免疫层析技术在乳品安全检测中的应用马立才博士2017年-食安中国
[整理版]免疫学检测技术在食品安全中的应用
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免疫学检测技术在食品安全中的应用杨明（甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州 730070）食品安全问题在21世纪的今天已经成为全世界关注的重大问题，对国家的经济发展和消费者的身体健康产生了重大影响。
随着我国市场经济的的不断完善和发展，食品行业对外贸易与日剧增，食品的质量与安全问题已成为影响农业和食品工业产品竞争力的关键因素。
同时，由于我国人民生活已由温饱型食物结构转向营业健康型食物结构，全民食品营业卫生知识得到普及。
人民的饮食消费观念也由数量型转向质量型，对食品卫生质量标准的要求越练越高，这就对食品检测技术提出更高的要求。
由于食品种类丰富，食品中检测的有毒有害物质种类和组分繁多，需要检测的物质质量极低，样品中待检物的浓度常为μg、ng甚至pg级，除此之外，许多检测物除需检测物质本身，还涉及其衍生物和降解物测定。
区别同位异构体以及元素的价态等。
因此食品检测要求检测方法更加准确、快速、方便，也使得其他学科的先进技术不断应用于食品检测领域中来，由于新技术的引入，食品行业开发出了许多自动化程度和精确度很高的检测仪器，这不仅缩短了分析时间，减少了人力误差，也大大提高了食品分析检测的速度、灵敏度和准确度。
现代食品检测技术主要包括以下几个方面：①计算机视觉技术；②现代仪器分析技术；③食品物性的力学、声学和电学检测技术；④电子传感检测技术；⑤生物传感技术；⑥核酸探针检测技术；⑦PCR基因扩增技术；⑧免疫学检测技术。
免疫学检测技术是食品检测技术中的一个重要组成部分，特别是三大免疫技术——荧光免疫技术、酶免疫技术、放射免疫技术在食品检测中得到了广泛应用。
利用免疫学检测技术可检测细菌、病毒、真菌、各种毒素、寄生虫等，还可用于蛋白质、激素、其他生理活性物质、药物残留、抗生素等的检测，其检测方法简便、快速、灵敏度高、特异性强，特别是单克隆抗体的发展，使得免疫检测方法特异性更强，结果更准确。
免疫分析是抗原与抗体的特异性、可逆性结合为基础的分析技术。
170831 免疫层析技术在乳品安全检测中的应用
非法添加或超标超限添加物
A. 非法添加添加物： 三聚氰胺、β -内酰胺酶、碱性物质、皮革水解蛋白等
B. 超标超限添加物：
增稠剂、防腐剂、抗氧化剂等，其他未允许用的食品添加剂
农药残留
农药残留是指任何由于使用农药而在食品、农产品和动 物饲料中出现的特定物质。分为杀虫剂（包括杀螨剂）、杀菌 剂、除草剂、植物生长调节剂、杀鼠剂等。 中国牛奶中农药限量共涉及 10 种农药 （艾氏剂和狄氏
我国：约30公斤；
全球乳品年产量：约8.02亿吨； 我国：3725万吨，仅占4.6%； 2015 年我国生鲜牛乳产量 3755 万吨，比 2014 年增加 0.8% ； 奶制品加工量2761.1万吨，比2014增长4.1%；
我国奶业存在的问题
洋牛奶、洋奶粉疯狂冲击了国内市场，危及养牛业 疫情防控未做好，如布氏病有上升趋势 消费者对国产奶缺乏信心，行业信任危机依然存在 企业诚信欠失： 改生产日期， 乳品使用防腐剂 乳源质量安全仍然让人放心不下
性病毒统称为噬菌体，亦称为细菌病毒。目前已发现大肠杆菌、乳酸
菌、赤痢菌、沙门氏杆菌、霍乱菌、葡萄球菌、结核菌、放线菌等。
乳品主要危害因素的检测方法
主要有色谱分析技术和快速检测技术
气相色谱法（GC） 胶体金免疫层析法
高效液相色谱法（HPLC）
超高效液相色谱法（UPLC） 气谱-质谱法（GC-MS） 气谱-串联质谱法（GC-MS/MS） 液谱-质谱法（LC-MS） 液谱-串联质谱法（LC-MS/MS） 其他新技术，如飞行时间质谱等
荧光免疫层析检测法
酶联免疫吸附测定法 化学发光免疫检测法 放射免疫测定法 荧光偏振免疫检测法 微生物抑制测定法 生物传感器 生物芯片
食品安全免疫层析检测技术研究进展
食品安全免疫层析检测技术研究进展摘要：众所周知，食品安全问题一直引起社会关注。
当前各大食品生产企业也逐渐加强了对食品安全的检测和监督管理工作，国家和政府对食品质量也提出了更高的标准和要求。
我国食品安全问题突出,影响社会的和谐稳定发展。
因此,非常有必要持续开展食品安全监督抽查工作,对食品生产经营企业进行严格管控。
然而我国目前现有的食品安全检验标准方法繁琐、耗时,不适合牛奶、蔬菜及保质期短的食品或原料的筛查。
因此,在以消费者为导向的食品行业中,建立全面、系统的分析方法,尤其是快速检测方法、精确的分析方法对于确保食品质量和安全性是必不可少的。
关键词：免疫层析技术;食品安全;快速检测技术引言近年来，我国食品安全问题频繁发生，对百姓和政府监管部门都带来极其恶劣的影响。
基于此，国家食品卫生法规、食品卫生监督体系也日益完善起来。
我国家大力提倡绿色食品，健康饮食。
国家也开始逐步出台对应的政策法律，打击相关的违规食品，不良商家。
随着改革开放的不断深入，人民的生活水平也逐渐提高，人们对于饮食文化的需求也逐渐走向多元化、个性化。
1食品安全快速检测技术特点和普通检测技术相比，食品安全快速检测技术特点为：①实验准备简单，在实验工作开展前，仅需做好预处理工作即可，所需试剂与仪器设备较少。
