铁皮石斛中石斛碱、多糖的含量测定
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０ ． ９ ９ ９ ７ ， ｎ＝ ６ ） ， 平均加样回收率 为 ９ ７ ． １ ％； 多糖在 ０ ． ０ ２— ０ ． １ ０ ｇ ／ Ｌ范围内线性 关系 良好 （ ｒ＝０ ． ９ ９ ９ ５，
ｎ＝ ６ ） ， 平均加样 回收率为 ９ ４ ． ９ ％ 。结 论 ： 本 研 究建 立 的 方 法 测 定 准 确 、 重复性好 ， 可 更 好 地 控 制 铁 皮 石
２ ． ２ ． １ 石斛碱对照 品溶液 的制备
典》 内容 ， 为完善铁皮石斛 的质量 评价提供依据 。
１ 材料
精密称取石斛碱对 照品 ５ ０ ． Ｏ ｌ ｍ ｇ 至１ ０ ０ ｍ Ｌ 量瓶 中 ， 加
甲醇定 容至 刻度 ， 摇匀 ， 得５ ０ ０ ． １ ｍｇ・ Ｌ 石斛 碱对 照品母 液 。精密量取 １ ｍ Ｌ石斛碱母 液至 １ ０ ｍ Ｌ量瓶 中 ， 加 甲醇定
提高外周 白细胞数 ， 促进淋 巴细 胞产生 移动抑 制 因子 ， 可有
２ ． １ ． ２ 多糖 供试 品的制备 取上述过滤后药材粉末 ， 挥干溶剂 ， 加水 ２ ０ ０ ０ ｍ Ｌ ， 加热 回流 ２小时 ， 放冷 ， 转移 至 ２ ５ ０ ｍＬ量瓶 中 ， 用少量 水分 次洗 涤容器 ， 洗 液并 入同一量 瓶中 ， 加水至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 精密 量取续滤液 ２ ｍ Ｌ， 置１ ５ ｍ Ｌ离心管 中， 精密 加入 ９ ５ ％ 乙醇 ， 摇匀 ， 冷藏 １小时 ， 取 出， 离心 ２ ０分 钟 ， 弃 去上清液 ， 沉淀加
物碱类 、 多糖类 、 菲类 、 联苄 母 核类 ＿ ４ Ｊ ， 其 中生物 碱类 、 多糖 类药理 活性 较为显著 。石 斛碱型 倍半萜 类生物 碱为 石斛 属
２ ． １ ． １ 石斛碱供试 品的制 备 取鲜 铁皮石斛样品 ， 置烘 箱 中 ５ ０ ￣ Ｃ， 干燥 ， 粉碎 ， 过三 号
柱（ ３ ０ ｍ ｍ Ｘ ０ ． ２ ５ ｍ ｍ， ０ ． ２ ５ ｍ）， 程序 升温 ： 初始 温度 ８ ０℃ ， 以１ ０℃ ・ ｍｉ ｎ 的速率升温至 ２ ５ ０℃ ， 保持 ５
分钟 ， 进 样 口温度 ： ２ ５ ０ ｏ Ｃ， 检 测器温度 ： ２ ５ ０℃ ， 进 样量 １ ０ 。采用 紫外 分光光度 法进 行 多糖 的含 量测 定， 以无水葡 萄糖 为对 照品 ， 于４ ８ ８ ｎ ｍ处测 定。结果 ： 石斛碱 在 ０ ． １ ０—２ ． ｏ ０ ｇ范 围 内线性 关 系良好 （ ｒ
热水溶解 ， 转移 至 ２ ５ ｍＬ量 瓶 中 ， 放冷 ， 加水 至刻 度 ， 摇匀，
即得 。
２ ． ２ 对 照 品溶 液制 备
效提高机体免疫力 。２ ０ １ ０版《 药典》 首次收载 了铁皮 石斛
