【CN109486891A】一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法【专利】

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一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法
技术领域 [0001] 本发明涉及胶原蛋白肽提取技术领域，具体是一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取 制备方法。
( 19 )中华人民 共和国国家知识产权局
( 12 )发明专利申请
(21)申请号 201910007876 .1
(22)申请日 2019 .01 .04
(71)申请人 广东海洋大学 地址 524000 广东省湛江市 1244000045625261X8
(72)发明人 洪鹏志 刘唤明 周春霞 邓楚津 杨萍
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CN 109486891 A
权 利 要 求 书
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截留分子量为2000道尔顿 ，再将第一层纳滤膜的 透过液通过第二层纳滤膜 ，第二层纳滤膜 的截留的分子量为500道尔顿，被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿， 为小分子蛋白酶解液。
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CN 109486891 A
说 明 书
( 54 )发明 名称 一 种小分 子鱼皮 胶原蛋白 肽的 提取 制备方
法 ( 57 )摘要
本发明公开了一种小分子鱼皮胶原蛋白肽 的提取制备方法，包括原料准备、酶解预处理、酶 解处理等步骤，本发明一种小分子鱼皮胶原蛋白 肽的提取制备方法，先对鱼皮进行脱脂处理后再 进行酶解处理 ，酶解处理过程中采 用多种不同的 蛋白酶对鱼皮进行酶解 ，不仅可以提高酶解速 度 ，还能 有效降 低蛋白 酶的 用量 ，能 够有效提高 小分子鱼皮胶原蛋白肽的产量。本发明的提取方 法中采 用改性活性炭进行脱色 ，吸附 性能佳 ，在 酶 解液能 够分 散 均 匀 ，在 用量 少、时间 短的 条 件 下即能达到良好的脱色脱腥效果，且有效成分不 损失 ，提取方法具有投入低、操作简单、蛋白 质降 解效果好 、鱼皮 胶原蛋白 肽获得率高的 优势 ，易 于工业化规模生产，具有良好的应用价值和市场 潜力。
(74)专利代理机构 深圳市兴科达知识产权代理 有限公司 44260
代理人 杨小东
(51)Int .Cl . C12P 21/06(2006 .01) C07K 14/78(2006 .01) C07K 1/14(2006 .01)
(10)申请公布号 CN 109486891 A (43)申请公布日 2019.03.19
权利要求书2页 说明书7页
CN 109486891 A
CN 109486891 A
权 利 要 求 书
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1 .一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤： S1、原料准备：取新鲜鱼类采集鱼皮，将鱼皮洗净，沥干鱼皮表面的水，将鱼皮切碎； S2、脱脂处理 ：往切碎的鱼皮中 加入氢氧化钠和水 ，搅拌20-30min后静置4-6h ，滤去水 ， 对鱼皮进行脱脂处理，脱脂结束将鱼皮冲洗2-3次； S3、酶解预处理 ：向脱脂的 碎鱼皮中 加入2-4倍碎鱼皮 质量的 去离子水 ，打浆并混合 ，得 到浆液； S4、酶解处理：向浆液中加入蛋白酶进行酶解得到酶解液； S5、灭活处理：将酶解液进行灭酶活性处理，得到灭酶酶解液； S6、离心处理：将灭酶酶解液置于离心机中进行离心，取上清液； S7、脱色处理：利用脱色剂对上清液进行脱色处理； S8、去腥处理：利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理； S9、纳滤处理：采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理，得到小分子蛋白酶解液； S10、将小分子蛋白酶解液浓缩，喷雾干燥，得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。 2 .根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所 述步骤S2中，氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的1-2％，水的加入量为鱼皮质量的2-4倍。 3 .根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所 述步骤S4中 ，酶解的具体过程为：先加入浆液重量0 .1-0 .2％的风味蛋白酶，调节pH值至 6 .5-7 .5，将浆液加热至55-65℃，酶解1 .5-2 .5h；再加入浆液重量0 .1-0 .2％的中性蛋白酶， 50-60℃的条件下酶解2-3h；然后降温至40-50℃，加入浆液重量0 .05-0 .1％的肽酶，40-50 ℃条件下酶解1-2h；加入浆液重量0 .05-0 .1％的碱性蛋白酶，调节pH值至8-9，40-50℃条件 下酶解2-3h；加入浆液重量0 .1-0 .2％的胶原酶，调节pH值至7 .0，40-50℃条件下酶解2-3h。 4 .根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所 述步骤S5中，灭活处理的过程为将酶解液在90-100℃水浴下灭酶活性15-20min。 5 .根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所 述步骤S6中，离心机的转速为3000-5000r/min。 6 .根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所 述步骤S7中 ，脱色处理的具体过程为:将上清液升温到50-70℃ ，调节pH为5-7 ，加入酶解液 重量1-3％的改性活性炭，超声搅拌10-20min，过滤，得到滤清液。 7 .根据权利要求6所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所 述改性活性炭的制备方法为:按料液比为1:8-12g/mL将活性炭放入浓度为0 .8-1 .2M的氢氧 化钠溶液中浸泡45-50h ，然后用去离子水快速洗涤2-3次 ，再将活性炭放入含有柠檬黄和苯 甲酸钠的乙酸乙酯中，在75-85℃下搅拌25-35h，取出活性炭干燥，即得改性活性炭。 8 .根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所 述步骤S8中，去腥处理的过程为：控制滤清液的pH值为4 .5-5 .5，将滤清液置于去腥树脂中， 滤清液在去腥树脂中停留的时间为15-60min。 9 .根据权利要求8所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所 述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。 10 .根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于， 所述步骤S8中，纳滤处理的过程为：将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜，第一层纳滤膜的