②快速检测工作对操作人员的技术要求、能力要求不高。
③快速检测技术应用成本投入相对较少，通常不会造成资金浪费问题。
④快速检测样品时间相对较短，可以保证整体检测效率。
2免疫层析技术在食品安全检测中的应用2.1标记材料2.1.1金纳米复合材料基于纯金纳米材料的ICA在检测灵敏度具有一定的局限性,为了充分结合金纳米材料本身的优越性,复合金纳米材料由此应运而生。
将金磁性双功能纳米材料作为标记探针,开发了用于检测沙门氏菌的试纸条,这种双功能材料可作为磁性材料进行样品的分离浓缩,并实现可视化检测,在牛奶样品中对霍乱弧菌的捕获效率为82.4%,与目前基于检测沙门氏菌ICA的方法相比,该方法具有较高的灵敏度,LOD达到5×105CFU/mL。
胶体金免疫层析技术在检测乳制品中三聚氰胺的应用
胶体金免疫层析技术在检测乳制品中三聚氰胺的应用潘声旺1，和垚1，何茂萍1，陈春坛1，2，周钰潇1，何靓雯1，李亚阑1，2*（1.成都大学建筑与土木工程学院，成都610106；2.四川文理学院化学化工学院，四川达州635000）摘要:【目的】基于竞争抑制免疫层析原理，建立一种快速检测乳制品中三聚氰胺的方法。
【方法】在胶体金免疫层析（GICA ）技术的基础上，以胶体金为标记物，建立乳制品中三聚氰胺（MA ）快速检测方法、研发GICA 检测试纸；验证该方法的灵敏度、重复性和特异性。
【结果】所研发的GICA 试纸测定乳制品中MA 的检出限为40~160μg/kg ，重现性好；选用11种干扰物对GICA 试剂进行特异性实验，仅发现尿素、缩二脲对GICA 试纸检测液态奶时存在干扰，其他9种无干扰；使用GICA 、HPLC 、GC-MS 同时检测阴性或添加MA 质量分数2.00mg/kg 的阳性乳样品，检测结果一致。
【结论】GICA 试纸适用于乳制品中MA 的快速检测。
关键词:胶体金；免疫层析；三聚氰胺；乳制品中图分类号:TS207.7文献标志码:Ａ文章编号:1000-2650（2020）03-0346-07A Rapid Colloidal Gold-Based Immunochromatographic Strip Assay for Monitoring Melamine in Dairy ProductsPAN Shengwang 1，HE Yao 1，HE Maoping 1，CHEN Chuntan 1，2，ZHOU Yuxiao 1，HE Jingwen 1，LI Yalan 1，2*（1.School of Architecture and Civil Engineering ，Chengdu University ，Chengdu 610106，China ；2.School of Chemistry and Chemical Engineering ，SichuanUniversityof Arts and Science ，Dazhou635000，Sichuan ，China ）Abstract:【Objective 】This study was aimed to establish a method for the rapid detection of melamine (MA)in dairy products based on the principle of competitive immunochromatography.【Method 】On thebasis of colloidal gold Immunochromatographic assay (GICA)technology ，a rapid detection method forMA in dairy products was established and GICA test paper was developed with colloidal gold as the marker ，and its sensitivity ，repeatability and specificity were verified.【Result 】Determination of melamine in dairy products by colloidal gold immuneochromatographic assay the detection limits for 40~160μg/kg ，and reproducibility is ing 11kinds of interferences of colloidal gold immuneochromatographic reagent strip for the specific experiment ，discovered the presence of biuret and urea interference on col -loidal gold immuneochromatographic reagent strip for detection of liquid milk ，other substances without any interference.Simultaneous determination of the negative milk samples or the positive milk sam -ples with MA content of 2.00mg/kg by GICA and high performance liquid chromatography(HPLC)，and gas chromatography-mass spectrometer (GC-MS)the results obtained by these three methods were in good agreement.