血栓形成机制及血小板膜糖蛋白Ⅱb_Ⅲa受体拮抗剂的研究进展

３０
的药物能高效阻断疾病发生和发展过程中的关键病 理环节，已成为药物研发的热点。徐筱杰、胡娟课题 组通过对一系列３，４．二氢．１（１日）－异喹啉酮类ＧＰ Ⅱｂ／ＩＩＩａ受体抑制剂进行构象分析，提取其分子中 疏水基团、氢键给体、氢键受体、正电荷中心、负电荷 中心等特定的化学信息，明确其分子结构与药效之 间的关系，建立优化的药效团模型；基于药效团模型 从中草药化学成分三维结构数据库中搜索对ＧＰ Ⅱｂ／ｍａ具有抑制活性候选化合物，探索从中草药 宝贵资源库中发现抗血栓活性物质。其活性化合物 研究结果见文献［１６］报道。 ３结语 血小板通过胶原受体黏附，释放出活性因子，最 终彼此聚集形成血栓。抑制血小板异常聚集，对心 脑血管性疾病及其他血栓性疾病的防治均有重要的 意义。目前临床上广泛使用的抗血小板药物主要有 ３大类：ＣＯＸ抑制剂、ＡＤＰ受体拮抗剂和ＧＰⅡｂ／Ⅲａ 拮抗剂。 阿司匹林、氯吡格雷等抑制由ＴＸＡ：和ＡＤＰ介 导的血小板激活，但不能阻断由凝血酶、胶原等直接 诱导的血小板聚集，多项研究结果显示有５．５％一 ６ｌ％人群存在阿司匹林失效，４％一３０％的缺血性血 管疾病患者未能从氯吡格雷抗血小板治疗中获益， 即部分患者尽管服用了阿司匹林或氯吡格雷，仍未 能避免缺血性血管事件发生。故最近有学者提出阿 司匹林“抵抗”和氯吡格雷“抵抗”的概念，引起了较 多的关注。
１１
ｂ／１１ａ发生构象转变，暴露出结合
位点，通过纤维蛋白原的“桥联”作用使血小板聚 集，进而导致血栓的形成旧’３ Ｊ。下文将重点介绍黏 附受体、受体激动剂以及整合素受体在血小板聚集 过程中所起的作用。 １．１黏附受体 在血管壁损伤部位，血小板与血管内皮下胶原 发生黏附反应。血小板表面胶原受体主要有２类： 整合素ｄ：Ｂ，（ＧＰ Ｉ ａ／ＩＩａ）和ＧＰＶＩ。ＧＰⅥ是氨基酸 类化合物，相对分子质量为３４ ８３６，从ＳＤＳ凝胶电泳 上看其表观分子量为６２ ｋｕ，其中４５％的相对分子
ＧＰ １１ ｂ／１１ ａ受体拮抗剂与传统抗血小板药物具
ｄ死亡和心肌梗死发生率从对照组的１５．７％降
低到埃替非巴肽组的１４．２％，前９６ ｈ内可以见到 持续的治疗效果，随访６个月仍有益。研究结果还 表明，埃替非巴肽对年龄小于６５岁、无糖尿病、未行 过冠脉旁路术的男性患者作用更好。 ２．３替罗非班 替罗非班（ｔｉｒｏｆｉｂａｎ，欣维宁）是近年来开发的一 个重要的ＧＰⅡｂ／Ⅲｆｌ受体拮抗剂，属非肽类。它通 过选择性与血小板膜上ＧＰⅡｂ／ＩＩＩａ受体结合，占据 其上的结合位点，使ＧＰⅡｂ／１１Ｉ ａ受体不能与凝血因 子Ｉ结合，从而抑制血小板聚集。替罗非班对各种 刺激因素诱发的血小板聚集都有效，其抑制作用与 剂量成正比。Ｊａｇｒｏｏｐ等¨４ ｏ研究评价了替罗非班在
２
ＧＰＩＩｂ／ｍａ受体拮抗剂 目前临床上广泛使用的抗血小板药物有：ＣＯＸ
抑制剂，如阿司匹林等；ＡＤＰ受体拮抗剂，如噻氯匹
万方数据
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Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
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合应用对冠状动脉内支架植入术疗效的影响。研究 表明，ＧＰⅡｂ／１１ ａ受体抑制剂与氯吡格雷联合应 用，抑制血小板聚集的作用可以达到比单独应用负 荷剂量氯吡格雷更好，并可以进一步减少心肌坏死 发生率。Ｒｏｂｅｒｔ¨乱研究观察了埃替非巴肽治疗急性 冠脉综合征（ＡＣＳ）的临床疗效，以患者３０ ｄ死亡和 心肌梗死发生率为观测点。研究表明ＡＣＳ患者
３００和６００ ｍｇ负荷剂量氯吡格雷与埃替非巴肽联
