电生理膜片钳

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HEKA 与Axon的比较 特殊应用4
多探头(2/3/4)能各自使用完全独 立的刺激波形进行同步刺激;

HEKA 与Axon的比较 软件功能-标准化和自动化
宏: 宏可以把所有的操作步 骤能记录下来,类似于 批处理命令。可以用于 调整系统,完成特殊的 实验,实现某种程度的 自动化。
HEKA 与Axon的比较 软件功能-标准化和自动化
放大器探头主要指标
放大器细胞模型(ModelCell)
1 10MΩ位置:模拟电极入液时的状态 2 6pF位置:模拟形成了高阻封接的状态,此时 快电容=6pF。 3 500MΩ位置:模拟形成了全细胞记录模式,此 时膜电阻=500 MΩ,膜电容Cm=22pF,串联电 阻=5.1 MΩ 。
Patchmaster/Pulse软件面板
Online analysis 分析结果导入igor Sweep fit分析结果 Series fit 分析结果 Group fit分析结果
直接在IGOR中打开Heka数据
增强采集软件Patchmaster
增强分析软件Fitmaster
单通道数据分析软Leabharlann BaiduTAC
突触事件分析软件MiniAnalysis
HEKA EPC系列放大器
EPC7 EPC8 EPC9系列(已停产) EPC10系列
HEKA EPC-7放大器
•经典的膜片钳放大器,是Neher and Sakmann使 用的EPC5的升级版本。 •适用于单通道记录/全细胞记录/电化学记录/ 胞内记录/胞外记录
HEKA EPC-8 放大器
•经典的膜片钳放大器,可通过电脑半自动化控制。 •适用于单通道记录/全细胞记录/电化学记录/ 胞内记录/胞外记录
8 探头主机自校准匹配。万一发生故障,可用备用 探头,故障探头可单独返厂维修。
HEKA 与Axon的比较 自动化程度
完全电脑控制, Patchmaster软件可 以完成所有控制操作
部分电脑控制,需要 pClamp软件加上 MultiClamp软件
HEKA 与Axon的比较 探头与主机的匹配性能
只要进行校准操作,所有探头与主 机可随意组合。当万一发生探头故 障需要返修时,我们提供备用探头, 用户的实验完全不受影响。
HEKA 与Axon的比较 特殊应用1
可选的电压增益( X10/x100),可进行 高分辨率的场电位记录

HEKA 与Axon的比较 特殊应用2
LockIn软件锁相放大器扩展:可精 确进行时间分辨的膜电容测量

HEKA 与Axon的比较 特殊应用3
荧光检测扩展:内置的荧光检测模 块,可控制不同的荧光激发光源,可 实现离子浓度例如Ca2+测量与膜片 钳测量的同步记录。
谢谢
北京先仪谱科技有限公司 www.cibchina.com
fwen@cibchina.com/kwu@cibchina.com
HEKA EPC-9系列放大器
•EPC-9系列全自动膜片钳系统,性能优异,世界上第一 台全自动膜片钳放大器。 •适用于单通道/全细胞/电化学等记录。 • 所有补偿操作均由软件方便快捷自动完成。 •LockIn功能,精确测量膜电容 •通过软件Extension,可进行钙离子检测,实现光电联合 检测
HEKA EPC-10 系列放大器
EPC10配套的软件
基本采集软件Pulse/XChart 基本分析软件PulseFit/PulseTool 增强采集软件Patchmaster 增强分析软件Fitmaster
综合分析软件Igor/DAC/TAC/MiniAnalysis/Clampfit
采集分析软件关系图
IGOR(DataAc cess/PPTool Pulse Patchmaster PulseFit/PulseTool Fitmaster
综合分析软件Igor/DAC/PPT
采集分析软件关系图
IGOR(DataAc cess/PPTool Pulse Patchmaster PulseFit/PulseTool Fitmaster
TAC MiniAnalysis Clampfit
SigmaPlot Excel DataAccess
HEKA EPC-10 系列放大器概述
5 所有的补偿操作(液结电位,快慢电容,串联电 阻等)均由软件方便快捷自动完成。 6 具有LockIn放大器,可进行膜电容检测,进行 与膜面积有关的研究,例如胞吞胞吐、细胞分泌 等。
7 通过软件Extension,可进行离子浓度荧光检测, 实现光电联合检测的集成。
实验方案编辑器: 这是更强大自动化系统,采用标准方 式自动完成各个实验步骤。在每一个 步骤中,可从外部输入、放大器控制、 在线分析的结果或用户输入的数据中 反馈得到满足某个条件的结果,来调 节实验参数。这种自适应反馈可通过 如下方式引入: 条件描述:用“if -then”对某个测量 结果或外部输入信号进行逻辑判断, 然后决定下一步的执行。这使实验流 程更加智能化,功能页更强大。 全局变量:全局变量在整个实验过程 中都起作用,使用一系列全局变量可 以完成复杂的计算,然后对如放大器 进行调整,调节采集参数。
放大器的本底噪声调节困难。在国 内能用200B放大器实现单通道记录 的单位很少
HEKA 与Axon的比较 采集装置噪声控制
所有DA,AD和数字信号通路都采用 光电隔离,彻底隔绝从电脑来的数 字噪音。
采用屏蔽电缆,电脑一侧的噪音处 理困难
HEKA 与Axon的比较 可扩展能力
可通过另一个LIH 1600扩展成8路 DA和16路AD,满足高通量数据采 集需要。
EPC-10 功能特点介绍
1放大器前后面板
2探头/电极夹持器 4细胞模型 5软件控制面板 6 配套的软件
放大器前面板
放大器探头(Headstage)
1内部包含I/V转换器(电压钳)和 电压跟随器(电流钳) 2探头与放大器主机现场匹配。
350 GΩ/500 MΩ/5 MΩ三档切换,
分别对应于不同的电流测量范围。
TAC MiniAnalysis Clampfit
SigmaPlot Excel DataAccess
基本采集软件Pulse/XChart
基本分析软件PulseFit
PulseFit中的几个工具
在线分析Online Analysis 从Sweeps层面分析,得到某个目标数值, 例如Ipeak。 从Series的层面来分析从sweep fit得到的结 果,可以得到诸如激活曲线,失活曲线,IV 曲线,失活后恢复曲线等等。 从Group的层面来分析从Series fit得到的结 果,例如药效曲线。
•EPC-10是EPC-9系列全自动膜片钳系统的升级产品,继 承了EPC9的全部功能。 •适用于大膜片记录/全细胞记录/传统细胞内记录/场电位记 录/人工双分子层记录/离子选择性电极/电化学检测
HEKA EPC-10 系列放大器概述
EPC-10是著名的EPC-9系列的升级产品。产品特 点: 1放大器有1/2/3/4探头等多种配置选择。 2采用光电耦合技术,彻底隔离电脑一侧的噪声, 放大器综合本底噪声<90fA。 3可进行单通道记录、大膜片记录、全细胞记录、 传统细胞内记录、场电位记录、人工双分子层记 录、离子选择性测量以及电化学检测(伏安法/安 培测量法)。
放大器的探头与主机在出厂时已经 严格配对,不允许组合。探头比较 脆弱,容易损坏。而万一发生探头 故障需要返修时,需要将主机与探 头一起返厂,用户的实验将被迫停 顿。
HEKA 与Axon的比较 放大器噪声控制
放大器本底噪声<80fA,安装调试 时,在屏蔽笼里,装上了微电极夹 持器银丝玻璃电极等之后,噪声可 控制在200fA以下
Pulse系列软件中的online analysis
Pulse Program Family
综合分析软件Igor/DAC/PPT
原始数据和分析结果汇总
Pulse输出数据 Export
数据导入Igor的几个途径
直接从Pulse系列软件中Export ExportIgor Text(生成独立的Igor数据) ExportIgor Binary(生成描述文件)
膜片钳电生理技术与设备
内容
HEKA EPC7/9/10膜片钳系统。 基本采集软件Pulse 基本分析软件PulseFit/PulseTool 增强采集软件Patchmaster 增强分析软件Fitmaster 综合应用:分析软件 Igor/DataAccess/MiniAnalysis/TAC/
HEKA EPC7/9/10膜片 钳系统
基本分析软件PulseTool
PulseTool中的几个工具
Copy:复制原始数据,并可有选择的输出数据。 Edit raw data:可编辑修改原始数据。 Conditional Averaging: Trace Fit: 曲线拟合 Noise analysis: non-stationary analysis variance fit power spectrum 功率谱 单通道的分析: amplititude hitogram/ Event detection 可转到TAC中。
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