【Conclusion 】This method is suitable for rapid detection of melamine in dairy products.Keywords:colloidal gold ；immunochromatography ；melamine ；dairy products第38卷第3期2020年6月收稿日期:2019-10-27基金项目:成都市科技局技术创新研发计划（2018-YF05-00486-SN ）；四川省教育厅科研项目（18ZA0116）。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用胶体金免疫层析技术（Colloidal Gold Immunoassay，CGIA）是一种新型的快速检测技术，在食品安全现场快速检测中的应用越来越广泛。
该技术结合了免疫学、生物学、化学和物理学等多个学科的知识，利用高度特异的抗体与检测物之间的结合反应，通过胶体金标记的信号转化为目标物质的定量信息，从而实现快速、准确、灵敏的检测。
本文将探讨CGIA技术在食品安全现场快速检测中的应用情况。
1. CGIA技术的优点在食品安全检测中，CGIA技术具有以下几个优点。
（1）快速：CGIA技术的检测时间通常为几分钟到十几分钟，远远快于传统的检测方法。
同时，该技术的检测过程简单，不需要复杂的操作步骤，适合在现场快速检测。
（2）高度特异性：CGIA技术采用高度特异的抗体与检测物结合，能够快速准确地检测目标物质。
与传统的检测方法相比，CGIA技术能够避免其他物质的干扰，提高检测的准确性。
（3）灵敏度高：CGIA技术能够检测非常小的目标物质浓度，通常能够达到ppb（百万分之一）或更低的浓度，能够满足食品安全领域中对高灵敏度检测的需求。
（4）操作简单：CGIA技术的操作步骤简单，不需要专业的技术人员，能够在现场进行。
2. CGIA技术在食品安全中的应用（1）奶制品中的快速检测奶制品是人们日常食品中的重要组成部分。
但是，由于奶制品中可能含有大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸杆菌等有害细菌和药物残留等物质，会对人体造成不良影响。
因此，奶制品的品质安全检测非常重要。
CGIA技术能够对奶制品中的有害细菌和药物残留等物质进行快速检测，并能够快速得到检测结果。
饮料作为人们日常饮食中的一部分，也需要进行安全检测。
根据国家有关食品安全法律法规，饮料中不得含有违禁药物和添加剂等有害物质。
CGIA技术能够对饮料中的有害物质进行快速检测，并能够快速得到检测结果。
CGIA技术的应用还存在一些局限性。
（1）需要抗体：CGIA技术需要高度特异的抗体与目标物质结合，因此需要事先获得目标物质的抗体。
免疫层析试纸条在食品安全检测中的应用
食品科技免疫层析试纸条在食品安全检测中的应用李磊涛（河南聚谷检测研究有限公司，河南郑州 450000）摘 要：随着现代食品安全问题的日益凸显，研发快速、准确、低成本的食品安全检测方法具有重要意义。
免疫层析试纸条作为一种常用的检测工具，已被广泛应用于食品安全领域。
本研究旨在探究免疫层析试纸条在食品安全检测中的应用潜力。
通过对相关文献进行综述，可知免疫层析试纸条具有高度的选择性和敏感性，能够迅速检测出食品中的有害物质和致病菌。
此外，免疫层析试纸条还具有操作简便、不需要复杂仪器设备、检测周期短等优点，适用于在实验室和现场进行食品安全快速检测。
关键词：免疫层析试纸条；食品安全；检测方法Application of Immunochromatographic Test Strip in FoodSafety TestingLI Leitao(Henan Poly Valley Detection Research Co., Ltd., Zhengzhou 450000, China) Abstract: With the increasingly prominent issues of modern food safety, researching fast, accurate, and low-cost food safety testing methods is of great significance. Article immune chromatography test paper as a kind of commonly used detection tools, has been widely applied in the field of food safety. Through literature review, the results show that the immune chromatography test paper strip with high selectivity and sensitivity, able