ｍａ受体主要由２部分组成：ｄ和Ｂ亚单位。相对分 子质量为１３６的仅亚单位含有１条重链和１条轻 链；相对分子质量为９２的Ｂ亚单位由７６２个氨基酸 的多肽组成，包括短胞内区、跨膜区和长胞外区。研 究发现，仅ＩＩｂ与８３之间通过非共价键结合，并借助 钙维持着其异二聚体的结构。ＧＰ ＩＩ
ｂ／
整合素ａ：Ｂ．是另一个主要胶原受体，经“由内 到外”的信号激活后与胶原的亲和力显著增加，协 助ＧＰＶＩ共同完成对胶原刺激的信号转导和血小板 活化过程”Ｊ。整合素仅：Ｂ，参与黏附，而ＧＰⅥ主要 参与血小板黏附后的信号转导和血小板活化。 １．２黏附受体激动剂 血小板活化后，分泌出一系列凝血酶活性因子， 如：二磷酸腺苷（ＡＤＰ），５．羟色胺（５－ＨＴ）等。血小 板上的ＡＤＰ受体主要有２类＂Ｊ：Ｐ２Ｙ。和Ｐ＇２Ｙ１２，二者 均为Ｇ蛋白配体受体。虽然Ｐ２Ｙ，受体介导的反应 较弱，但在ＡＤＰ或胶原诱导的血小板初始活化过程 中却起着至关重要的作用。Ｐ２Ｙ，：则与蛋白配体Ｇｉ 起协同作用，是维持血小板聚集和血栓稳定的枢纽。 血小板活化后，磷脂酶Ａ２被激活，释放出花生四烯 酸，并通过环氧合酶（ＣＯＸ）和血栓素合成酶产生新 一代的血栓素Ａ：（ＴＸＡ：）。ＴＸＡ：与前列腺素受体 通过配体Ｇｑ的偶合作用结合，有助于激活血小板 的正反馈作用。 １．３整合素受体 在血栓形成过程中，整合素Ｏｔ ＩＩ ｂＢ３（ＧＰⅡｂ／ ＩＩＩａ）起着极其重要的作用。它经“由内到外”的信 号激活后，与纤维蛋白原的亲和力显著增加，引起血 小板聚集，是血栓形成的最后共同通路∽Ｊ。ＧＰ ＩＩ
ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：ａ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓ
ＺＨＡＮＧ Ｊｉｎｇ，ＣＨＥＮ Ｗａｎｇ，ＰＡＮＧ Ｗｅｎ—ｓｈｅｎｇ，ＨＵ Ｊｕａｎ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｆｕｊｍｎ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ
Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕｚｈｏｕ ３５０１０８，Ｃｈｉｎａ） ｗｉｔｈ ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ ｉｓ ｔｈｅ ｆｉｎａｌ ｃｏｍｍｏｎ
收稿日期：２００９－０４－１３ 基金项目：陈可冀中西医结合发展基金资助项目（Ｎｏ． ＣＫＪ２００９００９）；福建省高校中药学重点实验室开放课题基金资助项 目（Ｎｏ．ＣＫＪ２００７０２４ＺＹＸ２００７０２）；福建省教育厅科技项目基金资助 项目（Ｎｏ．ＪＡ０７１２１） 作者简介：章靓，女，在读硕士研究生，研究方向：药物质量控 制研究，Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｍｘｌｓ５２２＠１２６．ｃｏｒｎ ・通讯作者：胡娟，女，教授，研究方向：中药活性成分高通量筛 选，Ｅ—ｍａｉｌ：ｈｕｊ＠６ｔｃｍ．ｅｄｕ．ｅｌｌ
ｂ／
Ⅲａ为靶点的受体拮抗剂，已成为国内外学者研究的
ＧＰＩＩｂ－ｌａ拈抗剂
图１抗血小板药物的作用机制
２．１阿昔单抗 １９８３年，Ｃｏｌｌｅｒ等一。首次发现小鼠单克隆抗体 能直接抑制ＧＰＩＩｂ／Ⅲａ受体与纤维蛋白原的结合， 从而抑制血小板的聚集。随后，为了防止免疫原性， 将抗体中的Ｆｃ段移除，同时将Ｆａｂ段导人人的免疫 球蛋白，形成了嵌合体化合物阿昔单抗（ａｂｃｉｘｉｍａｂ， ｃ７Ｅ３，ＲｅｏＰｒｏ），它是第１个获得美国ＦＤＡ批准的单 克隆抗体。Ｔｃｈｅｎｇ等【ｌ引通过临床观察了阿昔单抗 在急性心肌梗死血管成形术应用中的利弊，在经皮 冠状动脉介入术（ＰＣＩ）治疗中，辅以阿昔单抗能显 著增强急性心肌梗死患者３０ ｄ的无病生存率，对心 瓣术后再狭窄基本无影响。Ｍｏｎｔａｌｅｓｃｏｔ等…。评价 了阿昔单抗在ｓＴ段抬高型心肌梗死（ＳＴＥＭＩ）患者 治疗中的疗效，调查选取１ １０１例患者，随机分为阿 昔单抗组和安慰剂组，比较死亡和心肌梗死发生率。 随访结果表明，安慰剂组的死亡率为１４．３％，阿昔 单抗组为１０．９％；阿昔单抗组的心肌梗死发生率为 ２．３％，比安慰剂组（５．５％）明显降低，该项研究证 实了阿昔单抗在ＳＴＥＭＩ中的应用价值。 ２．２埃替非巴肽 埃替非巴肽（ｅｐｔｉｆｉｂａｔｉｄｅ，Ｉｎｔｅｇｒｉｌｉｎ）是一个合成 的环肽，能可逆性阻滞ＧＰ ＩＩ ｂ／１Ｉａ受体，选择性高， 起效快，本身几乎无抗原性。Ｇｕｒｂｅｌ等¨２ ｏ研究了
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Ｊｏｕｒｎａ／ｏｆ
Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
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血栓形成机制及血小板膜糖蛋白ＩＩ ｂ／ｍａ受体拮抗剂的研究进展
章靓，陈旺，庞文生，胡娟’
（福建中医学院药学系，福建福州３５０１０８）
摘要：血小板膜糖蛋白（ＧＰ）ＩＩ ｂ／Ⅲａ与纤维蛋白原的结合是血小板聚集的终末共同途径，因而ＧＰ Ⅱｂ／Ⅲａ受体拮抗剂可有效地预防血小板介导的血栓形成。本文对血栓形成的机制以及近年来
ＧＰ ＩＩ
ｂ／Ⅲａ受体拮抗剂在抗血栓方面的研究进展作一简要综述。
关键词：血栓；血小板膜糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ；受体；拮抗剂 中图分类号：Ｒ９７３．２文献标识码：Ａ文章编号：１６７４－０４４０（２００９）０４－０２６８－０４
Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
ｏｆ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ ＧＰⅡｂ／ｍ
ａ
ｒｅｃｅｐHale Waihona Puke Baiduｏｒ
ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ
ｏｆ ｐｌａｔｅｌｅｔ
ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＧＰ）ＩＩ
ｂ／ｌｌｌ
ａ
ｐａｔｈｗａｙ ｏｆ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ．ＧＰⅡｂ／ＩＩＩ ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ｍａｙ ｂｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｉｎ ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ ｐｌａｔｅｌｅｔ— ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ．Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ ｒｅｖｉｅｗｓ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ ＧＰ ＩＩ ｂ／ｌｌｌ
万方数据
国际药学研究杂志２００９年８月
第３６卷第４期
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质量来源于共轭肽链的糖基。在血小板膜上，ＧＰⅥ 与ＦｃＲ，／链以盐的形式非共价结合形成复合物，该 类受体复合物与胶原蛋白的结合刺激了血小板分 泌、形状改变和聚集的信号传导Ｈ
Ｊ。
定、氯吡格雷等。阿司匹林、氯吡格雷等抑制由 ＴＸＡ，和ＡＤＰ介导的血小板激活，而ＧＰ ＩＩ ｂ／１１Ｉａ与 纤维蛋白原的结合是ＡＤＰ、凝血酶、胶原、肾上腺素 等多种血小板激活剂诱导血小板聚集过程中的最后 共同途径，如图１所示…。近１０年来，以ＧＰ ＩＩ 热点‘８｝。
１血小板介导的血栓形成 血小板介导的血栓形成分为３个阶段：首先经 血管性血友病因子（ｖＷＦ）介导糖蛋白ＧＰ Ｉ ｂ／Ⅸ／Ｖ 复合物与胶原蛋白结合，将血小板黏附于血管内皮 下；随着血液的流动，血小板缓慢的向前滚动，同时 发生形态的改变，通过膜上胶原受体与胶原牢固结 合，将血小板沉积并黏附于受损血管壁上，并释放出 一系列的活性因子；释放出的活性因子进一步激活 血小板，使ＧＰ
纤维蛋白ｊ形激动剂诱导的血小板变形和聚集中的
作用。实验显示，替罗非班不会影响血小板的变形， 但却能有效抑制全血中血小板的聚集。Ｄｏｂｒｚｙｃｋｉ 等¨纠的研究表明，在ＳＴＥＭＩ患者初级ＰＣＩ中，替罗 非班的疗效优于溶栓疗法。替罗非班作为新一代抗 血小板聚集药，能有效减少心血管事件，但有潜在出 血等不良反应。 综上所述，阿昔单抗是一种单克隆抗体，这使其 诱发过敏反应的机会增加，且由于阿昔单抗是一种 不可逆的血小板抑制剂，它对血小板的作用将持续 整个血小板生命周期。埃替非巴肽和替罗非班是人 工合成的肽类和非肽类ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ受体拮抗剂，这 一特点使其不具有阿昔单抗的抗原性和与受体结合 的不可逆性。然而，由于埃替非巴肽和替罗非班对 受体的竞争性抑制作用，如果发生出血，输注血小板 将无效。 ２．４基于药效团模型从中草药数据库中搜索ＧＰ Ⅱｂ／Ｉｌｌａ受体抑制剂 传统的药物开发模式往往需花费数亿美元数十 年的时间，从上万个化合物中才能发掘出一个有应 用价值的新药，这种方法周期长、耗资大，有很大的 随机性和盲目性。生命科学和信息科学的发展推动 了２１世纪创新药物研究的全新面貌，基于靶点设计
ａ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ａｎｔｉ－ｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ；ｐｌａｔｅｌｅｔ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ＩＩ ｂ／ｌｌ ａ；ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ
血栓形成与心脑血管疾病密切相关，世界每年 死于心血管病的人数约１ ３００万¨Ｊ。一些常见疾病， 如血小板无力症、动脉粥样硬化、缺血性心脏病、急 性心肌梗死、脑血管疾病和静脉血栓形成等均与血 小板功能异常密切相关。导致血栓形成的因素很 多，主要有血管内皮损伤、内外凝血系统异常和血流 动力学异常等，血小板的聚集对心脑血管疾病的发 展起着非常重要的作用。本文将对血小板介导的血 栓形成过程以及近年来血小板表面膜糖蛋白（ＧＰ） Ⅱｂ／Ⅲａ受体拮抗剂在抗血栓方面的应用作一简要 综述。
ｂ／ｎｌ
ａ受体广泛
分布于血小板表面，每一细胞上大约有５０ ０００个ＧＰ Ⅱｂ／１１Ｉａ受体分子。它能识别黏附蛋白分子的２个 肽序列，即ＲＧＤ序列及ＫＱＡＧＴＶ序列旧１。ＧＰⅡｂ／ ｍａ受体是血小板聚集和血栓形成的一个关键因 子，是各种血小板激活剂所产生的激活信号的最后 传导通路，已成为抗血小板治疗的靶标。