溶液的准确量取
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溶液的准确量取
移液枪操作规范及注意事项
一、操作规范
1 量程选择
为确保更好的准确性和精度,建议移液量在吸头的20(10)%-100%量程范围内,建议适当使用量程范围如表1:
2 吸头安装
将枪头套筒顶端插入吸头(移液枪与吸头要相匹配,吸头规格见表2)。轻轻用力下压的同时把手中的移液枪按逆时针方向旋转180度。切忌用力过猛,更不能用跺吸头的方法来进行安装,因为那样做会对移液枪造成不必要的损伤。
枪头卡紧的标志是略微超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰地密封圈。另外,吸取一定量的液体后垂直静置移液枪,如果没有液体往下滴也表明枪头密封良好。
3 容量设定
正确的容量设定分为两个步骤:一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调,当容量值接近自己的预想值以后,应将移液枪垂直放置在眼前,平视,慢慢将容量值调至自己的预想值,从而避免视觉误差造成的影响。
在容量设定时,从大值调整到小值时,刚好就行;但从小值调整到大值时,需要超过设定容量1/3圈后再返回,因为计数器里面有一定的空隙,需要弥补。
4 预洗枪头
从理论上讲,安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体
吸取、排放2-3次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。
注意:对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性,但对于高温或低温样品,吸头润洗会降低操作准确性。
5 吸液与放液
5.1 前进移液法(常用方法)
用大拇指将按钮按下至第一停点,吸头浸入液体中(浸入倾斜度控制在20度之内,保持竖直为佳;浸入深度如表3),然后慢慢松开按钮回原点,松开时一定要保持平稳,速度适中。过快的吸液速度容易导致跳液现象,造成样品浸入套柄,带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。将枪头头部靠在器壁上,约成10°~20°倾角,慢慢按下推动按钮直到遇到一个阻力(第一停点),停1~2s,继续推至终点(第二停点),完全排出液体,保持推动按钮至终点的状态取出移液器。
5.2 反向移液法
此法一般用于转移高粘度液体,生物活性液体,易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余液体。
具体操作如下:先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点,接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点,取下有残余液体的枪头,弃之。
为避免液体浸入枪体,不建议在满量程情况下进行此项操作。
6 卸掉吸头
按下卸枪头按钮,退下吸头(有的移液器不带卸枪头器,则手动卸除吸头)。使用过的吸头一定不能和未使用的新吸头混放,以免导致交叉污染。
移液枪使用完毕后需将量程调至最大值,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧,同时将移液枪垂直挂在移液枪架上。
二、移液枪使用过程中的注意事项
1、勿将移液枪浸入溶液中;
2、转移挥发性液体,如醋酸、盐酸、乙醇、电泳染色液、脱色液等,请使用移液管;
3、不可吸取温度过高(70℃)的液体,以免蒸汽浸入枪体腐蚀活塞;
4、套有吸头的移液枪,不论吸头中是否有液体,请保持枪体垂直,请勿倾斜或平放甚至倒置,谨防液体流入活塞室腐蚀移液枪活塞;
5、移液枪使用完毕后一定将量程调至刻度最大值,垂直挂在枪架上;
6、如果发现枪体污染,或在操作过程中出现液体进入枪体的现象,请及时与仪器负责人员联系。
刻度移液管的使用和注意事项
常用的移液管有1,2,5和10mL等规格。
1.移液管使用前首先要看一下移液管标记(是否标“吹”)、准确度等级、刻度标线位置等。
2.吸液:用右手的拇指和中指捏住移液管的上端,将管的下口插入欲吸取的溶液中,插入不要太浅或太深,一般为10~20mm处,太浅会产生吸空,把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液,太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿吸耳球,接在管的上口把溶液慢慢吸入,先吸入该管容量的1/3左右,用右手的食指按住管口,取出,横持,并转动管子使溶液接触到刻度以上部位,以置换内壁的水分,然后将溶液从管的下口放出并弃去,用吸耳球从上端管口吹气,将末端保留溶液吹走,然后,用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉。如此用反复洗3次后,即可吸取溶液至刻度以上,立即用右手的食指按住管口。
3.调节液面:将移液管向上提升离开液面,用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉;管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上,管身保持直立,略为放松食指(有时可微微转动吸管)使管内溶液慢慢从下口流出,直至溶液的弯月面底部与标线相切为止,立即用食指压紧管口。看刻度时,应将移液管的刻度与眼睛平行,以最下面的弯月面为准。将尖端的液滴靠壁去掉,移出移液管,并用滤纸将外壁擦干,插入承接溶液的器皿中。
4.放出液体:承接溶液的器皿如是锥形瓶,应使锥形瓶倾斜30°,移液管直立,管下端紧靠锥形瓶内壁,稍松开食指,让溶液沿瓶壁慢慢流下,流完后管尖端接触瓶内壁约15秒后,再将移液管移去;如果移液管未标明“吹”字,则残留在管尖末端内的溶液不可吹出,因为移液管所标定的量出容积中并未包括这部分残留溶液。
液体准确量取操作评分标准选手姓名:年级:组号:
编号操作标准
分
值
得
分
1
移液器和移液管量程选择正确;移液量设置(从大量程调至小量程;小量
程调至大量程应超过设置量程再回调);枪头正确匹配
10 2
持拿方式正确,安装正确(用力推动,轻旋枪头,不得撞击枪头);推动按
钮正确,垂直取液,预润洗三次左右
10 3
吸吸液时停点正确,浸入液面深度适宜,慢吸慢放,枪头内无气泡,枪头
外壁无液滴,枪头无液滴滴下
10 4
释放液体:枪头头部靠在容器上,约成10-20度倾角;慢推按钮至第一阻
点,停1-2s,再推至终点;如果量很小枪头尖端需贴在容器内壁
10 5
按推枪头按钮去掉枪头(至废物缸);移液枪使用完毕后应将刻度调至最
大,让弹簧回复原形;放回移液器架(正确放置)
10
6 移查看移液管标识,移液管选择正确,插入液面下10-20mm;移液管润洗(取
约1/3容量液体),润洗液弃掉,末端弃液吹掉(重复3次),然后,用滤
纸将沾在移液管外壁的液体擦掉
10
7
液面调整:移液管离开液面后用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉;管的
末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上,管身保持直立,调整液面;
10 8
看刻度时,眼睛平视移液管刻度,以最下面的弯月面为准。将尖端的液滴
靠壁去掉,移出移液管,并用滤纸将外壁擦干,插入承接溶液的器皿中。
10
9 液体释放:移液管直立,管下端紧靠容器内壁,稍松开食指,让溶液沿瓶
壁慢慢流下,流完后管尖端接触瓶内壁约15秒后,再将移液管移去,残
留在管末端的少量溶液,不可用外力强使其流出(有吹标识除外)
10
10
整理实验台面(整理枪头盒,移液器架及其他用品,摆放整齐;已用物品
与未用物品不得混装;废弃物倒入垃圾桶)
10
总分100
评委签名: