基因工程的诞生

1、关于限制酶说法中，正确的是（ ） A．限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱 基序列 B．EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分子， 只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中
2.（多选）有关基因工程的叙述中，错 误的是 （ ） A、基因工程技术能定向地改造生物的 遗传性状，培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体
专题1 基因工程
学习目标：
1、了解基因工程的概念 2、了解基因工程的诞生 3、理解基因工程中三种基本工 具的作用
一、基因工程的概念
1、原理：基因重组 2、操作水平：DNA分子水平 3、又称： DNA重组技术或基因拼接技术 4、优点： ⑴ 定向改造生物性状 ⑵ 克服远缘杂交不亲和的障碍 ⑶ 育种周期短
三、基因工程的基本工具
请同学们看书，思考以下问题：
1、基因工程中三种基本工具的作用分 别是什么？ 2、工具酶的作用部位分别在哪？ 3、具备什么条件才能充当“分子运输 车”？
（一）“分子手术刀”——限制性核酸内切 酶 1、来源： 主要来自原核生物
2、特点： 具有专一性（特异性）
表现在两方面： (1)识别双链DNA中特定核苷酸序列 (2)切割特定序列中的特定位点 特定部位的两个核苷酸之间的 3、作用： 磷酸二酯键断开 4、结果： 产生黏性末端或平末端
二、基因工程的诞生
（一）基础理论： 1、DNA是遗传物质的证明 2、DNA双螺旋结构和中心法则的确立 3、遗传密码的破译 （二）技术发明：
（二）技术发明：
1、基因转移载体的发现 2、工具酶的发明 3、DNA合成和测序技术的发明 4、DNA体外重组的实现 5、重组DNA表达实验的成功 6、第一例转基因生物的问世 7、PCR技术的发明
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？
（三）“分子运输车”——运载体 1、需要具备的条件：
（1）在受体细胞中稳定存在，能自我复制 （2）有一个或多个切割位点 （3）பைடு நூலகம்标记基因 （4）对受体细胞无害
2、种类：
质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒等
最常用的质粒——大肠杆菌的质粒
试分析其作为载体的优点？
课堂反馈
SmaⅠ
平末端
平末端
EcoRⅠ
黏性末端
黏性末端
（二）“分子缝合针”——DNA连接酶
1、种类： ⑴ E· coli DNA连接酶
⑵ T4
DNA连接酶
2、作用：
E· coli DNA连接酶
或T4DNA连接酶
可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， 即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键
T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合” 起来，但效率较低