．为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
典题分析题型一培养基的制备过程分析[例1]下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是()A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板D．待平板冷却凝固后将平板倒过来放置解题分析制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，其顺序不能颠倒，A错误；牛肉膏比较黏稠，所以称好后需将称量纸一同放入烧杯中加热，当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸，B 正确；待培养基冷却至50 ℃左右，开始倒平板，C正确；平板冷却凝固后倒置，D正确。
[答案] A知识拓展(1)培养基灭菌后，需冷却至50 ℃左右时才能倒平板，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固。
(2)整个操作在酒精灯火焰旁进行，避免周围环境中微生物的污染。
(3)平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
(4)倒平板时不要将培养基溅在皿盖与皿底之间，否则此培养基不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
高二人教版选修一生物所有知识点归纳总结
高二人教版选修一生物所有知识点归纳总结一、知识概述《传统发酵技术的应用》①基本定义：传统发酵技术就是利用微生物的发酵作用来制作食品或其他产品的技术。
咱就说像酿酒，就是利用酵母把糖变成酒精的这么个过程。
②重要程度：在生物学科里是了解微生物应用的开端，对理解微生物与人类生活关系很重要。
③前置知识：要知道微生物的一些基本特征，比如微生物个头小、繁殖快等。
④应用价值：在生活里酿醋、做酸奶都是靠这个技术。
要是没这技术，就没那些美食。
《微生物的培养与应用》①基本定义：按微生物生长的需求，给微生物提供合适的营养物质等条件让它们大量繁殖。
就好比种花都得用合适的土、水一样，微生物生长也得有合适环境。
②重要程度：这可是微生物学研究、微生物工业生产的基础。
没有这个，你想量产疫苗之类的根本不行。
③前置知识：得懂一些化学知识，像培养基里各种营养成分的化学性质啥的。
④应用价值：制药厂生产抗生素，就得用微生物培养，把能产抗生素的微生物养大了，才能出产品。
《植物的组织培养技术》①基本定义：在无菌条件下，把植物的组织或者细胞培养成完整植株的技术。
感觉就像是从植物身上取个小零件，然后把它变成一整个新植物。
②重要程度：对植物繁殖、植物优良品种保存和脱毒种苗的生产意义非凡。
比如珍稀植物快灭绝了，能用这技术大量繁殖。
③前置知识：植物生理学的一些基础知识得知道，像植物细胞全能性这个概念。
④应用价值：花卉行业可以用这个快速繁殖花卉，增加产量，还能保持花卉的优良性状。
《酶的研究与应用》①基本定义：酶是一种生物催化剂，酶的研究与应用就是研究酶的性质然后利用它来处理一些工业、生活上的事情。
打个比方，就像有个超级助手，能快速把东西转化成别的，又快又准。
②重要程度：在生物工程、食品加工业等领域起关键作用。
在食品加工的时候能让东西更美味、营养保留更好。
③前置知识：要懂得化学里催化剂的概念，然后就是生物学里新陈代谢过程中生化反应的基本知识。
④应用价值：在洗衣粉里加酶，可以更有效地清除污渍。
高中生物选修一 专题二 课题1微生物的实验室培养知识点背诵
选修一专题二课题1微生物的实验室培养考点一培养基1、概念？种类？在液体培养基中加入？后可以制成固体培养基2、琼脂的来源？本质？特性？（P14最左侧）3、培养基一般都含有哪些成分？4、培养基在提供主要营养物质的基础上，还需要满足微生物生长的哪些要求？培养乳酸菌时需要添加？培养霉菌是需要将PH调至？培养细菌是需将PH调至？考点二无菌技术1、获得纯净培养物的关键是？2、如何避免杂菌的污染？3、消毒的概念？常用的消毒方法有哪些？4、灭菌的概念？常用的灭菌方法有哪三种？5、灼烧灭菌的对象A:微生物的接种工具，如？直接在酒精灯火焰的？灼烧B:在接种过程中，？等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌6、干热灭菌的条件？对象？干热灭菌过程中灭菌对象要用？包裹严密（附录4）灭菌物品为什么不能与干热灭菌箱内壁的铁板接触？（附录4）7、高压蒸汽灭菌的条件？过程？（附录4）对象：如培养基8、除了消毒和灭菌，实验室里还可以用？方法进行消毒考点三制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、步骤？2、灭菌过程中用什么方法？3、倒平板时的温度是？过程？倒平板后平板倒置的原因？（即可防止皿盖上的水珠落入培养基，又可以避免培养基中的水分过快地挥发）考点四纯化大肠杆菌1、微生物接种的方法最常用的有？2、菌落的概念？3、平板划线法的概念？操作过程？用的工具？（接种环）4、稀释涂布平板法的概念？过程？用的工具？（涂布器）5、大肠杆菌的培养温度？是否需要设置空白对照？（P20最上）对照组有菌落生长说明什么？6、为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，对于频繁使用的菌种可以采用？方法。
具体过程？此方法的缺点？对于需要长期保存的菌种，可以采用？方法。
人教版高级高中生物选修一专题二微生物的培养与应用知识点归纳
人教版高级高中生物选修一专题二微生物的培养与应用知识点归纳文件排版存档编号：[UYTR-OUPT28-KBNTL98-UYNN208]专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。
·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。
在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。
微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。
液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。
·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。
合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。
天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。
·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。
选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。
鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。
·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。
·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。
如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。
异养微生物只能利用有机碳源。
单质碳不能作为碳源。
·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。
如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。
只有固氮微生物才能利用N2。
·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2020年人教版高中生物选修1专题2微生物培养和应用知识点总结
课题 1 微生物的实验室培养一、培养基 1． 培养基的类型及其应用：标准 培养基类型配制特点主要应用固体培养基加入凝固剂较多菌种分离,鉴定,计数半固体培养 物理性质基加入凝固剂较少菌种保存液体培养基不加入凝固剂工业生产，连续培养合成培养基 由已知成分配制而成，培养基成分明确 菌种分类、鉴定化学组成 天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明 工业生，产降低成本确鉴别培养基 目的用途选择培养基添加某种指示剂或化学药剂 添加（或缺少）某种化学成分菌种的鉴别 菌种的分离2、琼脂是从红藻中提取的_多糖__________，在配制培养基中用作为____凝固剂_____ __。
3、培养基的化学成分一般含有__水_______________、________无机盐______________、 ____________碳源_____、________氮源 ________四类营养成分。
培养基成分还需满足微生物生长对__pH_________、_特殊营养物质________、氧气_______ 等要求。
4、牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供____碳源、氮源、维生素_______ ___________ ___________ 等营养物质。
5、培养乳酸杆菌时需要添加__维生素_________ ，培养霉菌时需要将培养基 pH 调节 为____酸性_______ ___________ ，培养细菌时需要将 pH 调节为 __中性或微碱性 _________ ___________ 。
6、培养基的配制原则：① 目的 制量。
要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配② 营养 要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。
③ pH 酸性。
要适宜：细菌培养基 pH 呈 中性或微碱性性，霉菌培养基呈二、无菌技术1．获得纯净培养物的关键是 防止外来杂菌的入侵。
2、 无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近___________ _______ 进 行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与______周围物品_____ 相接触。
人教版高中生物选修一期末综合复习：微生物的培养和应用 知识点
1、培养基的类型及其应用注意：（1）选择培养基：①特点：培养基中加入有利某种微生物生长繁殖所需的营养物质，以抑制或阻止不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长；②用途：选择出用于培养、分离出特定的微生物 (如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐) （2）鉴别培养基：①特点：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或者化学药品；②用途：鉴别不同种类的微生物，如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)2、培养基的营养成分：水、无机盐、碳源、氮源。
还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。
3、无菌技术——（微生物接种技术的核心）获得纯净培养物的关键是：防止杂菌污染。
（1）消毒指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。
分为煮沸消毒法，巴氏消毒法（不耐高温的液体，如牛奶。
原因：可以杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的营养成分不被破坏。
）化学药剂消毒法（如酒精、氯气、石碳酸等），紫外线消毒法（原理：破坏DNA的结构）。
（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
分为灼烧灭菌法（接种环、接种针等金属工具、试管口）、干热灭菌法（吸管、培养皿等玻璃器皿、金属用具，所用器械是干热灭菌箱）、高压蒸汽灭菌（培养基、无菌水等，所用器械是高压蒸汽灭菌锅）（3）防止杂菌污染的操作：在酒精灯火焰旁拔出锥形瓶瓶盖；在酒精灯火焰旁打开培养皿一条缝；打开的锥形瓶的瓶口通过火焰；平板冷却凝固后倒置。
4、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算—称量—溶化—灭菌—倒平板（1）各营养成分都有且有一定的比例。
牛肉膏提供碳源、氮源和生长因子等；蛋白胨提供碳源、氮源和生长因子等；琼脂作为凝固剂。
（2）要将平板倒置的原因：防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
5、纯化大肠杆菌（1）纯化方法：微生物接种的方法，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
高中生物选修一知识点总结(7篇)
高中生物选修一知识点总结专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。
2、有氧发酵：醋酸发酵、谷氨酸发酵无氧发酵：酒精发酵、乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式：出芽生殖（主要）、分裂生殖、孢子生殖4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH+2CO26、20℃左右最适宜酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌。
在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色。
在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
8、醋酸菌是单细胞细菌（原核生物）,代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂。
9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
2C2H5OH+4O2→CH3CO OH+6H2O10、控制发酵条件的作用：①醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。
②醋酸菌最适生长温度为30～35℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。
③有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。
11、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒（→醋酸发酵→果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。
在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
先在试管中加入发酵液2mL，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色。
13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的;出料口是用来取样的。
