检测(二十八) “基因工程与克隆技术”课前诊断卷
2018年高考生物：试卷(二十八) “基因工程与克隆技术‘(含答案和解析)
检测（二十八）“基因工程与克隆技术”课前诊断卷1.(2018届高三·MPT64基因(能控制合成MPT64蛋白)成功导入胡萝卜细胞，最终表达出肺结核疫苗。
请回答下列问题：(1)为获取MPT64基因，可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA，在________________的作用下合成双链cDNA片段，获得的cDNA片段与结核杆菌中该基因碱基序列______________(填“相同”或“不同”)。
(2)通常采用PCR技术扩增MPT64基因，前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成______________，在操作步骤中需要加热至90～95 ℃的目的是________________________________________________________________________。
(3)根据农杆菌的特点，如果将MPT64基因插入到_______________上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入胡萝卜细胞，并将其插入到植物细胞中的______________上。
要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达，应检测胡萝卜植株中是否含有________________________________________________________________________。
(4)研究发现，如果将MPT64蛋白20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸，其保存时间将大大延长，科学家可以生产上述耐储存的MPT64蛋白的现代生物工程技术是________________________________。
解析：(1)以mRNA为模板合成cDNA的过程是逆转录，需要逆转录酶的催化。
由于DNA转录形成的mRNA过程中非编码序列不转录，所以形成的cDNA与结核杆菌中该基因碱基序列不同。
(2)在PCR技术中，以已知一段MPT64基因的核苷酸序列为模板，合成引物。
2017届高考生物二轮复习基因工程与克隆技术学前诊断
“基因工程与克隆技术”学前诊断考点一基因工程与蛋白质工程β肽链第6位氨基酸谷氨酸被缬氨酸代替，导致功能异常。
回答下列问题：(1)异常血红蛋白的氨基酸序列改变的根本原因是编码血红蛋白基因的__________序列发生改变。
(2)将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常的血红蛋白达到治疗的目的。
此操作________(填“属于”或“不属于”)蛋白质工程，理由是该操作________________________。
(3)用基因工程方法制备血红蛋白时，可先提取早期红细胞中的____________，以其作为模板，在______________酶的作用下反转录合成cDNA。
cDNA与载体需在____________________酶的作用下，拼接构建基因表达载体，导入受体菌后进行表达。
(4)检测受体菌是否已合成血红蛋白，可从受体菌中提取________，用相应的抗体进行__________杂交，若出现杂交带，则表明该受体菌已合成血红蛋白。
解析：(1)基因是具有遗传效应的DNA片段，遗传信息储存在基因碱基对的排列顺序中。
(2)蛋白质工程是指通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求，故题中所述不属于蛋白质工程。
(3)利用逆转录法获取目的基因时，需先提取mRNA，在逆转录酶的作用下逆转录合成cDNA。
cDNA与载体需要在限制酶和DNA连接酶的作用下拼接构建成基因表达载体，才可导入受体菌。
(4)检测目的基因是否翻译成蛋白质，需要从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交。
答案：(1)碱基对(2)不属于没有对现有的蛋白质进行改造(3)mRNA 逆转录限制酶和DNA连接(4)蛋白质抗原—抗体2．下图是科学家利用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程。
请结合相关知识回答问题：(1)除图示方法获得目的基因(人胰岛素基因)外，还可通过__________的方法获得目的基因。
基因工程、克隆技术
控制药品合成的相应基因
①体外基因治疗 ②体内基因治疗
5.两种基因治疗途径及其特点
途径
方法
特点
体外基因 不 治疗 同 点
体内基因 治疗
从患者体内获得某种、 细胞扩增→输入体内(实 例中第一个)
状。
蛋白质功能
蛋白质
氨基酸
脱氧核苷酸
听课心得
审题关键：“工具酶”、“植物细胞”、“原理”、“染 色体上”、“预期”
命题来源：基因工程和蛋白质工程。
思路分析：(1)转基因植物的培育过程中，基因工程的工具酶是限 制制性核酸内切酶的DNA连接酶，目的基因只有含有启动子，才 能被RNA聚合酶识别并与之结合进行转录。(2)接受目的基因的受 体细胞若 植物体细胞，可采用植物组织培养技术获得转基因植物 。(3)通过对比转基因植物是否普通的非转基因植物的出油率高。 (4)蛋白质工程设计流程是：预期蛋白质的功能→设计预期的蛋白 质结构→推测出应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列。
获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
区别
实质
定向改造或生产人类所需的蛋白质
定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品
结果
生产自然界没有的蛋白质
生产自然界中已有的蛋白质
联系
蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现