的质量 标准 ， 对多糖 以及 甘露糖进行含量测定 。本文对铁 皮 石 斛中多糖 、 石斛 碱这两种药理活性成分 同时进行 了有 效提 取， 并分别采用气 相色谱法 、 紫外分光光 度法、 苯酚 一硫 酸法 比色法测定 了铁皮 石斛 中石 斛碱 、 多糖 的含量 ， 补充 了 《 药
植 物特 有 ， 其 中石 斛 碱是 其 中最 早发 现 ， 研究 最 多 的 生 物 碱 ； 金钗石斛碱与非 甾体类抗 炎药药 理作用 相似 ， 具有 免 疫 调节 、 抗炎 、 扩张 血管 等作用 一 Ｊ 。多 糖类 成分是 药用 石 斛发挥免疫活性作用 的重要物 质基 础 ， 铁皮石斛多糖能 显著
斛 药材 的 质 量 。
关键词
铁 皮石斛 ； 多糖 ； 石斛碱 ； 气相 色谱 法 ； 紫外分光 光度 法； 含量测定
２ 方 法 与 结 果
２ ． １ 供 试 品 溶 液 的提 取 制 备
铁皮石斛为 兰科植物铁 皮石斛的干燥茎 ， 性甘 、 微寒 ， 归
胃、 肾经 ， 具有益 胃生 津 、 滋 阴清 热的 功效 ， 主要 用于热 病津 伤， Ｉ ＝ Ｉ 干烦躁 ， 胃阴不 足等 症 …。现 代药 理 学研 究表 明， 铁 皮石斛对非 特异 性及 特 异性 免疫 均有 增 强作用 ， 在 抗肿 瘤、 抗氧化 、 降低血 糖以及 白内障的治疗等方 面， 药理作用显 著 ］ 。其化学成分较 复杂 ， 已确定 的化合 物类型 主要 有 ： 生
中国 中医药科技 ２ ０ １ ５年 ９月第 ２ ２卷 第 ５期 Ｓ ｅ ｐ ．２ ０ １ ５ Ｖ ｏ １ ． ２ ２ Ｎ ｏ ． ５
・５ ２ ７・
Байду номын сангаас
铁 皮 石 斛 中石 斛 碱 、 多糖 的含 量测 定
葛颖华 ， 王 杰 ， 周 萃 ， 童晔玲 ， 任泽明
（ 浙江省 宁波市 中医院 ・ 宁波 ３ １ ５ ０ ０ ０ ； 浙江省 中 医药研 究院 ・ 杭州 ３ １ ０ ０ ０ ７ ） 摘 要 目的 ： 测 定铁 皮石 斛 中石斛碱 、 多糖 的含 量。方 法： 采 用气相 色谱 法测 定石斛碱 ， Ｄ Ｂ一１毛 细管
筛 。取样 品粉末 ３ ． ３ ４ ｇ 、 加２ ０ ０ ｍ Ｌ ９ ０ ％ 乙醇 ， 回流 １小时 ，
过滤 ， 倾 出上清液 ， 再加 １ ０ ０ ｍ Ｌ ９ ０ ％ 乙醇 ， 回流 １ 小时， 倾 出
上清液 ， 合并上 述 ２次上 清液 ， 置旋转 蒸 发仪 浓缩 ， 水浴 锅 ５ ０ ￣ Ｃ 蒸干 ， 干燥 品加 甲醇溶解 ， 定 容至 ２ ５ ｍＬ 。
容至刻度 ， 摇匀 ， 制成 ５ ０ ． ０ １ ｍｇ・ Ｌ 溶液， 作 为 对 照 品溶
鲜铁 皮 石 斛 ： 杭州 华 东 中药 饮 片有 限公 司， 批 号： １ ２ １ １ １ ３ ； 石斛 碱 标 准 品 ： 成 都 曼 思 特 生 物 技 术 有 限公 司 ， ＭＵ Ｓ Ｔ一１ ２ ０ ８ ０ ６ ０ ８ 。Ａ Ｅ ２ ４ ０电子 天平 ： 瑞士 ＭＥ ＇ Ｉ ＴＬ Ｅ Ｒ； Ｈ Ｈ—