高二生物选修一专题二：微生物的培养和应用复习提纲
高二生物选修一专题二：微生物的培养和应用考点一 微生物的实验室培养(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH 、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)分类⎩⎪⎨⎪⎧固体培养基：含凝固剂液体培养基：不含凝固剂2.无菌技术(1)关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)不同对象的无菌操作方法3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
考点二 微生物的筛选和计数2.分解纤维素的微生物的分离 (1)纤维素酶①组成：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C 1酶、Cx 酶和葡萄糖苷酶。
②作用纤维素――→C 1酶Cx 酶纤维二糖――→葡萄糖苷酶葡萄糖 (2)纤维素分解菌的筛选①原理纤维素分解菌 ↓⎭⎪⎬⎪⎫刚果红纤维素→红色复合物――→纤维素酶红色消失，出现透明圈 ②筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
③培养基：以纤维素为唯一碳源的选择培养基。
④实验流程土壤取样：富含纤维素的环境选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的浓度 梯度稀释：制备系列稀释液涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落3.分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。
人教版高中生物选修一专题二《微生物的培养与应用》知识点归纳
专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。
·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。
在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。
微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。
液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。
·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。
合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。
天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。
·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。
选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。
鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。
·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。
·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。
如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。
异养微生物只能利用有机碳源。
单质碳不能作为碳源。
·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。
如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。
只有固氮微生物才能利用N2。
·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
高中生物选修一专题二微生物实验室培养知识点填空+答案
专题二微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养一、课题背景1．研究和应用微生物的前提是。
2．在实验室培养微生物，一方面需要，另一方面需要。
二、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质称为培养基。
2．种类：根据培养基的物理性质可将培养基可以分为、和半固体培养基。
3．琼脂：是一种从红藻中提取的，在℃以上熔化，在℃以下凝固，在常规培养条件下呈现。
琼脂是制备培养基时最常用的剂。
4．营养构成：各种培养基一般都含有水、、和无机盐，另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。
例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加，培养霉菌时需将培养基的pH调至，培养细菌时需将pH调至或，培养厌氧微生物时则需要提供的条件。
5．牛肉膏，蛋白胨来源于，含有、和等营养。
三、无菌技术1．获得纯净培养物的关键是防止的入侵。
2．无菌技术围绕着展开，主要包括以下几个方面：(1)对实验操作的、操作者的衣着和进行清洁和。
(2)将用于微生物培养的器皿、和等进行。
(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_____ ______相接触。
3．无菌技术的目的：(1)防止，(2)避免。
4．消毒和灭菌四、大肠杆菌的纯化培养(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：1．计算：依据是培养基 的比例，计算配制某一体积（如100ml ）的培养基时，各种成分的用量。
2．称量：牛肉膏比较 ，可用玻棒挑取到 上，同其一块称量。
牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要 ，称后及时 。
3．溶化： 和称量纸＋少量的水（ ）取出_________→ 加_________和_________ →加 (注意：不断用玻璃棒搅拌，防止_____________而导致_____________)。
当_________完全熔化后→ 补加蒸馏水至100 mL 。
调节__________后再进行灭菌。
4．灭菌⎩⎪⎨⎪⎧培养基：_________灭菌培养皿：_____灭菌5．倒平板：待培养基冷却至_____左右时，在 附近倒平板。
高中生物选修1专题2微生物的培养与应用
4.细菌的计数
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 1.土壤取样 2.制备培养基
牛肉膏蛋白胨培养基—对照
选择培养基 -- 尿素为唯一氮源
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 3.接种、培养、观察
稀释涂布平板接种 稀释液的倍数的范围: 真菌:102～104 细菌:104～106 放线菌:103～105
2.灭菌 以强烈的化学或物理方法消灭体内外所有 微生物,包括芽孢和孢子。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形 的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、 高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可 以随风飘散。当环境适宜的时候，芽孢又可以萌发，形 成一个细菌.