动物细胞
显微注射法 受精卵
微生物细胞
Ca2＋处理法 原核细胞
转化过程
目的基因插入Ti 质粒的T-DNA上 →农杆菌→导入 植物细胞→整合 到受体细胞的染 色体DNA→表达
基因工程药物的临床前研究考核试卷
四、判断题（本题共10小题，每题1分，共10分，正确的请在答题括号中画√，错误的画×）
1.基因工程药物的临床前研究只需要在细胞水平上进行。（）
2.基因工程药物的生产过程中，真核表达系统比原核表达系统更适合生产复杂的蛋白质药物。（）
2.描述基因工程药物在临床前研究中，进行毒理学评估的目的和常见的研究方法。
3.阐述基因工程药物临床前研究中，药代动力学研究的主要内容和其在药物研发中的作用。
4.分析基因工程药物临床前研究中，如何评估药物的免疫原性，并讨论降低免疫原性的策略。
标准答案
一、单项选择题
1. A
2. A
3. D
4. C
5. B
C.药物候选分子的筛选
D.临床试验的设计
2.以下哪种技术常用于获取目的基因？（）
A. PCR
B. Western blot
C. ELISA
D. Flow cytometry
3.下列哪种载体常用于基因工程药物的构建？（）
A. λ噬菌体载体
B.质粒载体
C.病毒载体
D.所有上述载体
4.在基因工程药物的生产过程中，以下哪个环节通常涉及到细胞培养？（）
A.蛋白质的氨基酸序列
B.生产细胞的种类
C.药物的储存条件
D.药物的给药途径
8.在基因工程药物的临床前研究中，以下哪个环节主要用于评估药物的安全性？（）
A.药效学研究
B.毒理学研究
C.药代动力学研究
D.临床试验
9.以下哪个指标是评估基因工程药物免疫原性的关键？（）
A.抗体依赖性细胞毒性
B.抗体中和活性
某大学《基因工程》课程考试试卷(含答案)
某大学《基因工程》课程考试试卷一、名词解释（共10小题，每小题1分，共10分）1、粘性末端2、基因工程3、质粒的不相容性4、基因组文库5、克隆(clone)6、电击转化法7、重组PCR8、限制性酶切图谱法9、质粒10、重组率的定义二、填空题（共10小题，每小题1分，共10分）1、在基因克隆中碱性磷酸单酯酶的主要用途有：A、在用P标记DNA 5′端之前；B、在DNA重组技术中，去除DNA片段的，可防止酶切后的载体的与。
2、载体的功能是运送高效转入；为外源基因提供能力或能力；为外源基因的或提供必要的条件。
三、简答题（共10小题，每小题4分，共40分）1、载体应具备的条件是什么？2、受体细胞应具备的条件？3、蓝白斑筛选原理是什么？4、PCR克隆目的基因的基本程序是什么？5、酵母菌表达外源基因的优势是什么？6、营养缺陷型的哺乳动物受体细胞的遗传标记是什么？7、λ-DNA作为载体的优点是什么？8、巴斯德毕赤酵母表达系统特征及优势是什么？9、融合蛋白表达质粒的构建原则是什么？10、分泌型目的蛋白表达系统的构建策略是什么？四、论述题（1-2每小题8分，3-4题每小题12分，共40分）1、论述PCR原理及引物设计的基本原则。
2、强化转录终止的必要性是什么？3、请论述λ-DNA载体的构建策略是什么。
4、请论述植物基因工程的共整合转化程序和二元整合转化程序及二元整合转化程序的特征。
某大学《基因工程》课程考试试卷答案一、名词解释（共10小题，每小题1分，共10分）1、粘性末端因酶切位点在两条DNA单链上不同（对称）酶切后形成的具有互补碱基的单链末端结构，酶切产生的两个粘性末端很容易通过互补碱基的配对而重新连接起来。
2、基因工程指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。
上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
基因工程试题及答案
基因工程试题及答案# 基因工程试题及答案## 一、选择题1. 基因工程中常用的工具酶是：A. 限制性内切酶B. DNA聚合酶C. 逆转录酶D. DNA连接酶2. 基因工程中，用于目的基因的克隆通常使用：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 转座子3. 下列哪项不是基因工程的应用领域？A. 农业改良B. 疾病治疗C. 能源开发D. 武器制造## 二、填空题1. 基因工程中，常用的宿主细胞包括________、________和________。
2. 基因枪法是一种________技术，可以将目的基因直接导入植物细胞。
## 三、简答题1. 简述基因工程的基本操作步骤。
2. 基因工程在医药领域的应用有哪些？## 四、论述题1. 论述基因工程对现代农业的影响及其潜在风险。
## 参考答案### 一、选择题1. 答案：A, D。
限制性内切酶和DNA连接酶是基因工程中用于切割和连接DNA片段的常用工具酶。
2. 答案：A。
质粒是基因工程中常用的载体，用于克隆和表达目的基因。
3. 答案：D。
基因工程的应用领域广泛，但武器制造不属于其应用范围。
### 二、填空题1. 答案：大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞。
这些是基因工程中常用的宿主细胞，用于表达外源基因。
2. 答案：基因转移。
基因枪法是一种基因转移技术，通过高速微粒子将DNA射入细胞内。
### 三、简答题1. 答案：基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取、载体的选择与构建、目的基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有目的基因的细胞、目的基因的表达与检测。
2. 答案：基因工程在医药领域的应用包括：生产重组蛋白药物、基因治疗、疫苗开发、疾病诊断等。
### 四、论述题1. 答案：基因工程对现代农业的影响主要体现在作物改良、提高产量、增强抗病虫害能力等方面。
通过基因工程，可以培育出抗旱、抗盐碱、抗病的作物新品种，提高作物的适应性和产量。
然而，基因工程也存在潜在风险，如基因流可能导致非目标物种的基因改变，以及转基因作物对生态环境的影响等。
高考生物二轮复习 基因工程与克隆技术学前诊断
开躲市安祥阳光实验学校“基因工程与克隆技术”学前诊断蛋白分子β肽链第6位氨基酸谷氨酸被缬氨酸代替，导致功能异常。