to quickly detect harmful substances and pathogenic bacteria in food. In addition, the immunochromatographic test strip also has the advantages of simple operation, no need for complex instruments and equipment, and short detection cycle, making it suitable for rapid food safety testing in the laboratory and on-site.Keywords: immune chromatography test paper; food safety; test method随着食品安全问题的不断突出，研发快速、准确、低成本的食品安全检测方法变得至关重要。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术是一种广泛应用于食品安全现场快速检测和生物医学检测中的一
种技术。
其基本原理为利用金纳米颗粒在光的作用下的特殊颜色散射和吸收特性，将其与
特定抗原或抗体结合在一起，进行零点检测，从而达到快速、准确、高灵敏度的检测结
果。
胶体金免疫层析技术主要包括样品浸润、检测剂涂布和读取结果三个步骤。
具体操作
步骤如下：
1. 样品浸润：将待检样品加入相应的稀释液中，使其浓度与检测要求相适应；
2. 检测剂涂布：将样品与特定的抗体或抗原结合的检测试剂涂布在检测纸条上；
3. 读取结果：在检测纸条上读取检测结果，通常是根据纸条颜色的变化判定结果
的。
胶体金免疫层析技术主要适用于病原体、重金属元素、农药、兽药、抗生素等食品安
全检测领域。
例如，在肉制品中被检测到的三联磷等药物残留的检测中，胶体金免疫层析
技术可以实现快速、定性、定量的检测，准确率高、检测时间短。
此外，在海产品、蟹类、鱼类等贝类食品中检测常见的福尔马林、二氧化硫等物质的残留，以往需要一天时间的检
测时间，而应用胶体金免疫层析技术则能将其缩短至1小时以内。
相比于传统的检测方法，胶体金免疫层析技术具有快速、准确、低成本、易操作等优点。
但是，由于技术门槛较高、适用的样品范围有限等因素限制了其在实际应用中的推广。
在今后的食品安全检测中，需要进一步完善胶体金免疫层析技术的性能和准确率，以满足
不同领域和不同样品类型的检测需要。
应用免疫层析试纸为食品安全保驾护航
应用免疫层析试纸为食品安全保驾护航作者：战虎吉利利来源：《中国食品》2020年第15期近些年，免疫层析检测技术在食品安全领域快速发展，应用范畴也不断拓展。
本文回顾了免疫层析检测技术的研发历程，介绍了该法在食源性致病菌、农兽药残留、违规使用添加剂以及生物毒素检测方面的实践应用。
一、免疫层析检测技术的研发历程上个世纪下半叶，免疫检测技术的发展掀起了一个高潮，在国内免疫快速检测市场，英RANDOX、美CHARM Scientific、德R-Biopharm等占据着垄断性的地位。
21世纪以来，国内食品安全检测技术快速发展，并且取得了良好的应用成效。
经过对相关研发论文进行比较分析发现，从2000年以来，在免疫快速检测领域，中、美发表的论文数量最多，中国免疫快速检测相关论文发表量在全国发文总量中所占比例达到29.0%，在数量层面上已走在美国前列，成为世界上发文量最多的国家。
基础研究发展及行业政策支撑，助推了我国免疫层析试纸条技术产业化发展进程。
历经20余年，中国自主研发免疫快速检测新产品的能力有很大强化，冲破国外技术与产品垄断将是大势所趋。
二、在食品安全领域中的应用1.食源性致病菌。
免疫层析试纸具有快捷、成本低廉等优势，能在短时间内正确检测出食源性致病菌，我国已经自主研发出可以检测多种食源性致病菌的免疫层析试纸条。
比如，副溶血性弧菌、大肠杆菌、阪崎肠杆菌分别是海产品、牛奶、奶粉内的常见食源性致病菌，免疫层析试纸条检测时可使用的标识材料依次为胶体金、荧光微球、胶体金，检出限分别为105CFU/mL、5×103CFU/mL、104CFU/mL。
2.农兽药残留。
免疫层析试纸条在食品中农兽药检测领域有较为广泛的应用，比如，采用胶体金免疫层析法检测氨基脲、磺胺嘧啶、甲霜灵及新霉素等残留量，取用的胶体金试剂与样品量均很小，其中样本量可以低到1μL-2μL，确定检测结果时无需联合使用酶标仪、荧光显微镜等仪器，检测时间短，检测结果保留时间较长，适用于基层人员及现场检测。
胶体金免疫层析技术在牛奶抗生素残留检测中的应用
杜 宗 绪
（ 潍坊职业学院 ， 山东 潍坊 ２ ６ １ ０ ３ １ ）
摘
要： 胶体金免疫层析技术不仅操作简便 、 快速 、 特异， 而且特别适用于广大基层检验人员 的现场检测 。介绍 了
胶 体金 免疫层析技术 ， 综述 了胶体金免疫层析技 术在 牛奶 中 １ ４ 种 一 － 内酰胺类抗生素 、 ５ 种 四环素类抗生素 、 １ 种 氨基糖苷类抗生素 、 １种氯霉素类抗生素 、 ２ 种 大环内酯 类抗生素 、 １ ２种磺胺类抗生素和 １ １ 种氟喹诺酮类抗 生素
