与番茄颈腐根腐病抗病基因Frl连锁的标记及应用

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刘　蕾，王　辉，李文丽，等．与番茄颈腐根腐病抗病基因Ｆｒｌ连锁的标记及应用［Ｊ］．江苏农业科学，２０１８，４６（１６）：９１－９３．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１８．１６．０２２

与番茄颈腐根腐病抗病基因Ｆｒｌ连锁的标记及应用

刘　蕾，王　辉，李文丽，王　富

（青岛农业大学园艺学院，山东青岛２６６１０９）

摘要：利用与番茄颈腐根腐病抗病基因Ｆｒｌ紧密连锁的分子标记ＳＣＡＲ２００和Ｃ２－２５在已知抗病材料和感病材料中进行验证，进而结合接种鉴定方法在抗病商品品种凯文Ｆ２代群体中加以应用。结果表明，ＳＣＡＲ２００和Ｃ２－２５均为共显性标记，可以用于已知抗病和感病材料中的分子标记辅助鉴定；ＳＣＡＲ２００和Ｃ２－２５在凯文Ｆ２代群体２４个单株中均检测到７个纯合抗病单株、５个感病单株和１２个杂合抗病单株；接种鉴定结果显示，有１个单株与分子鉴定结果存在出入，即分子标记辅助鉴定的准确率为９５．８３％。

关键词：番茄；颈腐根腐病；Ｆｒｌ基因；ＳＣＡＲ标记；ＣＡＰＳ标记

中图分类号：Ｓ４３６．４１２．１＋

９ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０１８）１６－００９１－０３

收稿日期：２０１７－０２－２８

基金项目：山东省现代农业产业技术体系（编号：ＳＤＡＩＴ－０５－０２）；山东省自然科学基金（编号：０１０ＣＭ０４７、ＺＲ２０１４ＣＱ０３４）；青岛农业大学高层次人才科研基金（编号：６６３－１１１５０４１）；山东省良种工程（编号：６６２－２３１７１８２）。

作者简介：刘　蕾（１９９１—），女，山东临沂人，硕士，主要从事蔬菜遗传育种及生物技术研究。Ｅ－

ｍａｉｌ：ｌｌｓｔａｒ６２４＠１２６．ｃｏｍ。通信作者：王　富，博士，教授，研究方向为蔬菜遗传育种及生物技术。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｆｕａｂｃｄ＠１６３．ｃｏｍ。

番茄颈腐根腐病（Ｆｕｓａｒｉｕｍｃｒｏｗｎａｎｄｒｏｏｔｒｏｔ，简称

ＦＣＲＲ）于１９７４年首次在日本被发现［１］

，之后于１９７６年在美国南部被发现［

２］

。目前此病害已对美国、日本、加拿大、墨西哥、以色列、韩国以及欧洲等许多国家和地区的番茄生产造成

重大损失［３－７］

。最近几年，该病在我国华北、东北地区发病较

重，其中山东省最早于２０１０年在寿光市发现该病，随后逐渐蔓延至全省各地。当前，此病害已经严重威胁到山东省温室

大棚冬春季番茄生产［

８］

。引发番茄颈腐根腐病的病原菌主要是尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐专化型（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍｆ．ｓｐ．ｒａｄｉｃｉｓ－ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ，简称ＦＯＲＬ），此病侵染周期相对较长，番茄一旦感染，目前还

没有十分安全有效的治疗方法［

９］

，所以对于该病害最科学的防治方法就是选育抗番茄颈腐根腐病的新品种。已有研究结果表明，番茄颈腐根腐病抗病性遗传是由显性单基因Ｆｒｌ控

制的［

１０］

，并且３份抗源材料中的抗病基因均为同一种基因［１１］

，３份番茄颈腐根腐病抗源材料都是源自野生番茄

Ｓｏｌａｎｕｍｐｅｒｕｖｉａｎｕｍ（ＰＩ１２６９４４、ＰＩ１２８６５０和ＰＩ１２６９２６），已有

研究者将其中的抗病基因转入栽培番茄中［１２］

，抗病基因Ｆｒｌ已被定位到９号染色体上［１０，１３］

。

本研究利用与番茄颈腐根腐病抗病基因Ｆｒｌ连锁的分子标记ＳＣＡＲ２００和Ｃ

２－２５在已知抗病和感病材料中进行验证［１４－１５］

，进而在Ｆ１代抗病材料自交后代群体中进行分子标

记辅助筛选，结合接种鉴定结果评价该标记的应用价值。１　材料与方法１．１　材料

本研究所用试验材料包括已知抗病材料Ｐ１、感病材料Ｐ２

及其杂交１代，抗病Ｆ１代商品品种凯文及Ｆ２代群体材料共２４株（分别编号为１～２４）。１．２　方法

１．２．１　番茄样品ＤＮＡ的提取纯化及检测　采用十六烷基三甲基溴化铵（ｈｅｘａｄｅｃｙｌｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ，简称ＣＴＡＢ）法提取试验材料的ＤＮＡ并进行纯化，设计出合适的引

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１９—江苏农业科学　２０１８年第４６卷第１６期