回答下列问题：(1)异常血红蛋白的氨基酸序列改变的根本原因是编码血红蛋白基因的__________序列发生改变。
(2)将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常的血红蛋白达到治疗的目的。
此操作________(填“属于”或“不属于”)蛋白质工程，理由是该操作________________________。
(3)用基因工程方法制备血红蛋白时，可先提取早期红细胞中的____________，以其作为模板，在______________酶的作用下反转录合成cDNA。
cDNA与载体需在____________________酶的作用下，拼接构建基因表达载体，导入受体菌后进行表达。
(4)检测受体菌是否已合成血红蛋白，可从受体菌中提取________，用相应的抗体进行__________杂交，若出现杂交带，则表明该受体菌已合成血红蛋白。
解析：(1)基因是具有遗传效应的DNA片段，遗传信息储存在基因碱基对的排列顺序中。
(2)蛋白质工程是指通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求，故题中所述不属于蛋白质工程。
(3)利用逆转录法获取目的基因时，需先提取mRNA，在逆转录酶的作用下逆转录合成cDNA。
cDNA与载体需要在限制酶和DNA连接酶的作用下拼接构建成基因表达载体，才可导入受体菌。
(4)检测目的基因是否翻译成蛋白质，需要从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交。
答案：(1)碱基对(2)不属于没有对现有的蛋白质进行改造(3)mRNA 逆转录限制酶和DNA连接(4)蛋白质抗原—抗体2．下图是科学家利用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程。
请结合相关知识回答问题：(1)除图示方法获得目的基因(人胰岛素基因)外，还可通过__________的方法获得目的基因。
生物的基因工程与克隆技术练习题
生物的基因工程与克隆技术练习题一、选择题1、下列关于基因工程的叙述，错误的是（）A 基因工程的原理是基因重组B 常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等C 基因工程能够定向地改造生物的遗传性状D 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列2、下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体（）A 细菌质粒B 噬菌体C 动植物病毒D 细菌核区的 DNA3、以下有关基因工程的叙述，正确的是（）A 基因工程是细胞水平上的生物工程B 基因工程的产物对人类都是有益的C 基因工程产生的变异属于人工诱变D 基因工程育种的优点之一是目的性强4、科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴的生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是（）A 定向提取生物体的 DNA 分子B 定向地对 DNA 分子进行人工“剪切”C 在生物体外对 DNA 分子进行改造D 定向地改造生物的遗传性状5、下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A 基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B 细菌质粒是基因工程常用的运载体C 通常用一种限制酶处理含目的基因的 DNA，用另一种限制酶处理运载体 DNAD 为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体6、下列不属于克隆技术的是（）A 一小块胡萝卜经组织培养，发育成完整的胡萝卜植株B 将人的 DNA 片段植入细菌体内后获得大量人的 DNA 片段C 农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯D 小羊多利的诞生7、利用克隆技术培育良种牛时，如果多个供体细胞来自同一头牛，培育出的多个牛犊个体在性状上也不完全相同，分析其原因，下列叙述不正确的是（）A 性状变异可由环境条件引起B 基因可能会发生突变C 受体细胞的细胞质基因不同D 细胞核基因发生了重组8、下列关于克隆技术的叙述中，错误的是（）A 20 世纪末克隆技术已经成熟B 克隆技术具有广阔的应用前景C 克隆技术可能会带给人类许多负面影响D 克隆实际上是一种无性生殖方式9、下列关于克隆羊多利的叙述，错误的是（）A 多利的诞生证明了高度分化的动物细胞具有全能性B 多利的诞生运用了细胞核移植技术C 提供细胞核的母羊对多利的性状起主要作用D 多利的诞生说明动物细胞的细胞核具有全能性10、下列有关克隆人的说法错误的是（）A 克隆人是一种无性生殖方式B 克隆人违反了人类伦理道德C 克隆人会导致人类基因库的单一性D 克隆人有利于保持人类的优良基因二、填空题1、基因工程是在________水平上进行的遗传操作。
基因工程实验考试试题(答案)
1.简述本学期从基因组DNA提取到重组质粒鉴定的实验流程？答：①基因组DNA的提取；②PCR扩增目的基因；③凝胶电泳分离纯化PCR扩增的DNA片段以及DNA的体外连接；④重组质粒的转化及转化子的筛选；⑤重组质粒的抽提；⑥重组质粒的酶切鉴定。
2.如何正确使用微量移液器？答：①选取合适量程的移液器；②根据取液量设定量程；③安装（吸液）枪头；④按至第一档，将枪头垂直伸入液面下适当位置吸液；⑤按至第二档将液体打入容器；⑥弃掉枪头；⑦将量程调至最大，放回原处。
3.在琼脂糖凝胶电泳点样时，DNA通常和什么试剂混匀，其主要成分和作用是什么？答：loading Buffer。
主要成分为溴酚蓝，二甲苯青和甘油。
溴酚蓝和二甲苯青起指示作用；甘油加大样品密度，从而沉降于点样孔中，以免浮出。
4.简述制作1%的琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。