氯霉素类氯霉素是一种广谱抗生素具有良好的抗菌药胺对甲氧嘧啶磺胺异嗯唑磺胺甲氧哒嗪磺胺多理特性被广泛应用于各类家禽家畜水生动物及辛种磺胺类抗生素的残留结果表明磺胺二甲蜜蜂中各种传染病的防治结果表明应用胶体金基嘧啶的检测限为斗磺胺异嗯唑的检测免疫层析技术可检测牛奶中氯霉素残留检测限为限为斗班磺胺氯哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶的检斗检测时间为测限为斗磺胺间二甲氧嘧啶磺胺间甲氧嘧王玮等制备了平均粒径为的胶体金啶和磺胺苯酰的检测限为斗磺胺嘧啶的检用来标记抗氯霉素多克隆抗体将氯霉素半抗原与测限为磺胺甲氧哒嗪和磺胺多辛的卵清蛋白的偶联物包被在硝酸纤维素膜上作为检检测限为斗磺胺喹嗯啉和磺胺甲嗯唑的检测带羊抗兔二抗作为质控带依据免疫竞争法原测限为斗
残 留检测中的应 用 ； 同时对胶 体金免疫层析技术在牛奶 中抗生素残 留检测 中的应用前景进行 了展望 ， 指出 了其未
来 的 ４个发展方 向。
关键词 ： 胶 体金 免疫 层析技术 ； 牛奶 ； 抗生素残 留； 快速检测 ； 应用
中 图分 类号 ： ￥ ８ ５ ９ ． ８ ４ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２ — ２ ４ ８ １ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ７ — ０ ７ ６ ２ — ０ ５
胶体金免疫层析技术在食品安全检测中的应用
食品安全问题一直都是一个世界性的话题，近年来， 国际上各类食品安全事件频频发生，造成了巨大的社会 问题和经济损失。目前，食品安全问题主要表现在有害 动植物、畜禽、野生动植物、微量化学和环境污染物等 领域。为了减少食品安全事件的发生，研制出一种能够 满足需要的检测技术已经成为当前的迫切需求。
免疫层析技术是出现于 20 世纪 80 年代初期的一 种独特的免疫分析方法，该方法的核心技术是以条状 纤维层析材料为固相，通过毛细管作用使样品溶液在 层析材料上泳动，并同时使样品中经标记物标记的待 测物与包被在层析材料上针对待测物的受体（如抗原 或抗体）发生高特异、高亲和性的免疫反应，富集在 检测带上，通过酶反应或直接运用可目测的标记物（如 胶体金、彩色乳胶等）得到直观的实验现象，如显色。
胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（Chloroauric acid）
在白磷、柠檬酸三钠等还原剂的作用下，聚合成特定 大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定胶体溶液。 由于胶体金颗粒具有高电子密度的特性，且颗粒聚集达 到一定密度时即达到 107 个 /mm2，出现肉眼可见的粉红 色斑点，因而可以作为免疫层析试验的指示物。
隆中毒抗体作为原料，成功制备了一种标记免疫检测 抗体试剂的纸条，用于对不同牛奶中 11 种类抗氟喹诺 酮类的抗体残留量进行免疫检测，检测反应持续时间 一般为 5 min。试剂盒所用纸条的高温检查试验结果 和其他仪器的高温检测试验结果相同，重复性比较好， 在 4 ℃的条件下纸条至少可以长期保存 12 个月。该方 法对样品前处理简单，检测时间短，灵敏度高，特异 性良好，假阳性率及假阴性率均为 0，经液相二级质 谱（LC-MS/MS）的方法测试验证，该方法试剂及纸 条的质量检测试验结果稳定可靠。但在某些实验中针 对一些阳性的实验结果可能需要使用另外几种实验方 法做进一步的实验确认。 2.2 在食物和农兽药大气残留性检测中的应用
免疫学检测技术在食品安全中的应用
免疫学检测技术在食品安全中的应用杨明（甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州 730070）食品安全问题在21世纪的今天已经成为全世界关注的重大问题，对国家的经济发展和消费者的身体健康产生了重大影响。
随着我国市场经济的的不断完善和发展，食品行业对外贸易与日剧增，食品的质量与安全问题已成为影响农业和食品工业产品竞争力的关键因素。
同时，由于我国人民生活已由温饱型食物结构转向营业健康型食物结构，全民食品营业卫生知识得到普及。
人民的饮食消费观念也由数量型转向质量型，对食品卫生质量标准的要求越练越高，这就对食品检测技术提出更高的要求。
由于食品种类丰富，食品中检测的有毒有害物质种类和组分繁多，需要检测的物质质量极低，样品中待检物的浓度常为μg、ng甚至pg级，除此之外，许多检测物除需检测物质本身，还涉及其衍生物和降解物测定。
区别同位异构体以及元素的价态等。
因此食品检测要求检测方法更加准确、快速、方便，也使得其他学科的先进技术不断应用于食品检测领域中来，由于新技术的引入，食品行业开发出了许多自动化程度和精确度很高的检测仪器，这不仅缩短了分析时间，减少了人力误差，也大大提高了食品分析检测的速度、灵敏度和准确度。
现代食品检测技术主要包括以下几个方面：①计算机视觉技术；②现代仪器分析技术；③食品物性的力学、声学和电学检测技术；④电子传感检测技术；⑤生物传感技术；⑥核酸探针检测技术；⑦PCR基因扩增技术；⑧免疫学检测技术。
免疫学检测技术是食品检测技术中的一个重要组成部分，特别是三大免疫技术——荧光免疫技术、酶免疫技术、放射免疫技术在食品检测中得到了广泛应用。
利用免疫学检测技术可检测细菌、病毒、真菌、各种毒素、寄生虫等，还可用于蛋白质、激素、其他生理活性物质、药物残留、抗生素等的检测，其检测方法简便、快速、灵敏度高、特异性强，特别是单克隆抗体的发展，使得免疫检测方法特异性更强，结果更准确。
