小鼠胚胎-精子冷冻保种申请表-清华大学试验动物中心

小鼠胚胎/精子冷冻保种申请表

需要填写的资料：

说明：

1.*表示必须填写；

2.保种方式的选择：我们采用精子冻存和胚胎冻存的方法进行保种；假如为杂合子，雄性数量≥3

只并且可以和B6交配做净化，我们推荐安乐死一只雄鼠使用精子冻存的方式保种，可以有效控制保种周期，不受雌鼠排卵多少的限制。

3.保种对提供小鼠的要求：

精子冻存

冷冻精子需要提供的小鼠信息：阳性纯合子雄鼠，2-3只，12-18W（最佳），生育能力良好，在实验前7d内进行过成功交配，而在3d内未交配过；冻存2只/品系，20个麦管。

费用：200元/麦管

冷冻的流程和所需的时间：

1)提前1周邮件预约申请，写明小鼠品系名称、数量、出生日期、所在位置。

2)通过申请后安排实验，精子冻存后至少1周进行复苏检测实验（1麦管）。

3)等待代孕小鼠生仔（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，（一周内反

馈检测结果。）

冷冻后的保存：液氮中保存

终生免费保存。

精子复苏（除复苏检测外）

a、外来精子复苏

提前1周邮件预约申请，写明小鼠冻精信息（品系，数量），送达时间。

从接收之日起，1周内安排复苏实验

精子复苏采用体外受精的方式得到2-cell期胚胎，输卵管移植生仔。（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，一周内反馈检测结果。）

费用：IVF 500元，IVF用B6（含激素）40元/只，移植用受体单侧100元/只，双侧180元/只，试剂和人工费100元。

如需其他品系雌鼠，需从外单位订购。

b、动物中心精子复苏

提前1周邮件预约申请，写明复苏品系。

精子复苏采用体外受精的方式得到2-cell期胚胎，输卵管移植生仔。（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，一周内反馈检测结果。）

费用：IVF 500元，IVF用B6（含激素）40元/只，移植用受体单侧100元/只，双侧180元/只，试剂和人工费100元。

注意事项：

1. 运输过程中：请使用专业运输工具（航空罐）进行运输，运输过程中请避免磕碰，注意液氮充足。

2. 由于各家单位使用冷冻精子的方法和试剂并不相同，请一定提供冷冻和复苏的protocol作为参考，且不保证100%复苏成功。截止2015年9月，我们复苏精子平均成功率是40%。

胚胎冻存

品系内冻存需要提供的小鼠信息：雄鼠2-3只12-18W,雌鼠至少10只，3-4W或9-12W。正常情况下可冻存200枚胚胎左右。

费用3000元/品系。

与B6冻存：雄性小鼠，2-3只12-18W，中心提供雌性B6小鼠3-4W，30只。正常情况下可冻存500-600枚胚胎左右。

费用3000元/品系+B6费用40元/只。

c．冷冻流程和所需时间

提前1周邮件预约申请，写明小鼠品系名称、数量、出生日期、所在位置。

通过申请后一周左右安排实验，胚胎冻存采用体外受精的方式得到2-cell期胚胎，玻璃化冻存。胚胎冻存后至少1周进行复苏检测实验（1个冻存管，30 -50枚胚胎/管）

复苏回收的成活2-cell，采用输卵管移植到代孕母鼠体内，19.5天生仔，1-12天剪尾通知取回检测，（一周内反馈检测结果。）

冷冻后的保存：液氮中保存

终生免费保存。

胚胎复苏（除复苏检测外）

a、外来胚胎复苏

提前1周邮件预约申请，写明小鼠冻存胚胎信息（品系，数量）送达时间。

从接收之日起，1周内安排复苏实验，输卵管移植生仔。（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，一周内反馈检测结果。）

b．动物中心胚胎复苏

提前1周邮件预约申请，写明复苏品系。

通过申请后1周左右安排复苏实验，输卵管移植生仔。（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，一周内反馈检测结果。）

费用：移植用受体单侧移植100元/只，双侧移植180元/只，试剂和人工费100元。

注意事项：

1.运输过程中：请使用专业运输工具（航空罐）进行运输，运输过程中请避免磕碰，注意液氮

充足。

2.由于各家单位使用冷冻精子的方法和试剂并不相同，请一定提供冷冻和复苏的protocol作

为参考，且不保证100%复苏成功。截止2015年9月，我们复苏胚胎平均成功率是60%。