答：①取0.5g琼脂糖置于锥形瓶，量取50ml 1×TBE溶液于瓶中，微波炉加热至琼脂糖溶解；②将移胶板放入胶室中，选取合适梳子垂直安插在移胶板上方，待琼脂降温至55℃下后，缓慢导入该胶室里；③量取合适量1×TBE溶液导入洗净的电泳槽，并正确插好电泳线；④等凝胶凝固后，将梳子垂直拔出；⑤点样；⑥轻放移胶板至电泳槽的合适位置；⑦打开电泳仪的开关，调好参数，开始电泳；⑧一定时间后，停止电泳，取出凝胶板，然后经BE染色放入成像系统显色、观察。
5.琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响？（实验书P75）答：①样品DNA的大小和构象；②琼脂糖浓度；③电泳电场；④温度；⑤缓冲液；⑥嵌入染料的存在与否；6.在使用苯酚进行DNA抽提时应注意什么？（实验书P31）答：注意不要吸取中间的变性蛋白质层。
7.在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂，它们各有什么作用？答：酚——是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿——除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇——降低表面张力，从而减少气泡的产生。
基因工程测试题及答案
基因工程测试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 基因工程中常用的限制酶主要来源于：A. 病毒B. 细菌C. 真菌D. 植物答案：B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的降解答案：D3. 基因工程中常用的载体不包括：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 病毒答案：D4. 基因工程中，用于连接目的基因和载体的酶是：A. 限制酶B. DNA连接酶C. DNA聚合酶D. 反转录酶答案：B5. 基因工程中，用于将重组DNA导入受体细胞的方法不包括：A. 转化B. 转染C. 转导D. 转录答案：D二、填空题（每题2分，共10分）1. 基因工程中，将外源基因导入植物细胞的方法主要有______和______。
答案：农杆菌介导法；基因枪法2. 在基因工程中，______是将目的基因插入到载体DNA分子中的关键步骤。
答案：克隆3. 基因工程中，______是将重组DNA导入受体细胞的常用方法。
答案：转化4. 基因工程中，______是将目的基因表达成蛋白质的步骤。
答案：表达5. 在基因工程中，______是检测目的基因是否成功表达的重要手段。
答案：分子杂交三、简答题（每题5分，共20分）1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的获取方法。
答案：目的基因的获取方法包括从基因文库中筛选、利用PCR技术扩增、人工合成等。
3. 解释基因工程中载体的作用。
答案：载体在基因工程中的作用是携带目的基因进入受体细胞，并在其中复制和表达。
4. 阐述基因工程中转化过程的重要性。
答案：转化过程是将重组DNA导入受体细胞的关键步骤，它决定了目的基因能否在受体细胞中稳定存在和表达。
四、论述题（每题10分，共20分）1. 论述基因工程在农业领域的应用及其可能带来的问题。
基因工程考试试题
基因工程考试试题基因工程作为现代生物技术的核心领域，对于推动生命科学的发展和解决人类面临的诸多问题具有重要意义。
以下是一套涵盖基因工程多个方面的考试试题，旨在检验您对这一重要学科的理解和掌握程度。
一、选择题（每题 3 分，共 30 分）1、基因工程中常用的限制性内切酶作用于（）A 氢键B 肽键C 磷酸二酯键D 高能磷酸键2、下列哪项不是基因工程中常用的载体（）A 质粒B 噬菌体C 动植物病毒D 细菌核区的 DNA3、有关 PCR 技术的说法，不正确的是（）A PCR 是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术B 延伸过程中需要 DNA 聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸C 利用 PCR 技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列D PCR 技术中以解开的双链作为模板，在热稳定 DNA 聚合酶的作用下合成新链4、基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合；②将目的基因导入受体细胞；③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求；④提取目的基因。
正确的操作顺序是（）A ③②④①B ②④①③C ④①②③D ③④①②5、下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是（）A 需要限制酶和 DNA 连接酶B 启动子位于目的基因的首端，是启动翻译的一段 DNAC 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因D 基因表达载体的构建是基因工程的核心6、为了培育抗虫棉，科研人员将苏云金芽孢杆菌的 Bt 毒蛋白基因导入棉花细胞中，该过程采用的生物技术是（）A 杂交育种B 诱变育种C 基因工程D 单倍体育种7、下列不属于目的基因获取方法的是（）A 从基因文库中获取B 利用 PCR 技术扩增C 人工合成目的基因D 直接从生物体细胞内获取8、基因工程中，将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是（）A 农杆菌转化法B 花粉管通道法C 基因枪法D 显微注射法9、蛋白质工程的基本流程正确的是（）①设计预期的蛋白质结构②推测应有的氨基酸序列③找到相对应的脱氧核苷酸序列A ①②③B ③②①C ②①③D ③①②10、下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（）A 基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B 利用基因工程生产乙肝疫苗时，目的基因来自于乙肝病毒C 运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体，该技术将导致定向变异D 基因诊断的基本原理是 DNA 分子杂交二、填空题（每题 4 分，共 20 分）1、基因工程的工具酶包括____________和____________。