免疫分析是抗原与抗体的特异性、可逆性结合为基础的分析技术。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用胶体金免疫层析技术是一种利用抗体对特定抗原的专一性识别来快速检测待检样品中是否含有目标成分的技术。
它的原理是利用胶体金颗粒的特性，在试剂纸上形成一条稀释液前进的前沿，当待检样品中含有目标成分时，会与胶体金颗粒上的抗体结合发生凝聚，导致胶体金颗粒的前进受阻，从而形成一条明显的测试线。
通过观察测试线的形成情况，就能够判断待检样品中是否含有目标成分。
这种技术具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性好等特点，因此在食品安全现场快速检测中得到了广泛应用。
胶体金免疫层析技术在食品中毒事件的现场快速检测中发挥了重要作用。
食品中毒事件往往发生突然，而且影响范围广泛，如果不能及时准确地检测出问题食品，后果将不堪设想。
胶体金免疫层析技术可以在现场迅速检测出食品中是否含有有毒物质，为食品安全问题的迅速处理提供了技术支持。
其敏感度高、操作简单的特点，使得它可以在最短的时间内完成检测，为食品安全事件的应急处理提供了重要的技术手段。
胶体金免疫层析技术在食品添加剂和农药残留快速检测中发挥了重要作用。
食品添加剂和农药残留一直是食品安全领域的一个难题，传统的检测方法往往需要耗时耗力，不能满足快速检测的需求。
而胶体金免疫层析技术可以在现场快速检测食品中是否含有添加剂和农药残留，为食品安全监管提供了一种快速、有效的手段。
通过这种技术，可以在生产现场、市场和餐饮场所等地方对食品进行快速检测，保障了广大消费者的食品安全。
胶体金免疫层析技术在食品质量追溯中也具有重要意义。
食品质量追溯是保障食品安全的一项重要工作，通过对食品的原料、生产过程、流通环节等进行追溯，可以找出食品质量问题的来源，防范和控制食品安全风险。
而胶体金免疫层析技术可以在食品的生产环节和流通环节进行快速检测，及时发现和排除问题食品，保障食品质量和食品安全。
这对于食品质量追溯和食品安全管理具有重大的意义。
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用免疫层析(Immunochromatography,IC)技术是20世纪80年代发展起来的一种将免疫技术和色谱层析技术相结合的快速免疫分析方法[1]。
其原理是以条状纤维层析材料为固相,借助毛细作用使样品溶液在层析条上泳动,同时,使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体(如抗体或抗原)发生高特异、高亲和性的免疫反应,层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域(检测带),通过酶促显色反应或直接使用可目测的着色标记物(如胶体金),短时间(5～10min内)便可得到直观的实验结果。
它不需进行结合标记物与游离标记物的分离,省去了繁琐的加样、洗涤步骤。
因而这种分析技术操作简单快速,分析结果清楚,易于判断,且无须仪器(或只需简单仪器),非常适用于食品的现场快速检测。
1免疫层析类型按照免疫层析中抗原与抗体结合方式的不同,可将免疫层析分为两类:非竞争性免疫层析和竞争性免疫层析。
1.1非竞争性免疫层析即双抗体夹心法。
将着色标记物(一般采用胶体金)与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,并将其沉积在结合区上。
当样品(尿、血浆、饮料等)加到样品区后,由于毛细管作用,样品迅速浸透结合区,带有标记物的Ab1被溶解,并在上部材料吸水涨力的牵引下随着样品溶液沿膜条向前移动。
若样品中存在待测抗原,它就会和带有标记物的Ab1结合形成Ag-Ab1。
随后,样品通过固相化有捕获抗体(一般是待测抗原的另一表位特异性抗体Ab2)的检测线(testline)区域时,Ag-Ab1复合物被捕获,形成Ab1-Ag-Ab2复合物。
一部分未与Ab1结合的样品继续前移,通过固相化有抗Ab1抗体(Ab3)的质控线(controlline)区域,形成Ab3-Ab1复合物。
这种方式通常用于检测带有多个抗原位点的分析,常用于致病细菌、大分子蛋白质等的检测等。
1.2竞争性免疫层析将着色标记物与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,沉积在结合区。
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用研究
全两方面对食品进行检测，以此来满 足人们对食品检测的多元化要求。 3.1 胶体金免疫层析技术在检测食品 质量中的应用
在 日 常 生 活 之 中， 人 们 接 触 的 食 物种类非常多，包括肉类、蔬菜、水 果和面食等等，不管是哪一类食品， 水分、蛋白质、矿物质与维生素等物 质都是其最主要的组成部分，并且这 些物质也是人类生存和活动不可缺少 的物质，高分子有机物质是上述营养 物质的主要属性，这就为胶体金免疫 层析技术的使用创造了有利条件，传 统的检测技术一般只追求检测速度， 却不关注检测结果的精确性，因而所 得到的检测结果准确性难以得到保证， 而胶体金免疫层析技术可以改善传统 检测技术的不足，在短时间内获得准 确的检测结果。