常用消毒的方法：
每一个浓度做3个或3个以上平板,求平均值
重复实验--增强说服力和准确性
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 3.接种、培养、观察
时间 细菌 1-2d 放线菌 5-7d 霉菌 3-4d
温度 30～37OC 25～28OC
25～28OC
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作
筛选方法: 用显微镜直接计数 间接计数—统计平板的菌落数
间接计数法（活菌计数法）: 原理: 在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上
所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成 的，即一个菌落代表原先的一个细菌
方法: 稀释涂布平板法
计算公式:（C÷V）x M
注意事项
①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30— —300的平板上进行计数。
1.土壤取样 2.制备培养基 3.接种、培养、观察 4.细菌的计数
人教版高中生物选修一2.1《微生物的培养与应用--微生物的实验室培养》ppt课件
该增加的成分
。
琼脂（或凝固剂）
一、课题目标： 了解有关微生物及培养基的基础知识，
进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点：
无菌技术的操作。
三、技能目标：
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平 板划线法等基本操作技术，熟练、规范地 进行无菌操作，成功地培养微生物。
倒平板技术
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时， 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的 温度？
菌种的保存
1、临时保藏： 接种到固体斜面培 养基，菌落长成后 置于4℃冰箱保存。
2、长期保存： 甘油冷冻管藏法
本课题知识小结:
四、课题成果评价
（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无 菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新 制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基 本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作 是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明 接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因， 再次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明 显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察 到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生 良好的科学态度与习惯。
例3．右表是某微生物培
养基成分，请据此回答： 编号
（1）右表培养基可培养 ① 的微生物类型
是 自养型微生。物
②
（2）若不慎将过量 NaCl加入培养基中。
③
如不想浪费此培养基， ④
可再加入含碳有机.物
⑤
⑥
⑦
成分 粉状硫 （NH4） 2SO4 K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2 H2O
微生物的培养与应用知识点总结
微生物的培养与应用是微生物学的重要内容，涉及到微生物的生长、繁殖、控制以及在各个领域的应用。
以下是一些微生物培养与应用的知识点总结：
1. 培养基：微生物培养的基础是培养基，它提供了微生物生长所需的营养物质和环境条件。
培养基可以分为固体培养基（琼脂糖培养基）和液体培养基（肉汤培养基）。
2. 培养技术：常用的微生物培养技术包括平板法、液体培养法、摇瓶培养法等。
平板法适用于菌落计数和纯培养，液体培养法适用于大规模培养和代谢产物的提取，摇瓶培养法适用于微生物生长动力学研究。
3. 培养条件：微生物的生长需要适宜的温度、pH值、氧气和营养物质等条件。
不同微生物具有不同的生长条件要求，例如，人体共生菌一般在37摄氏度下生长，而一些嗜热微生物则需要较高的温度。
4. 培养纯化：为了获得纯种微生物，常常需要进行培养纯化。
常用的方法包括单菌分离、传代培养和鉴定技术等。
传代培养是通过连续传代使微生物形成纯种，鉴定技术可以通过形态学、生理生化特性和分子生物学方法确定微生物的种属。
5. 微生物应用：微生物在各个领域具有广泛的应用，包括食品工业、制药工业、环境保护、农业等。
例如，乳酸菌可以用于酸奶和乳酸发酵食品的生产，放线菌可以产生抗生素，生物修复可以利用微生物降解污染物。
6. 发酵技术：发酵是微生物应用的重要手段之一，通过微生物的代谢活动产生有用的产物。
发酵技术在酿酒、酱油、乳制品和抗生素等行业得到广泛应用。
这些是微生物培养与应用的一些基础知识点，还有很多深入的内容和应用领域可以继续学习和探索。
高中生物选修1第二讲 微生物的培养与应用
第二讲微生物的培养与应用考点一培养基及微生物的纯化培养技术1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
(2)种类①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
(3)成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2．无菌技术(1)关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)常用方法3．大肠杆菌的纯化培养(1)制备固体培养基的步骤计算溶化(2)纯化大肠杆菌①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(3)菌种的保存①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
【基础小题】1．判断正误(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(√)(2)由于物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型(×)(3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(√)(4)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌(×)(5)配制培养基时应先灭菌再调pH(×)(6)平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧(√)(7)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(×)(8)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落(√)(9)斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株(×)(10)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(×)2．连线无菌技术的常用方法及适用对象3．热图导析：下图是倒平板的操作，请据图填空(1)请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。
人教版高中生物选修1-第二章章末复习：《微生物的培养与应用》核心知识总结
专题2：微生物的培养与应用
一、培养基的种类及用途
（1）按培养基物理性质划分:
（
2）按培养基的化学成分划分：
（3）按培养基的功能分：
二、微生物的营养
(1)碳源
(2)氮源：
关于氮源物质的来源和作用：
①对许多微生物来说，既可利用无机含氮化合物作为氮源，也可利用有机含氮化合物作为氮源。
②固氮微生物可以利用氮气作为氮源。
③铵盐、硝酸盐等既可作为微生物最常用的氮源，也可作为某些化能自养微生物的能源物质。
如消化细菌。
④自养微生物与异养微生物类型的划分主要是依靠能否以CO2作为生长的主要或唯一的碳源，而不是由氮源决定。
(3)水：水是微生物生命活动必需的一种重要物质。
(4)无机盐