(完美版)生物高考总复习 “基因工程与克隆技术”课前诊断卷
“基因工程与克隆技术”课前诊断卷1．在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。
下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、_________________、将目的基因导入受体细胞、________________________。
(2)A过程需要的酶有________和________。
(3)要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用________处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为________态，然后将________________________在缓冲液中混合培养完成转化过程。
(4)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C]________和[E]________。
如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入________。
(5)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是_________________。
这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是____________________。
2．(2015·福建高考)GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。
研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如下图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。
请回答：(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是____________________________________。
(2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的________限制酶进行酶切。
(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。
基因工程试题库及答案
基因工程习题集一、名词解释：（20×4/）1、基因2、克隆3、基因定位4、PCR5、基因工程工具酶6、组织培养7、限制性核酸内切酶8、受体细胞9、生物技术 10、基因沉默11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程20、生物反应器二、单项选择题：(60×2/)1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（）A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。
下列叙述不．正确的是（）A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。
但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。
以下有关叙述，正确的是（）A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。
育种中功能性基因的克隆与转移考核试卷
B.使用组成型启动子
C.减少转移基因的长度
D.增加转移基因的长度
17.关于基因克隆，以下哪种说法是正确的？（）
A.克隆的基因可以直接用于转移和表达
B.克隆的基因需要进行序列分析
C.克隆的基因无法在异源生物体中表达
D.克隆的基因只能用于同源生物体
18.功能性基因转移技术在动物育种中的应用不包括以下哪项？（）
2.农杆菌介导的转化法利用农杆菌将外源基因转移到植物细胞中，原理是利用农杆菌的Ti质粒与植物细胞融合，通过植物自身的DNA修复机制整合外源基因。
3.基因沉默可能是由于外源基因与宿主基因组的不兼容性、甲基化、基因位置效应等原因。减少基因沉默的方法包括使用强启动子、优化基因序列、使用组织特异性启动子等。
A.食品安全
B.环境安全
C.生物多样性
D.转基因生物的竞争力
11.以下哪些方法可以用来减少转基因植物中外源基因的沉默现象？（）
A.使用不同的启动子
B.提高转基因的拷贝数
C.优化外源基因的序列
D.使用不同的转化方法
12.功能性基因转移在农业上的应用包括以下哪些方面？（）
A.提高作物的抗病性
B.提高作物的耐盐性
8.在动物育种中，功能性基因转移可以用于以下哪些目的？（）
A.提高动物的生长速度
B.改善动物产品的品质
C.增强动物对疾病的抵抗力
D.改变动物的性别比例
9.以下哪些技术可以用于功能性基因的克隆？（）
A. PCR
B. RT-PCR
C. Southern blot
D. Northern blot
10.转基因生物的安全性问题包括以下哪些方面？（）
A.提高动物的生长速度
基因工程考试试题题库