例 如： 奶 牛 在 分 娩 后 的 几 天 内 产 生的乳汁为牛初乳，这种牛奶与普通 牛奶相比，更具营养和保健价值。牛 初乳中的 IgG 含量会受到生物活性物 质含量的直接影响，二者呈正向关联， 简言之，牛初乳中的生物活性物质含 量越高，则牛初乳中的 IgG 含量就越高。 因此，在检测牛初乳的过程中，就可 以将 IgG 含量作为检测依据，测得牛 初乳中 IgG 含量后，就可以对牛初乳 或其制品中的活性物质含量进行推断， 应用胶体金免疫层析技术即可完成对 牛初乳 IgG 含量的测定。具体原理为： 技术人员应该将牛初乳中含有的 IgG 设为竞争性抗原，然后通过胶体金的 使用，标记 IgG，然后在纸条结合垫上 对其进行包被，同时在检测区中对自 制免抗牛 IgG 抗体进行固化，最后对 二者进行观察，得到牛初乳样品中 IgG 的水平，实现对牛初乳及制品质量的
分析与检测
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用研究
□ 李迎春 马 英 石家庄市金标检验服务有限公司
摘 要：在社会经济高速发展的背景下，人们生活质量日渐提升，对于食品质量安全方面的重视程度不断加大。而胶 体金免疫层析技术的出现，为人们检测食品卫生安全提供了一个全新的途径。本文首先对胶体金免疫层析技术进行阐述， 然后研究其在食品检测中的应用，希望可以促进食品检测技术的发展。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用随着社会快速发展，人们对食品安全的关注度也越来越高。
食品安全问题直接关系到每个人的健康，而快速有效的食品安全检测技术就显得尤为重要。
胶体金免疫层析技术是一种先进的生物分析技术，具有快速、灵敏度高、操作简便等优点，因此在食品安全现场快速检测中得到了广泛的应用。
一、胶体金免疫层析技术原理及优势胶体金免疫层析技术是一种基于免疫反应的快速检测技术，其原理是将标记了胶体金颗粒的抗体与待测样品中的靶分子发生特异性识别结合，形成抗原-抗体-胶体金复合物。
随后将复合物加载到免疫层析膜上，待样品在膜上流动时，复合物将随之流动，并在免疫层析膜上形成一个特定的条带，最终通过观察胶体金颗粒在免疫层析膜上的聚集情况来判断待测物质的存在与浓度。
（1）快速性：该技术检测时间短，通常在30分钟以内即可得到结果，适用于快速现场检测。
（2）灵敏度高：胶体金颗粒作为标记物质，具有良好的散射光学性能，检测灵敏度高，可达到ppb或ppm级别。
（3）特异性强：抗体的高特异性保证了该技术对靶物质的特异性识别能力，可准确判断待测样品中目标分子的存在与浓度。
（4）操作简便：仪器设备简单，不需要复杂的实验步骤和条件，操作简便，适合于现场快速检测。
1. 农药残留检测：2. 食品中有害物质检测：食品中有害物质如重金属、致癌物质等对人体健康造成严重威胁，通过胶体金免疫层析技术，可以对食品中的这些有害物质进行快速准确的检测，及时发现并处理食品安全隐患。
3. 食品真伪鉴别：胶体金免疫层析技术还可以用于食品的真伪鉴别，通过对食品成分中的特定分子进行快速检测，判断食品原料的真实性，避免假冒伪劣产品对消费者健康造成危害。
4. 生物毒素检测：食品中的生物毒素是一种常见的食品安全隐患，而胶体金免疫层析技术可以用于生物毒素的快速检测，保障食品安全，防止食品中毒事件的发生。
随着人们对食品安全意识的提高和食品安全检测技术的不断进步，胶体金免疫层析技术将在食品安全现场快速检测中发挥越来越重要的作用。
免疫层析技术在食品违禁成分检测中的应用
免疫层析技术在食品违禁成分检测中的应用
杨惠程
【期刊名称】《食品安全导刊》
【年(卷),期】2017(0)9
【摘要】随着社会的发展和人们生活水平的提高,食品问题越来越引起人们的关注.本文分别阐述了荧光微球免疫层析技术、胶体金免疫层析技术、纳米金免疫层析技术在食品违禁成分检测中的运用.
【总页数】1页(P98)
【作者】杨惠程
【作者单位】昆明医科大学海源学院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.免疫层析技术在食品违禁成分检测中的应用
2.胶体金免疫层析技术在食品安全检测中的应用
3.胶体金免疫层析技术在食品安全检测中的应用
4.食品检测中胶体金免疫层析技术的应用分析
5.液质联用法在杜仲颗粒中违禁化学成分检测中的应用价值
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二、乳品主要危害因素
兽药残留 霉菌毒素 非法添加 农药残留 微生物
兽药残留
兽药残留是指动物产品的任何可食部分所含兽药的母体化合 物及其代谢物， 以及与兽药有关的杂质。
杀虫剂类, 7, 6%
消炎镇痛类药物, 8, 6%
激素类药 物, 13, 10%
消化系统类 药物, 2, 2% 其他类药物, 3, 2%
荧光免疫层析检测法
酶联免疫吸附测定法 化学发光免疫检测法 放射免疫测定法 荧光偏振免疫检测法 微生物抑制测定法 生物传感器 生物芯片
免疫层析技术在乳品安全 检测中的应用
马立才 博士 2017年08月 北京
主要内容
• 我国奶业发展现状 • 乳品主要危害因素 • 免疫层析检测技术
1. 胶体金免疫层析
2.