无机盐对微生物的生理功能有：①构成微生物细胞的组成成分；②作为酶的组成成分，也是某些酶的激活剂；③调节和维持微生物细胞的渗透压和pH；④某些无机盐具有特殊功能，如化能自养细菌的能源物质NH3等。
(5)生长因子。
(6)培养微生物还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
三、微生物的纯化培养（两种接种方法）
1.平板划线法：操作简单，但单菌落不易分离
(1)无菌操作：在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环。
操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可。
人教版高中生物选修一专题2微生物的培养与应用_课题1 微生物的实验室培养 (1)
四、课题成果评价
（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后
无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重 新制备。
（二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小
基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操 作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说 明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因， 再次练习。
答：无菌技术还能有效避免操作 者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或 灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)
㈠.制备牛肉膏蛋白胨培养基
答：可以用手触摸盛有培养基的 锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不 烫手时，就可以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的 微生物污染培养基。
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝 固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
注:染料孟加拉红对细菌和放线菌有毒害作用,链霉素具 有抑制或杀死细菌的作用,而两者对真菌均无不利影响.
2、培养基的营养构成
碳源 为微生物提供碳元素的物质 氮源（ 为微生物提供氮元素的物质 无机盐（mineral salts） 水）
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配制的培养基要满足微生物的营养需求
如某种细菌培养基的营养构成 1000牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
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专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,就是进行微生物培养的物质基础。
·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基与固体培养基。
在液体培养基中加入凝固剂琼脂(就是从红藻中提取的一种多糖,在配制培养基中用作凝固剂)后,制成琼脂固体培养基。
微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落。
根据菌落的特征可以判断就是哪一种菌。
液体培养基应用于工业或生活生产,固体培养基应用于微生物的分离与鉴定,半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。
·按照成分培养基可分为人工合成培养基与天然培养基。
合成培养基就是用成分已知的化学物质配制而成,其中成分的种类比例明确,常用于微生物的分离鉴定。
天然培养基就是用化学成分不明的天然物质配制而成,常用于实际工业生产。
·按照培养基的用途,可将培养基分为选择培养基与鉴定培养基。
选择培养基就是指在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长。
鉴别培养基就是根据微生物的特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的,用以鉴别不同类别的微生物。
·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。
·碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。
如CO2、NaHCO3等无机碳源;糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。
异养微生物只能利用有机碳源。
单质碳不能作为碳源。
·氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。
如N2、NH3、NO3-、NH4+(无机氮源)蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。
只有固氮微生物才能利用N2。
·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性,培养细菌就是需要将pH 调至中性或微碱性,培养厌氧型微生物就是则需要提供无氧的条件·无菌技术·获得纯净培养物的关键就是防止外来杂菌的入侵,要注意以下几个方面:①对实验操作的空间、操作者的衣着与手,进行清洁与消毒。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具与培养基等器具进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其她外来微生物污染外,还有什么目的？答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
·消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温与的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢与孢子)。
消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对于一些不耐高温的液体)还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。
灭菌则就是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢与孢子。
灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
灭菌方法:①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械就是干热灭菌箱 ;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械就是高压蒸汽灭菌锅。
④表面灭菌与空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械就是紫外灯。
比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢与孢子能否被消灭消毒较为温与部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)方法步骤:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
(2)倒平板操作的步骤:①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。
②右手拿锥形瓶,将瓶口迅速通过火焰。
③用左手的拇指与食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10～20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。
④等待平板冷却凝固,大约需5～10min。
然后,将平板倒过来放置,使培养皿盖在下、皿底在上。
·倒平板操作的讨论1、培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。