基因工程考试试题题库一、选择题1. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 所有以上选项2. 基因枪法是一种：A. 基因克隆技术B. 基因测序技术C. 基因转移技术D. 基因表达技术3. 以下哪个不是基因工程中常用的限制性内切酶？A. EcoRIB. BamHIC. Taq酶D. HindIII4. 基因工程中，目标基因的克隆通常需要以下哪个步骤？A. 基因测序B. 基因表达C. 基因扩增D. 基因编辑5. 转基因生物的安全性问题不包括：A. 环境安全B. 食品安全C. 经济安全D. 社会安全二、填空题1. 基因工程的核心技术是_________，它允许科学家将一个生物体的基因转移到另一个生物体中。
2. 基因工程中，常用的基因表达载体包括_________、_________等。
3. 基因工程在医学领域的应用包括_________、_________等。
4. 基因工程在农业领域的应用包括_________、_________等。
5. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
三、简答题1. 简述基因工程的基本操作步骤。
2. 解释什么是转基因生物，并举例说明其在日常生活中的应用。
3. 讨论基因工程在环境保护方面的潜在应用。
四、论述题1. 论述基因工程在提高作物产量和改良作物品质方面的应用及其可能带来的问题。
2. 分析基因工程对生物多样性的影响，并提出相应的管理策略。
五、案例分析题阅读以下关于基因编辑技术CRISPR-Cas9的案例，并回答问题：- 描述CRISPR-Cas9技术的工作原理。
- 讨论CRISPR-Cas9技术在医学研究和治疗中的应用前景。
- 分析CRISPR-Cas9技术可能引发的伦理和社会问题。
请注意，以上内容仅为示例，实际考试试题应根据具体的教学大纲和课程内容进行设计。
基因工程考试题及答案
基因工程考试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程中常用的运载体是：A. 质粒B. 病毒C. 噬菌体D. 细菌答案：A2. 基因工程中，目的基因的获取方法不包括：A. 化学合成法B. 基因文库筛选法C. PCR扩增法D. 直接从土壤中分离答案：D3. 以下哪个不是基因工程的基本操作步骤：A. 目的基因的获取B. 目的基因与运载体的连接C. 目的基因的检测与鉴定D. 目的基因的表达答案：D4. 基因枪法是一种：A. 基因转移技术B. 基因检测技术C. 基因克隆技术D. 基因编辑技术答案：A5. 基因工程中常用的筛选标记是：A. 抗生素抗性基因B. 荧光蛋白基因C. 绿色荧光蛋白基因D. 所有以上选项答案：D6. 以下哪个不是基因工程的应用领域：A. 农业B. 医学C. 工业D. 文学创作答案：D7. 基因工程中，用于检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是：A. PCR技术B. 南方印迹杂交C. 西方印迹杂交D. 北方印迹杂交答案：B8. 基因工程中，用于检测目的基因是否成功表达的方法是：A. 酶联免疫吸附测定B. 放射性同位素标记C. 质谱分析D. 所有以上选项答案：D9. 基因工程中，用于提高目的基因表达效率的方法不包括：A. 增强子的使用B. 启动子的优化C. 内含子的添加D. 终止子的改进答案：C10. 基因工程中，用于提高外源基因稳定性的方法是：A. 使用强启动子B. 使用稳定表达的载体C. 添加选择标记D. 所有以上选项答案：D二、多项选择题（每题3分，共15分）1. 基因工程中常用的运载体必须具备的条件包括：A. 能够在宿主细胞中复制B. 具有多个限制酶切位点C. 具有筛选标记D. 能够自我复制答案：ABC2. 目的基因的检测方法包括：A. 限制性酶切图谱分析B. DNA分子杂交C. 免疫学检测D. 基因序列测定答案：ABCD3. 基因工程中，目的基因的表达调控包括：A. 启动子的选择B. 增强子的使用C. 终止子的优化D. mRNA的稳定性答案：ABCD4. 基因工程的应用领域包括：A. 转基因作物的培育B. 基因治疗C. 生物制药D. 环境监测答案：ABCD5. 基因工程中，提高外源基因稳定性的方法包括：A. 使用稳定表达的载体B. 添加选择标记C. 增强子的使用D. 内含子的添加答案：ABD三、简答题（每题10分，共30分）1. 简述基因工程的基本操作步骤。
(高中段)专题跟踪检测(二十三)基因工程和克隆技术
专题跟踪检测〔二十三〕基因工程和克隆技术一、选择题1．以下关于基因工程的表达，正确的选项是()A．构建重组DNA分子时需要在目的基因前加上起始密码子B．两个DNA片段能否在DNA连接酶催化下连接取决于它们的粘性末端能否互补配对C．常根据质粒上的抗生素基因表达来筛选含有目的基因的受体细胞D．乙肝抗原目的基因的重组分子导入酵母菌时需要用氯化钙处理解析：选B构建表达载体时需要在目的基因前加上启动子，A错误；两个DNA片段能否在DNA连接酶催化下连接取决于它们的粘性末端能否互补配对，B正确；质粒上带有的抗生素抗性基因有利于筛选含有目的基因的受体细胞，C错误；由于酵母菌属于真核生物，所以将乙肝抗原目的基因的重组分子导入酵母菌时不需要用氯化钙处理，D错误。
2．(·选考模拟)以下关于植物克隆中液体悬浮培养获得的胚状体的表达，正确的选项是()A．胚状体是由分化方向不确定的胚性细胞构成的B．从单细胞发育至胚状体的过程不涉及器官发生C．胚状体发育成个体的过程不需要施加植物激素D．胚状体发育成个体的过程不需要提供营养物质解析：选C胚性细胞是在液体培养条件下形成的，具有旺盛的分裂能力，而胚状体是由胚性细胞分裂、分化形成的，不是由胚性细胞构成的，A错误；从单细胞发育至胚状体的过程涉及器官发生，如根的分化、芽的分化，B错误；胚状体发育成个体的过程不需要施加植物激素，C正确；胚状体发育成个体的过程需要提供营养物质，D错误。
3．(·高三诊断)以下关于绵羊“多莉〞克隆过程的表达，正确的选项是()A．需要用激素对核供体母羊进行超数排卵处理B．对乳腺细胞进行营养限制性培养的目的是促进细胞增殖C．卵细胞质中的调节蛋白，通过促成乳腺细胞核基因的重排，而开启基因的表达D．需使用免疫抑制剂处理代孕的母羊，以防止对植入胚胎的免疫排斥反响解析：选C提供核供体的一方只需要提供相应的体细胞即可，无需用促性腺激素处理，A错误；对乳腺细胞进行营养限制性培养的目的是利于重组细胞基因表达的分子开关的启动，B错误；在重组卵细胞开始的第三次分裂时，原乳腺细胞的调节蛋白全被卵细胞质中的调节蛋白因子替换了，通过促成乳腺细胞核基因的重排，而开启基因的表达，C正确；不用使用免疫抑制剂处理代孕的母羊，代孕母羊一般不会对植入的胚胎发生免疫排斥反响，D错误。
