牛奶中硒含量测定方法的分析.kdh

荧光分析法是利用紫外线、红外线或波长较短 的可见光照射某物质，产生荧光，利用荧光光谱、 荧光强度、荧光寿命等特性及其相互关系进行分 析。此法灵敏度、精密度及准确度高。顾俊等采用 2, 3-二氨基萘（DAN）荧光测定法测定母乳中硒， 乳样经混合酸消化后，硒化合物转变成四价无机 硒，与 DAN 反应生成 4, 5-苯丙苤硒脑绿色荧光物 质，能被环己烷萃取，其荧光强度与硒的浓度在一 定条件下成正比，相对标准偏差（RSD）为 2.9%， 加标回收率为 92%～99%[ 6 ]。同时测定了 5 种品牌 鲜牛奶的硒含量，结果为 14.2～21.3 μg·L－1，平均 值为 19.1 μg·L－1，与王祥朴报道的 19.4 μg·kg－1 相 符[ 6-7 ]。胡小玲等利用优化选择的实验条件进行氢 化物发生-原子荧光光度法测定水中硒，硒浓度在 0 ～0.20 mg·L －1 范 围 内 有 良 好 的 线 性 关 系 ， r = 0.9997， 检 出 限 为 0.78 μg·L －1， RSD 为 2.3% ～ 7.9%，回收率为 96%～105%。此方法准确、灵敏、 稳定[ 8 ]。 2.2 原子吸收光谱法
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[ 8 ] 胡小玲, 陈剑刚, 张瑰, 等. 氢化物原子荧光法测定水中硒优化
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目前，养殖环节中的大多疾病是由于肠道受损 引起的。不良的肠道健康会导致垫料潮湿、饲料转 化率低、上市体重不达标、水样或黏稠的粪便、营
收稿日期：2010-06-02 作者简介：辜新贵（1979—），男，湖北孝感人，硕士，主要从 事家禽疫病防控工作。
养吸收不良、脚趾皮炎、细菌的继发感染、球虫的 发生率上升等，给生产带来严重的经济损失。 2 常见肠道疾病的危害 2.1 球虫病
硒是人和动物必需的微量元素之一，是机体红 细胞谷胱甘肽过氧化物酶的组成成分。对人体的健 康和生长发育有一定影响[ 1]。1988 年，中国营养学 会推荐 7 岁以上人群膳食硒的含量为 50 μg·d－1； 2000 年，美国医学研究所推荐成年人膳食硒的需 要量为 60 μg·d－1，最大耐受量为 400 μg·d－1[ 2 ]。牛 奶是人体消化吸收率最高的食品之一，随着我国人 民生活水平的日益提高，牛奶已成为众多消费者的 常规食品，许多人养成了定期定量食用牛奶的习 惯。因此，对牛奶进行硒强化是一条补硒的捷径， 既有利于人体吸收，也更易被消费者所接受[ 3 ]。测 定奶中的硒含量，对评估人的硒摄入量，提高人们 的健康水平有重要意义。本文依据近年来对血、 水、毛发、尿、内脏组织、蔬菜粮食、人乳、奶 粉、牛奶等生物样品中硒的测定方法，综述了牛奶 中硒的分析方法，为研究者选择合适的检测方法提 供参考。 1 样品的采集、贮藏及前处理 1.1 奶样的采集
奶样品必须通过机械泵收集，操作应符合规 范。所用容器须先用洗涤剂刷洗，再用自来水冲洗 干净，30%硝酸浸泡 48 h，然后用蒸馏水冲洗数 次，最后再用超纯水浸泡 24 h 烘干备用。 1.2 贮藏
采集到的乳样品须经过冷冻干燥，用液氮成干 冰立即处理，然后于 -14、-18、-20、-70 ℃ 等温
收稿日期：2010-06-10 作者简介：吕战伟（1984—），男，河南漯河人，硕士研究生， 研究方向为反刍动物营养。
酸消解法
设备要求低，处理彻底；温 消耗大量酸，严重污
度低，元素挥发损失少，器 染环境，耗时长约 3～