您用什么办法来估计培养基的温度？提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
3、平板冷凝后,为什么要将平板倒置？答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
4、在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物不？为什么？答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。
纯化大肠杆菌(1)微生物接种的方法最常用的就是平板划线法与稀释涂布平板法。
(2)平板划线法就是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。
将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就就是菌落。
(3)稀释涂布平板法就是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
分为系列稀释操作与涂布平板操作两步。
(4)用平板划线法与稀释涂布平板法接种的目的就是:使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种。
(5)平板划线法操作步骤:①将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红。
②在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞。
③将试管口通过火焰。
④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。
⑤将试管通过火焰,并塞上棉塞。
⑥左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。
注意不要划破培养皿。
⑦灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。
重复以上操作,在三、四、五区域内划线。
注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
⑧将平板倒置放入培养箱中培养。
·平板划线操作的讨论1、为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环不？为什么？答:操作的第一步灼烧接种环就是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环就是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。
划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境与感染操作者。
2、在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？答:以免接种环温度太高,杀死菌种。
3、在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总就是从上一次划线的末端开始划线？答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
(6)涂布平板操作的步骤:①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。
②取少量菌液,滴加到培养基表面。
③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8～10s。
④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
涂布平板操作的讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。
结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作？提示:应从操作的各个细节保证“无菌”。
例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其她物体、吸管要在酒精灯火焰周围;等等。
菌种的保存(1)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。
①临时保藏方法将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养。
当菌落长成后,将试管放入4℃的冰箱中保藏。
以后每3～6个月,都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。
②缺点:这种方法保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异。
(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。
在3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后灭菌。
将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在－20℃的冷冻箱中保存。
疑难解答(1)生物的营养营养就是指生物摄取、利用营养物质的过程。
营养物质就是指维持机体生命活动,保证发育、生殖所需的外源物质。
人及动物的营养物质:水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。
植物的营养物质:矿质元素、水、二氧化碳等三类。
微生物的营养物质:水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。
(2)确定培养基制作就是否合格的方法将未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天,无菌落生长,说明培养基的制备就是成功的,否则需要重新制备。
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数尿素就是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸收。
只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素,就是因为她们能合成脲酶。
尿素最初就是从人的尿液中发现的筛选菌株(1)实验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其她微生物生长。
(2)选择性培养基在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其她种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。
(3)配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如,培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养能固氮的微生物;加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
统计菌落数目(1)测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法与显微镜直接计数。
(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活细菌。
为了保证结果准确,一般设置3～5个平板,选择菌落数在30～300的平板进行计数,并取平均值。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,因此,统计结果一般用菌落数而不就是活菌数来表示。
采用此方法的注意事项:1、一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数2、为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入TTC 3、本法仅限于形成菌落的微生物设置对照设置对照的主要目的就是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
对照实验就是指除了被测试的条件以外,其她条件都相同的实验,其作用就是比照试验组,排除任何其她可能原因的干扰,证明确实就是所测试的条件引起相应的结果。
实验设计实验设计包括实验方案,所需仪器、材料、用具与药品,具体的实施步骤以及时间安排等的综合考虑与安排。