临床免疫学检验-课件-第2章-抗原和抗体及其结合反应

亲和常数
抗体与抗原结合是可逆的反应，在平衡时其
亲和常数K= 抗原抗体复合物浓度 游离抗原浓度 游离抗体浓度
• K值大的抗体与抗原牢固结合，不易 解离，说明该抗体有高亲和力。
•高亲和力抗体使用效果较好。
* 亲合力（avidity) 是指一个抗体分子与 整个抗原之间的结合强度，可用来表示抗原 和抗体复合物的整体稳定性。 • 影响因素：
用于免疫测定的抗原分类
1、天然抗原
2、合成多肽抗原
3、基因重组抗原
第一节 抗 原
• 抗原的性能 • 影响抗原免疫原性的因素 • 抗原的特异性与交叉反应 • 抗原的种类 • 用于免疫测定的抗原分类
第二节 抗 体
• 抗体的特性 • 用于免疫测定的抗体分类 • 抗体产生的规律
抗体与免疫球蛋白
抗体 （antibody, Ab） B细胞在抗原刺激下 增殖分化为浆细胞，产生的能与相应抗原发 生特异性结合、具有免疫功能的球蛋白
免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）具有抗 体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白
抗体的特性
特异性 多样性 免疫原性
用于免疫测定的抗体分类
多克隆抗体 单克隆抗体 基因工程抗体
第三节 抗原抗体结合反应的原理
•抗原抗体反应（antigen-antibody reaction）
•定义:是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。 •发生部位:可发生于体内，也可发生于体外。 •血清学反应:由于抗体主要存在于血清中，在抗原或抗体的检 测中多采用血清作试验，所以体外抗原抗体反应曾被称为血清 学反应（serologic reaction）
异物性物质 同种异体物质 隐蔽或改变的自身物质
￭抗原的特异性
抗原决定基（antigenic determinant)
抗原决定基又称表位（epitope），指 抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基 团，是抗原分子与抗体及TCR/BCR特异结 合的基本单位。
第一节 抗 原
• 抗原的性能 • 影响抗原免疫原性的因素 • 抗原的特异性与交叉反应 • 抗原的种类 • 用于免疫测定的抗原分类
• 结合力的大小与两个相互作用基团的极化程 度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方 成反比，键能约为4.2～12.5kJ／mol。
• 这种引力的能量小于静电引力。 • 具有特异性。
氢键结合力(hydregen bond forces)
• 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子 间的引力。
• 供氢体：羧基、氨基和羟基。 • 受氢体：羧基氧、羧基碳和肽键氧等。 • 能的大小取决于氢键的方向。 • 氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次
免疫原性 抗原能刺激机体产生免疫应答， 诱生抗体或致敏淋巴细胞的能 力。
抗原性（免疫反应性） 抗原可在体内外与 其所诱生的抗体或或致敏淋巴 细胞发生特异性结合的能力。
第一节 抗 原
• 抗原的性能 • 影响抗原免疫原性的因素 • 抗原的特异性与交叉反应 • 抗原的种类 • 用于免疫测定的抗原分类
一）Ag分子的理化特性
第二章 抗原和抗体及其结合反应
第一节 抗原 第二节 免疫球蛋白与抗体 第三节 抗原抗体反应的原理 第四节 抗原抗体反应的特点 第五节 影响抗原抗体反应的因素 第六节 抗原抗体反应的类型
第一节 抗 原
• 抗原的性能 • 影响抗原免疫原性的因素 • 抗原的特异性与交叉反应 • 抗原的种类 • 用于免疫测定的抗原分类
•亲和力 •抗体的结合价 •抗原的有效决定簇数目 • 亲合力越大，抗原抗体结合越牢固。
三、亲水胶体转化为疏水胶体
• 血清学反应条件下，抗原、抗体均带负电荷， 使极化的水分子在其周围形成水化层，成为 亲水胶体。
• 当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化 层变薄；而且由于抗原抗体复合物形成后， 与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为 疏水胶体。
1、化学性质 2、分子量大小 3、结构复杂性 4、物理状态
聚合>单体 ;
颗粒性>可溶性
5、分子构象和易接近性
免疫原性
第一节 抗 原
• 抗原的性能 • 影响抗原免疫原性的因素 • 抗原的特异性与交叉反应 • 抗原的种类 • 用于免疫测定的抗原分类
￭异物性：免疫原性的本质
异物：非机体自身成分或虽为自身的但 在胚胎期未与自身免疫系统接触 过的物质 异种物质
抗原抗体结合力示意图
抗体 O
H
氢键结合力 N
H
静电引力 -
-+ 范得华力
+-
疏水作用力
排斥的水
抗原
O N + + -+
+-
二、抗原抗体亲和力和亲合力
* 亲和力 （affinity）是抗体分子上一个抗原 结合点与对应的抗原决定簇之间的相适应性而 存在着的引力，这是抗原与抗体之间固有的结 合力。 * 影响因素：受抗体超变区与抗原表位间分子 空间构型的吻合程度的影响。 •吻合程度越高，亲和力越大。
抗原与相应抗体为什么能特异性结合?
Ag决定簇和Ab分子超变区相互作用(相互吻合, 具有互补性)
亲和性:分子表面特异的可逆的弱结合力在极 短距离内才能发生。
分两个阶段进行：
抗原抗体特异性结合阶段：反应快；不可见。 可见反应阶段：受环境因素影响大。
抗原抗体反应的基本条件：
结合力 亲和力和亲合力 亲水胶体转化为疏水胶体
一、抗原抗体结合力
•抗原和抗ຫໍສະໝຸດ Baidu的结合是互补性的特异性结合 •不形成牢固的共价键，通过非共价键结合 •这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力
*1．静电引力 *2．范德华引力 *3．氢键结合力 *4．疏水作用力
静电引力（库伦引力）
（electrostatic forces） （coulombic forces）
• 概念：抗原和抗体分子带有相反电荷的 氨基和羧基基团之间相互的引力。
• 引力的大小与两个相互作用基团间的距 离的平方成反比；平均键能约为 20.9kJ/mol。
范德华引力（Vander Waals forces）
概念：抗原和抗体相互接近时，由于分子的 极化作用而出现的引力 (诱导力、色 散力和取向力)。
方成反比，键能约20.9kJ/mol。 • 更具有特异性。
疏水作用力（疏水键）
• 概念：两个疏水基团在水溶液中相互接触时， 由于对水分子排斥而趋向聚集的力。
• 抗原决定簇与抗体上的结合点靠近，互相间 正、负极性消失，亲水层立即失去。
• 此力在抗原抗体反应中的结合是很重要的。 • 提供的作用力最大，约占总结合力的50％。