０ ． ９ ９ ９ ７ ， ｎ＝ ６ ） ， 平均加样回收率 为 ９ ７ ． １ ％； 多糖在 ０ ． ０ ２— ０ ． １ ０ ｇ ／ Ｌ范围内线性 关系 良好 （ ｒ＝０ ． ９ ９ ９ ５，
ｎ＝ ６ ） ， 平均加样 回收率为 ９ ４ ． ９ ％ 。结 论 ： 本 研 究建 立 的 方 法 测 定 准 确 、 重复性好 ， 可 更 好 地 控 制 铁 皮 石
２ ． ２ ． １ 石斛碱对照 品溶液 的制备
典》 内容 ， 为完善铁皮石斛 的质量 评价提供依据 。
１ 材料
精密称取石斛碱对 照品 ５ ０ ． Ｏ ｌ ｍ ｇ 至１ ０ ０ ｍ Ｌ 量瓶 中 ， 加
甲醇定 容至 刻度 ， 摇匀 ， 得５ ０ ０ ． １ ｍｇ・ Ｌ 石斛 碱对 照品母 液 。精密量取 １ ｍ Ｌ石斛碱母 液至 １ ０ ｍ Ｌ量瓶 中 ， 加 甲醇定
提高外周 白细胞数 ， 促进淋 巴细 胞产生 移动抑 制 因子 ， 可有
２ ． １ ． ２ 多糖 供试 品的制备 取上述过滤后药材粉末 ， 挥干溶剂 ， 加水 ２ ０ ０ ０ ｍ Ｌ ， 加热 回流 ２小时 ， 放冷 ， 转移 至 ２ ５ ０ ｍＬ量瓶 中 ， 用少量 水分 次洗 涤容器 ， 洗 液并 入同一量 瓶中 ， 加水至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 精密 量取续滤液 ２ ｍ Ｌ， 置１ ５ ｍ Ｌ离心管 中， 精密 加入 ９ ５ ％ 乙醇 ， 摇匀 ， 冷藏 １小时 ， 取 出， 离心 ２ ０分 钟 ， 弃 去上清液 ， 沉淀加
物碱类 、 多糖类 、 菲类 、 联苄 母 核类 ＿ ４ Ｊ ， 其 中生物 碱类 、 多糖 类药理 活性 较为显著 。石 斛碱型 倍半萜 类生物 碱为 石斛 属
２ ． １ ． １ 石斛碱供试 品的制 备 取鲜 铁皮石斛样品 ， 置烘 箱 中 ５ ０ ￣ Ｃ， 干燥 ， 粉碎 ， 过三 号
柱（ ３ ０ ｍ ｍ Ｘ ０ ． ２ ５ ｍ ｍ， ０ ． ２ ５ ｍ）， 程序 升温 ： 初始 温度 ８ ０℃ ， 以１ ０℃ ・ ｍｉ ｎ 的速率升温至 ２ ５ ０℃ ， 保持 ５
分钟 ， 进 样 口温度 ： ２ ５ ０ ｏ Ｃ， 检 测器温度 ： ２ ５ ０℃ ， 进 样量 １ ０ 。采用 紫外 分光光度 法进 行 多糖 的含 量测 定， 以无水葡 萄糖 为对 照品 ， 于４ ８ ８ ｎ ｍ处测 定。结果 ： 石斛碱 在 ０ ． １ ０—２ ． ｏ ０ ｇ范 围 内线性 关 系良好 （ ｒ
热水溶解 ， 转移 至 ２ ５ ｍＬ量 瓶 中 ， 放冷 ， 加水 至刻 度 ， 摇匀，
即得 。
２ ． ２ 对 照 品溶 液制 备
效提高机体免疫力 。２ ０ １ ０版《 药典》 首次收载 了铁皮 石斛
