结核分枝杆菌耐药机制

结核分枝杆菌耐药机制

摘要：日趋升高的结核病患病率，以及耐药菌株的增多和扩散，使结核病成为

危害全球民众健康的公共卫生问题。结核杆菌可以侵害人体各个器官，主要损害

肺脏，引起肺结核病。在单一传染病导致人类死亡的名单中，结核病致死率排名

第二。近年来，结核病在大多数国家中出现流行回升的趋势，每年约有900万例

新发患者和200万例死亡患者。为了给该病临床诊断治疗提供理论参考，本文概

述了结核分枝杆菌的最新检测方法及其耐药机制。

关键词：结核病；分枝杆菌；耐药机制

结核病是一个严重的全球性疾病，随着艾滋病病毒及耐药结核菌的出现及播

散成为结核病控制的又一个威胁。虽然我们有结核疫苗及抗结核药物，但控制结

核病仍是一件很棘手的事情。多重耐药结核菌的不断出现给结核病的冶疗带来了

很大的困难，所以必须重视这一问题的研究。

一、结核分枝杆菌耐药机制研究现状

结核分枝杆菌又称结核杆菌，其可以引起结核病这一慢性传染病。据世界卫

生组织相关部门统计，全球约有20亿人被ＭＴＢ感染，现有结核病患者约2000

万人，每年感染ＭＴＢ的新增病例约900万例，死亡病例约为200万例。自耐多

药结核病（ＭＤＲ－ＴＢ）或广泛耐药结核病出现后，全球公共卫生安全受到严

重威胁，全球结核病控制也受到严重影响。世界卫生组织相关报告统计，仅2014年全球有约900万人患有肺结核（不包括隐性感染的病例），其中死亡病例150

万例。尽管有证据显示，肺结核的患病率有缓慢下降趋势，但是多耐药性ＭＴＢ

的出现和蔓延仍是全球疾病控制的一大挑战。据世界卫生组织资料显示，我国耐

药性结核病病例约占世界两成，结核病仍是困扰中国疾病控制的三大传染病之一，其防治工作面临严峻考验。

早期就结核病的治疗仅需要２个月集中治疗便可取得良好效果，临床常用药

物为异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇片。随着ＭＴＢ耐药性的逐渐形成，结核病的集中治疗期被延长至４个月，临床使用药物也只有ＩＮＨ和ＲＦＰ两种。随着ＭＴＢ耐药性的增强，大多数一线药物的治疗效果均不理想，相关研究表明，仅2014年就有约3.5％新感染肺结核患者和20.5％接受过肺结核病治疗的患者出

现了耐多药结核病。耐多药结核病主要针对ＩＮＨ和ＲＦＰ这两种一线药物产生

耐受，耐多药性结核病的出现导致该病治愈率大幅下降，全球治愈率仅为48％。

治疗耐多药性结核病通常要经过两年甚至更长时间，治疗过程中不仅因注射或口

服二线药物（如氨基糖苷类抗生素、喹诺酮类药物等）及名贵药材花费高额药费，还会因为药物产生的不良反应伤害身体，治愈效果很差。

综上所述，耐药性结核病的快速检测和耐药机制的研究更为迫切和重要。快

速检测是治疗耐药结核病的前提和保证，只有快速准确地检测出患者ＭＴＢ的耐

药性，就能避免抗生素的滥用及病人的交叉感染等，从而避免出现新的耐药菌株。耐多药性ＭＴＢ的耐药机制研究是治疗和控制结核病的根本，耐药机理清楚就可

以利用其耐药机理找到快速检测、控制和治疗耐多药肺结核病的方法和途径。

二、结核分枝杆菌耐药机制的具体研究情况

1、材料

1.1菌株：某医院分离的6198株分枝杆菌。

1.2抗结核药物：异烟肼（INH）、利福平（ＲFP）、乙胺丁醇（EMB）、链

霉素（SM）、对氨基水杨酸钠（PAS）、卡那霉素（KM）、氧氟沙星（OFX）。

培养基配方和制备方法参照《临床技术操作规范结核病分册》。

2、方法

2.1菌种鉴定：用对硝基苯甲酸（PNB）、噻吩-2-羧酸肼（TCH）鉴别培养基

对结核分支杆菌临床分离株进行菌种鉴定，仅PNB培养基上生长者为结核分枝杆

菌复合群。

2.2药敏试验

标准菌株：结核分枝杆菌H37Ｒv，购自中国药品生物制品鉴定所。

接种方法：采用绝对浓度法，每份样本接种10－3mg菌液于含药培养基和不

含药的对照培养基上，37℃培养，每周观察一次，至第4周报告结果。每批含药

培养基均接种H37Ｒv菌株10－3mg，以检验含药培养基质量。结果判定无药对

照培养基结核菌应生长茂盛，菌落数＞200个，且无融合；菌落数低于50～100个，则重新作药敏试验。其报告按如下标准：（1）敏感：含药培养基无菌落生长；（2）耐药：在低浓度培养基生长的菌落数大于20个，或占斜面1/4及以上。

3、研究中涉及到的一些概念

3.1初治患者是指有下列情况之一者：（1）从未使用抗结核药治疗的结核病

患者；（2）正应用标准化疗方案，尚未满疗程者；（3）不规则用药，未满1个

月的患者。

3.2复治患者是指有下列情况之一者①因不合理或不规律抗结核药品治疗≥1

个月的患者；②复发或者初治失败的患者［4］。

3.3单耐药是指结核分枝杆菌体外试验对一种抗结核药物耐药；

3.4多耐药（PDＲ-TB）是除外对异烟肼和利福平同时出现的、两种或两种以

上一线抗结核药物耐药；

3.5耐多药（MDＲ-TB）是指至少对异烟肼和利福平同时产生耐药；

3.6广泛耐药（XDＲ-TB）是除对异烟肼、利福平和氟喹诺酮类抗生素耐药外，还对其它至少一种二线抗结核药物耐药。

4、结果

将 6198 株结核分枝杆菌复合群菌株按照初治和复治进行分组分析，初治患

者 4950（79.86%）例，复治患者 1248（20.14%）例。初治组的单耐药率和多耐

药率明显高于复治组，而复治组的耐多药率和广泛耐药率大大高于初治组。初治

与复治组的各类耐药率差异均有统计学意义。

该院共做了6198株结核分枝杆菌的体外药敏试验，对7种抗结核药物的总

耐药率为20.56%，低于2010年全国第五次结核病流调结果（42.1%）。耐药率顺

位前5位依次为INH（14.18%）、ＲFP（13.57%）、SM（12.31%）、EMB

（3.87%）、OFLX（2.60%）。可能由于选用药物不同，我院耐药率顺位与全国流

调不尽相同。全国流调的耐药率顺位是INH（28.6%）、SM（19.6%）、PAS

（16.8%）、Pto（12.9%）和OFLX（10.7%），可能由于全国流调范围不仅局限于

医院，还包括结防机构。初治患者耐药率19.49%，复治患者耐药率24.76%，低

于2010年全国的42.7%和38.5%；广泛耐药率0.45%，低于2010年全国的2.1%。从2012～2015年间耐药率变化情况看，我院结核菌总耐多药率为9.31%（见表3

第6列），根据调查的医院2003～2009年耐多药率10.2%略有下降，但高于全国的6.8%；INH（14.18%vs.23.2%）、SM（12.31%vs.18.5%））和EMB

（3.87%vs.15.1%）、OFLX（2.60%vs.6.5%）单耐药水平下降显著，ＲFP略有下降