利用酶联免疫法和化学发光法对乙肝五项检测结果的对比分析

利用酶联免疫法和化学发光法对乙肝五项检测结果的对比分析
目的对比分析酶联免疫法和化学发光法对乙肝五项检测的结果，以寻找一种更为准确、快速的检测方法。

方法对少见模式的50例和常见模式的50例血清标本采用酶联免疫法和化学发光法进行检测，对比分析两种检测方法的结果。

结果经过检测可看出两种检测方法检测结果基本一致。

结论对于乙肝五项检测采用化学发光法进行检测，结果较为准确灵敏，值得在临床推广应用。

标签：酶联免疫法；化学发光法；乙肝五项；检测结果；对比分析
乙型病毒性肝炎（HBV）在我国发病率较高，而对于乙肝五项的检测常用酶联免疫法（ELISA），该方法设备简单、易于开展，在临床应用较为广泛。

随着化学发光技术的不断发展，被逐渐应用于免疫学检验，该方法准确性高、灵敏度强、反应迅速、影响因素少；临床研究证实了化学发光法优于酶联免疫检测法[1]。

为了进一步证实化学发光法的优越性，我院对乙肝五项检测结果进行了对比分析，现报告如下。

1临床资料与方法
1.1标本来源对我院乙肝患者用ELISA法筛选出少见模式50例，分为单独HBsAg（+）5例；HBsAg（+）、HBeAg（+）13例；HBsAg（+）、HBsAb（+）6例；单独HBeAg（+）7例；HBsAb（+）、HBeAb（+）12例；HBeAb（+）7例。

另选出常见模式50例，分别为五项全阴15例；大三阳即HBsAg（+）、HBeAg （+）、HBcAb（+）6例；小三阳即HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）7例；HBsAb（+）12例；HBsAb（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）10例。

1.2仪器与试剂酶标仪；北京普朗新技术有限公司生产的DNM-960酶标仪，ELISA法检测试剂为上海科华生物工程股份有限公司生产，化学发光为四川迈克生物科技股份有限公司生产的IS 1200全自动化学发光测定仪及配套试剂。

1.3方法试剂操作按试剂盒说明书，仪器操作按仪器使用说明书，ELISA法筛选出的标本当天即在迈克化学发光免疫分析仪上检测，同时记录下两种方法的结果。

2结果
2.1两种检测方法对50例少见模式的测定结果测定结果显示，34例ELISA 法HBsAg阳性的标本用化学发光法分析只有4例仍为阳性，另外30例则为阴性，这30例ELISA法阳性而化学发光法阴性的标本ELISA法OD/cutoff值范围在1.03～
3.3之间，而仍为阳性的4例OD/cutoff值则在1
4.89～20.15之间；35例ELISA法HBeAg阳性的标本有30例用化学发光法测得结果为阴性，这30例HBeAg ELISA法OD/cutoff值范围在1.18～3.78之间，而化学发光法也阳性的5例其ELISA法OD/cutoff值均在1
5.01～28.69之间；ELISA法HBcAb为阴性的
28例少见模式中，化学发光法测得HBcAb均为阳性，都转为常见模式。

2.2两种检测方法对50例常见模式的测定结果测定结果显示，ELISA法全阴的18例标本化学发光法测得16例仍为阴性，另有2例测得HBsAb阳性。

其余几种模式则两种方法测得结果比较吻合，50例中，HBsAg阳性17例和HBeAg 阳性7例其ELISA法OD/cutoff值范围在14.28～29.33之间。

3讨论
通过本研究的测定可以看出，在单独HBsAg（+），HBsAg（+）、HBeAg（+），HBsAg（+）、HBsAb（+），单独HBeAg（+）4种少见模式中，HBsAg和HBeAg ELISA法阳性而化学发光法阴性的标本，其ELISA法OD/cutoff值在1.2～4.3之间，而化学发光法测得仍为阳性的标本，其ELISA法OD/cutoff值则均>14.0。

结果表明，ELISA法少见模式中HBsAg和HBeAg的低值阳性（OD/cutoff在1.2～4.3之间）为假阳性，而OD/cutoff值较高的阳性（OD/cutoff值则均>14.0）则两种方法很吻合，提示应注意低OD/cutoff值标本的假阳性问题。

在ELISA法检测乙肝血清标志物过程中，为了避免干扰，我们在检测之前增加一项血液标本处理程序：即标本采集后，置37℃水浴2h，待其完全凝固后将标本3000r/min离心15min分离血清。

目前，医院为方便患者就医，门诊抽血延长到中午12时，并要求当日发出检验报告。

由此便出现标本水浴处理时间短，血球沉降不充分，试管壁上有血痂，快速离心导致溶血等现象，从而因血球中过氧化物酶溶出粘附于酶标板未被洗去，产生辣根过氧化物酶样作用而显色致假阳性。

而化学发光法是测定荧光强度的变化率，从而决定被测物质的浓度，不受黄胆溶血及脂血影响，因此其假阳性率较低。

少见模式HBsAb（+）、HBeAb（+）及HBeAb（+）ELISA法检测为HBeAb 阳性，HBcAb阴性，而化学发光法检测则HBeAb伴随HBcAb同时阳性。

这主要因为ELISA法测HBcAb标本是1∶30稀释后检测，而测HBeAb则用原血清。

故而出现很多HBeAb阳性而HBcAb阴性模式，而化学发光法均用的原血清，所以不存在此问题。

对常见模式的检测，ELISA法、化学发光法两种方法结果非常一致。

综上所述，对于乙肝病毒血清标志物的检测，化学发光法与传统的ELISA 法相比，灵敏度高、线性范围宽、反应时间短、结果准确。

对于急诊病人或ELISA 法检测出现少见模式或需要复查的标本，可用化学发光法检测，以确保检验结果的准确[2]。

参考文献：
[1]司志霖，蔡晓宁.化学发光免疫分析与酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒标志物比较分析[J].现代医药卫生，2013（02）.
[2]张玉萍.酶联免疫反应加速仪在化学发光法检测HBsAg的临床评价[J].航空航天医学杂志，2012（05）.。