荧光免疫层析技术
• 检测卡常见问题分析
一、我国奶业发展现状
市场情况：
人均乳品消费量： 全球：107公斤；发达国家：>200公斤；
我国：约30公斤；
全球乳品年产量：约8.02亿吨； 我国：3725万吨，仅占4.6%； 2015 年我国生鲜牛乳产量 3755 万吨，比 2014 年增加 0.8% ； 奶制品加工量2761.1万吨，比2014增长4.1%；
我国奶业存在的问题
洋牛奶、洋奶粉疯狂冲击了国内市场，危及养牛业 疫情防控未做好，如布氏病有上升趋势 消费者对国产奶缺乏信心，行业信任危机依然存在 企业诚信欠失： 改生产日期， 乳品使用防腐剂 乳源质量安全仍然让人放心不下
抗菌类药物 抗寄生虫类药物 激素类药物
抗菌类药物, 72, 57%
消炎镇痛类药物 杀虫剂类 消化系统类药物 其他类药物
抗寄生虫类药物, 22, 17%
127种兽药残留最大残留限量种类数量比较
兽药残留的危害
奶牛饲养过程中由于不合理使用治疗药物和饲料药物
添加剂，导致牛奶中广泛存在兽药残留。兽药残留对人体 健康有较大危害作用，主要表现为过敏反应、细菌耐药性、 致畸致癌作用，以及激素作用等方面。
非法添加或超标超限添加物
A. 非法添加添加物： 三聚氰胺、β -内酰胺酶、碱性物质、皮革水解蛋白等
B. 超标超限添加物：
增稠剂、防腐剂、抗氧化剂等，其他未允许用的食品添加剂
农药残留
农药残留是指任何由于使用农药而在食品、农产品和动 物饲料中出现的特定物质。分为杀虫剂（包括杀螨剂）、杀菌 剂、除草剂、植物生长调节剂、杀鼠剂等。 中国牛奶中农药限量共涉及 10 种农药 （艾氏剂和狄氏
剂、氯丹、滴滴涕、硫丹、倍硫磷、六六六、七氯、林丹、马
拉硫磷、甲胺磷） ，其中 GB 2763-2005 及其第一号修改单中限 定7种，《无公害食品生鲜牛奶》（NY5045-2008）限定３种。
微生物
牛乳中含有一定数量的微生物，主要来源于两方面：一是患病乳 牛对生鲜乳的污染，二是挤奶过程中的污染，三是挤奶后运输途中受 到的污染或原有微生物的增殖 。 牛奶中的微生物主要有细菌（乳酸菌、丙酸菌、肠细菌、孢子 杆菌等）、真菌（霉菌有乳粉胞霉、乳酪粉胞霉、黑念珠霉、变异念 珠霉、乳酪青霉、灰绿青霉和黑曲霉等）和噬菌体（侵害细菌的滤过
性病毒统称为噬菌体，亦称为细菌病毒。目前已发现大肠杆菌、乳酸
菌、赤痢菌、沙门氏杆菌、霍乱菌、葡萄球菌、结核菌、放线菌等。
乳品主要危害因素的检测方体金免疫层析法
高效液相色谱法（HPLC）
超高效液相色谱法（UPLC） 气谱-质谱法（GC-MS） 气谱-串联质谱法（GC-MS/MS） 液谱-质谱法（LC-MS） 液谱-串联质谱法（LC-MS/MS） 其他新技术，如飞行时间质谱等
2017年动物及动物产品兽药残留监控计划
化合物 动物/组织 检测限(或定量限) (μg/L） 青霉素G ：1 阿莫西林、氨苄西林：1 动物性食品中β-内酰胺类药物多残留检测 超高效 苯唑西林：1 液相色谱-串联质谱法 氯唑西林：1 头孢喹肟：1 头孢氨苄：1 阿维菌素、多拉菌素：1 高效液相色谱法HPLC （GB 29696-2013） 伊维菌素：1 LC-MS-MS 1031 -2-2008 液相色谱质谱法 （ 号公告 ） 地塞米松e0.2（定量限） 环丙沙星、恩诺沙星：25 达氟沙星：7.5 液相色谱质谱法LC-MS-MS （GB/T 21312-2007) 氟甲喹：12.5 高效液相色谱法HPLC （GB 29692-2013） 洛美沙星、氧氟沙星：0.5 诺氟沙星 、培氟沙星1.0 磺胺（二）甲基嘧啶 2.0 磺胺二甲异嘧啶1.0 液相色谱质谱法LC-MS-MS （781号公告-12-2006） 磺胺甲氧嘧啶3.0 磺胺甲基异噁唑 4.0 磺胺异噁唑 5.0 高效液相色谱法HPLC （GB 29689-2013） 甲砜霉素10 动物性食品中林可胺类和大环内酯类药物多残留检 1 测超高效液相色谱-串联质谱法 牛奶中四环素类药物残留检测－超高效液相色谱-串 四环素、土霉素、金霉素 5 联质谱法 多西环素 5 推荐检测方法 残留限量 MRL（μg/kg） 4 10 30 30 20 100 ND 10 0.3 100 30 50 ND
β-内酰胺类
牛/奶
阿维菌素类 地塞米松
牛/奶 牛/奶
氟喹诺酮类
牛/奶
磺胺类
牛/奶
100
甲砜霉素 林可胺类和 大环内酯类 四环素类
牛/奶 牛/奶 牛/奶
50 150 100 ND
霉菌毒素
霉菌毒素是丝状真菌或霉菌在生长繁殖过程中通过不同的代
谢途径产生的代谢物，如多聚乙酰途径（黄曲霉毒素）、氨
基酸途径（黄曲霉毒素）等； 目前已发现了300多种的霉菌毒素，其中黄曲霉毒素、赭曲霉 素、伏马菌素、T-2毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯 醇等倍受关注。 乳品中最受关注的霉菌毒素是黄曲霉M1；奶牛摄入被黄曲霉 毒素B1污染的饲料后，通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。 黄曲霉毒素M1危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动 物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。