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检测（二十八）“基因工程与克隆技术”课前诊断卷1.(2018届高三·MPT64基因(能控制合成MPT64蛋白)成功导入胡萝卜细胞，最终表达出肺结核疫苗。
请回答下列问题：(1)为获取MPT64基因，可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA，在________________的作用下合成双链cDNA片段，获得的cDNA片段与结核杆菌中该基因碱基序列______________(填“相同”或“不同”)。
(2)通常采用PCR技术扩增MPT64基因，前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成______________，在操作步骤中需要加热至90～95 ℃的目的是________________________________________________________________________。
(3)根据农杆菌的特点，如果将MPT64基因插入到_______________上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入胡萝卜细胞，并将其插入到植物细胞中的______________上。
要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达，应检测胡萝卜植株中是否含有________________________________________________________________________。
(4)研究发现，如果将MPT64蛋白20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸，其保存时间将大大延长，科学家可以生产上述耐储存的MPT64蛋白的现代生物工程技术是________________________________。
解析：(1)以mRNA为模板合成cDNA的过程是逆转录，需要逆转录酶的催化。
由于DNA转录形成的mRNA过程中非编码序列不转录，所以形成的cDNA与结核杆菌中该基因碱基序列不同。
(2)在PCR技术中，以已知一段MPT64基因的核苷酸序列为模板，合成引物。
在操作步骤中需要加热至90～95 ℃，以打开DNA的双链。
(3)在农杆菌转化法中，将MPT64基因插入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入胡萝卜细胞，并将其插入到植物细胞中的染色体的DNA上。
基因的表达产物是蛋白质，要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达，应检测胡萝卜植株中是否含有MPT64蛋白。
(4)利用蛋白质工程可以通过设计改造原有蛋白质的结构和功能。
答案：(1)逆转录酶不同(2)引物目的基因DNA受热变性解链为单链(3)Ti质粒的T-DNA染色体的DNA MPT64蛋白(4)蛋白质工程2．(2017·衡水模拟)油菜中油酸为不饱和脂肪酸，能降低人体血液的胆固醇含量，减少人体患心血管病的风险。
F基因控制合成的油酸酯氢酶催化油酸形成饱和脂肪酸，转反义F 基因油菜能提高菜籽油的油酸含量。
请分析回答下列问题：(1)从油菜细胞的染色体DNA获取F基因后进行大量扩增的方法为___________。
(2)构建反义F基因表达载体时，需要用到的工具酶有_____________________；农杆菌可用来将反义F基因表达载体导入油菜细胞，从分子角度分析，其具有的特点是______________________________________________。
构建反义F基因表达载体时没有设计标记基因，其可能的原因是_______________________________________________。
(3)Le启动子为种子特异性启动子，将F基因反向连接在Le启动子之后构建了反义F 基因。
检测转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA含量，结果表明，因杂交形成双链RNA，细胞内F基因的mRNA水平下降。
由此推测，反义F基因的转录抑制了F基因的________(填“复制”“转录”或“翻译”)过程。
若F基因转录时，两条单链(a1、a2)中a1为转录的模板链，则反义F基因转录时的模板链为__________。
解析：(1)PCR技术是一种体外扩增DNA片段的技术。
(2)构建基因表达载体时，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子；因农杆菌的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，故农杆菌转化法为常用的将目的基因导入植物细胞的方法；标记基因表达产物，可能会对食品安全构成威胁，所以构建反义F基因表达载体时没有设计标志基因，这样不会产生标记基因表达产物，有利于食品安全。
(3)mRNA 是翻译的模板，转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA含量下降，可见反义F基因的转录抑制了F基因的翻译过程。
F基因转录形成的RNA能与反义F基因转录形成的RNA 互补配对，若F基因转录时，两条单链(a1、a2)中a1为转录的模板链，推测反义F基因转录时的模板链为a2。
答案：(1)PCR技术(2)限制酶、DNA连接酶其Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上无标记基因表达产物，有利于食品安全(3)翻译a23．科学家通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，提高了光合作用过程中Rubisco酶对CO2的亲和力，从而显著提高了植物的光合速率。