的质量 标准 ， 对多糖 以及 甘露糖进行含量测定 。本文对铁 皮 石 斛中多糖 、 石斛 碱这两种药理活性成分 同时进行 了有 效提 取， 并分别采用气 相色谱法 、 紫外分光光 度法、 苯酚 一硫 酸法 比色法测定 了铁皮 石斛 中石 斛碱 、 多糖 的含量 ， 补充 了 《 药
植 物特 有 ， 其 中石 斛 碱是 其 中最 早发 现 ， 研究 最 多 的 生 物 碱 ； 金钗石斛碱与非 甾体类抗 炎药药 理作用 相似 ， 具有 免 疫 调节 、 抗炎 、 扩张 血管 等作用 一 Ｊ 。多 糖类 成分是 药用 石 斛发挥免疫活性作用 的重要物 质基 础 ， 铁皮石斛多糖能 显著
斛 药材 的 质 量 。
关键词
铁 皮石斛 ； 多糖 ； 石斛碱 ； 气相 色谱 法 ； 紫外分光 光度 法； 含量测定
２ 方 法 与 结 果
２ ． １ 供 试 品 溶 液 的提 取 制 备
铁皮石斛为 兰科植物铁 皮石斛的干燥茎 ， 性甘 、 微寒 ， 归
胃、 肾经 ， 具有益 胃生 津 、 滋 阴清 热的 功效 ， 主要 用于热 病津 伤， Ｉ ＝ Ｉ 干烦躁 ， 胃阴不 足等 症 …。现 代药 理 学研 究表 明， 铁 皮石斛对非 特异 性及 特 异性 免疫 均有 增 强作用 ， 在 抗肿 瘤、 抗氧化 、 降低血 糖以及 白内障的治疗等方 面， 药理作用显 著 ］ 。其化学成分较 复杂 ， 已确定 的化合 物类型 主要 有 ： 生
中国 中医药科技 ２ ０ １ ５年 ９月第 ２ ２卷 第 ５期 Ｓ ｅ ｐ ．２ ０ １ ５ Ｖ ｏ １ ． ２ ２ Ｎ ｏ ． ５
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Байду номын сангаас
铁 皮 石 斛 中石 斛 碱 、 多糖 的含 量测 定
葛颖华 ， 王 杰 ， 周 萃 ， 童晔玲 ， 任泽明
（ 浙江省 宁波市 中医院 ・ 宁波 ３ １ ５ ０ ０ ０ ； 浙江省 中 医药研 究院 ・ 杭州 ３ １ ０ ０ ０ ７ ） 摘 要 目的 ： 测 定铁 皮石 斛 中石斛碱 、 多糖 的含 量。方 法： 采 用气相 色谱 法测 定石斛碱 ， Ｄ Ｂ一１毛 细管
筛 。取样 品粉末 ３ ． ３ ４ ｇ 、 加２ ０ ０ ｍ Ｌ ９ ０ ％ 乙醇 ， 回流 １小时 ，
过滤 ， 倾 出上清液 ， 再加 １ ０ ０ ｍ Ｌ ９ ０ ％ 乙醇 ， 回流 １ 小时， 倾 出
上清液 ， 合并上 述 ２次上 清液 ， 置旋转 蒸 发仪 浓缩 ， 水浴 锅 ５ ０ ￣ Ｃ 蒸干 ， 干燥 品加 甲醇溶解 ， 定 容至 ２ ５ ｍＬ 。
容至刻度 ， 摇匀 ， 制成 ５ ０ ． ０ １ ｍｇ・ Ｌ 溶液， 作 为 对 照 品溶
鲜铁 皮 石 斛 ： 杭州 华 东 中药 饮 片有 限公 司， 批 号： １ ２ １ １ １ ３ ； 石斛 碱 标 准 品 ： 成 都 曼 思 特 生 物 技 术 有 限公 司 ， ＭＵ Ｓ Ｔ一１ ２ ０ ８ ０ ６ ０ ８ 。Ａ Ｅ ２ ４ ０电子 天平 ： 瑞士 ＭＥ ＇ Ｉ ＴＬ Ｅ Ｒ； Ｈ Ｈ—