材是玻璃仪器，不易吸附硒 5 h；用 HClO4 易发生
元素。
爆炸。
温度低，用酸少，污染小， 不完全消化法 耗 时 短 约 10 min， 操 作 简 分解不彻底
单。
微波消解法
处理样品速度快，3～4 min 即可完全分解；试剂消耗量 小，空白值低；消化容器密
2.3 电感耦合等离子体质谱法 电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）是一种用
于超灵敏的多元素分析和同位素测量的现代分析技 术，特别是在克服氩基离子干扰、提高灵敏度方面 提供了有效途径，ICP-MS 与各种在线分离技术的 联用已广泛应用在硒形态分析中，高分辨（或碰撞 室）MC-ICP-MS 能够获得表面电离质谱（TIMS）相 媲美的同位素丰度比测定结果，其灵敏度高、用样 量少、测量时间短[11]。于振花等采用微波消解-电 感耦合等离子体质谱对国家标准物质灌木枝叶和对 虾及国际标准物质角鲨肉和龙虾肝胰脏进行分析， 所得结果与其参考值吻合较好，硒元素的检出限为 0.18 μg·L－1，3 次测定的 RSD＜5%。对市场上的富 硒产品进行硒含量的检测，发现鸡蛋清中的硒含量 10.4 mg·kg－1，高于鸡蛋黄中的硒含量 7.4 mg·kg－1。 2.4 其他方法
[ 7 ] 王祥朴. 卫生学[M]. 北京: 人民卫生出版社, 1997.
４ ０ 饲料博览·技术版 2010 年第 8 期
疾病防治
家禽肠道健康和疾病控制
辜新贵1，王启军1，许小成2
（1. 武汉新华扬生物股份有限公司技术中心，武汉 430074；2. 湖北省宜昌市畜牧局， 湖北 宜昌 443000）
微波消解仪操作复 闭，材料和试剂无挥发损
杂，设备价格高 失，对环境污染小，节约能 源，易于自动化，样品制备 精密度高。
有效防止易挥发元素的损
高压消解法
设备费用高，不安全
失。
2010 年第 8 期 饲料博览·技术版 ３ ９
兴嘉技术园地
进行牛奶预处理时，必须根据硒的物理、化学 性质以及实验条件来选择合适的方法。另外，无论 采用何种处理方法，最好都要做空白和回收率实 验，以便在数据分析时做对照参考。 2 分析测定 2.1 荧光分析法
原子吸收光谱法是利用被测物质的基态原子选 择性吸收辐射光的性质进行定量分析。为了获得足 够的灵敏度，首先将待测物样品中的硒还原成挥发 性氧化物。使其与共存离子分离，这就消除了由于 分子吸收或光散射引起的非特征光线损失和某些共 存元素的干扰。谭力红等研究用火焰原子吸收分光 光度法间接地测定水中痕量硒，与直接法测定硒相 比，这种间接测定硒的方法有效地克服了直接法测 定硒过程中的干扰偏差，用该方法测定水样中的硒， 回 收 率 为 96% ～104% ， 检 出 限 为 0.038 μg·mL －1， RSD 为 3.8%[ 9 ]。李付江等用石墨炉原子吸收法测 定牛奶中的硒，以钯和镁为基体改进剂，加入 Triton X-100 改善样液的表面张力，使硒的灰化温 度提高到 1 400 ℃，可提高测定的可靠性[10]。对多 个牛奶样品测定，RSD＜10%，加标回收率为 94%～ 104% ， 精 密 度 和 准 确 度 均 较 好 ， 测 定 方 法 简 便 、 快捷。
摘 要：动物肠道健康关系着肠道的消化吸收能力，决定着健康养殖过程中的疾病控制。维护动物肠道健康 对减少疾病的发生具有十分重要的意义，文章阐述了损伤家禽肠道疾病的常见因素，肠道屏障的组成及酶制剂在 维护动物肠道完整性中的作用。
关键词：肠道健康；球虫病；坏死性肠炎；霉菌毒素；酶制剂 中图分类号：S816.75；S831.7 文献标志码：B 文章编号：1001－0084（2010）08－0041－04
球虫的流行面广，繁殖力强，对环境的抵抗力 强等是控制球虫的难点。以饲料厂为中心的球虫药 物防治体系在控制球虫病方面取得了显著的成绩， 但随着抗药性问题和药物残留问题的相继出现，通 过药物防治球虫病的局面受到了前所未有的挑战。 中大鸡群发生的慢性球虫病主要是由堆型和巨型艾 美耳球虫引起的，常引起鸡只腹泻，拉饲料便，皮 肤着色不良，饲料报酬低[ 1 ]。当鸡群发生球虫病 时，相关的内源酶活性降低，肠道内食物的滞留时 间延长，特别是急性球虫病[ 2 ]。因此球虫病发生时
在各种鸡病中，球虫病发生率最高占 1/5～1/6。 新鲜粪便中未孢子化的卵囊在外界适宜的条件下进 行孢子生殖，形成具有感染力的孢子化卵囊，鸡只 食入后释放出子孢子，子孢子侵入肠上皮细胞，经 裂殖子生殖形成许多裂殖子，裂殖子再生殖形成更 多的裂殖子，此阶段的裂殖子可破坏大量的黏膜组 织和毛细血管，造成大量失血，肠道上皮大量破坏 及继发感染使鸡只发生其他疾病，造成鸡只生长受 阻和死亡。
对于硒的测定方法，还有发射光谱法、色谱 法、中子活化分析法和化学发光淬灭法等。联用技 术将为人们对硒进行彻底地分析提供更方便、更快 速的分析方法，尤其是色谱与原子光谱、荧光光 谱、分光光度法和其他技术的联用。 3小结
当前牛奶中微量硒的检测工作仍存在着诸多困 难，因此在实际工作中，要根据样品的数量、性 质、含硒量以及其他对测定的特殊要求，选择合适 的分析方法。
度下冷冻保存[ 4 ]。 1.3 前处理
目前，检测硒含量的预处理方法有许多种，见 附表[ 5 ]。
附表 预处理方法优缺点比较
方法
优点
缺点
低温灰化法
所用试剂少，减少了操作过 程污染的可能性，空白值 低，对人体和环境不良影响 费时，繁琐；瓷坩埚 小；有机物分解速度快，可 吸附硒元素，造成结 减少硒的挥发；分解彻底， 果偏低。 操作简便，仪器设备简单， 一次可处理大量样品。
2010 年第 8 期 饲料博览·技术版 ４ １
Hale Waihona Puke Baidu
环境监测管理与技术, 2005, 17（3）: 35.
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随着家禽养殖业的集约化发展，新的病毒株、 抗药菌株、耐药虫株的不断出现，严重阻碍了养殖 业发展。除了考虑毒株进化等外界因素外，动物机 体健康也需要给予更多的关注，尤其是在提倡加快 生长速度，提高饲料利用率等养殖观念的发展中国 家，关注家禽的肠道健康成为成功养殖的核心。 1 肠道健康的重要性
动物肠道是动物机体与外界环境相通的主要场 所，一方面，分布的免疫细胞及肠相关性淋巴组织 分泌的 SIgA 等覆盖在肠上皮细胞表面，是抵抗力 的基础；另一方面，肠道本身也参与日粮营养成分 的代谢，这种代谢直接影响肠外组织器官对日粮营 养成分的利用。肠道时刻受到病原微生物、毒素和 其他有机物等有害物质的威胁，一旦饲养管理、应 激、营养等方面发生变化，胃肠道黏膜结构容易受 到损伤，导致肠道基本生理功能的紊乱，病原微生 物易突破物理屏障入侵宿主。
兴嘉技术园地
牛奶中硒含量测定方法的分析
兴嘉生物
吕战伟
（吉林农业大学 动物科学技术学院，长春 130118）
摘 要：硒是动物必需的一种重要微量元素，通过对奶样的采集、贮藏、前处理及分析方法的综述，对牛奶 中微量元素硒的测定方法进行了介绍。
关键词：牛奶；硒；测定 中图分类号：S816.72；S879.1 文献标志码：A 文章编号：1001－0084（2010）08－0039－02