请回答下列问题：(1)PCR过程所依据的原理是________________，该过程需要加入的酶是_____________。
(2)该技术不直接改造Rubisco酶，而通过对Rubisco酶基因进行改造，从而实现对Rubisco酶的改造，其原因是_______________________________。
与传统基因工程技术相比较，定点突变技术最突出的优点是_______________________，PCR定点突变技术属于_______________的范畴。
(3)可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用__________________将基因表达载体导入植物细胞，将该细胞利用植物组织培养技术培育成幼苗，从细胞水平分析所依据的原理是____________。
解析：(1)PCR技术是一种体外扩增DNA片段的技术，其原理是DNA双链复制，该过程需要耐高温的DNA聚合酶(或Taq酶)的催化。
(2)由于蛋白质空间结构较为复杂，改造困难，所以该技术不直接改造Rubisco酶，而通过对Rubisco酶基因进行改造，从而实现对Rubisco酶的改造；和传统基因工程技术相比较，定点突变技术最突出的优点是能生产出自然界不存在的蛋白质，PCR定点突变技术属于蛋白质工程的范畴。
(3)将基因表达载体导入植物细胞常用农杆菌转化法；植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性。
答案：(1)DNA双链复制耐高温的DNA聚合酶(或Taq酶)(2)蛋白质空间结构较为复杂，改造困难能生产出自然界不存在的蛋白质蛋白质工程(3)农杆菌转化法植物细胞的全能性4．在植物抗病毒基因工程中，利用植物病毒复制酶基因是一种常见的方法，某实验小组将芜菁花叶病毒复制酶(TuMV-Nib)反义基因导入大白菜中，经检测表明TuMV-Nib反义基因不仅整合到大白菜的染色体中，还获得表达，而且转基因植株的接种测试表明转基因植株具有明显的抗病性。
TuMV-Nib反义基因的作用过程如下图所示，请回答下列问题：(1)实验室大量扩增TuMV-Nib反义基因常用的技术为___________，该技术需要加入的原料是____________，利用该技术扩增目的基因时_________(填“需要”或“不需要”)知道该基因的全部碱基序列。
(2)将目的基因导入植物细胞的常用方法是_________，该方法常将目的基因导入Ti质粒的T-DNA分子中，其原因是_______________________________________。
分析图示可知，TuMV-Nib反义基因主要通过影响图中的_________(填序号)过程，影响TuMV-Nib基因的表达。
(3)对已经被病毒感染的植株，可选取该植株的茎尖通过_________________技术获得脱毒苗，利用茎尖作为材料的原因是____________________________________________。
解析：(1)大量扩展TuMV-Nib反义基因常用PCR技术，该技术需要加入四种脱氧核糖核苷酸(或dATP、dTTP、dCTP、dGTP)为原料，利用该技术扩增目的基因时不需要知道该基因的全部碱基序列，但需要根据基因两端的部分序列合成引物。
(2)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，该方法常将目的基因导入Ti质粒的T-DNA分子中，借助T-DNA 能主动转移并整合到宿主细胞染色体的DNA分子中的特点导入目的基因。
据图可知，TuMV-Nib反义基因转录出反义mRNA，与mRNA结合，导致图中②翻译过程受阻，影响TuMV-Nib基因的表达。
(3)对已经被病毒感染的植株，由于茎尖很少或没有被病毒感染，可选取该植株的茎尖通过植物组织培养技术获得脱毒苗。
答案：(1)PCR四种脱氧核糖核苷酸(或dATP、dTTP、dCTP、dGTP)不需要(2)农杆菌转化法T-DNA能主动转移并整合到宿主细胞染色体的DNA分子中②(3)植物组织培养茎尖很少或没有被病毒感染5．(2017·新余市模拟)科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组，将得到的重组质粒导入牛的受精卵，再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。
pBR322质粒含有2个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。
请据图回答问题：(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的，图中①过程需要的酶是_____________。
该过程所依据的碱基互补配对原则是____________________________(用字母和箭头表示)。
(2)图1中的mRNA是从人体的____________细胞中获取的。
(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌，通过含抗生素的培养基进行培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断。
如图3所示：①如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落，而不能在培养基B上生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的___________________，即目的基因插入了_____________________中。
②如果受体菌在培养基A上不能生长、繁殖形成菌落，而在培养基B上能生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的_________，即目的基因插入了______________中。
③如果受体菌在培养基A和培养基B上都能生长、繁殖形成菌落，则使用限制酶a的切点是图2中的_________。