抗精子抗体的产生及检测原理

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抗精子抗体的产生及检测原理

抗精子抗体(antispermatozoa antibody, AsAb)既可在男性又可在女性体内产生。

男性产生的主要机制是血睾屏障因疾病或创伤受损,使隐蔽的精子或其可溶性膜抗原溢出,刺激机体免疫系统产生抗精子自身抗体。抗精子抗体的产生可以抑制精子的活动和受精,造成男性不育。

女性产生的主要机制是正常生殖道中能降解精子抗原的酶系统缺陷,致使进入的精子抗原得以保持完整,而作为同种异体抗原刺激女性免疫系统产生抗精子抗体影响生育。

抗精子抗体按对精子的作用分为凝集性、制动性、和结合型三类。据这些特点设计了多种方法,目前常用的方法有:

1. 试管-玻片凝集试验测定抗精子抗体:

原理:精子悬液与待测血清在缓冲盐水中反应,待测血清中的AsAb与精子表面抗原结合,使精子出现头对头,尾对尾或头对尾的凝集现象。

2. 精子制动试验测定抗精子抗体:

原理:在补体存在的条件下,精子制动抗体与精子表面抗原反应,使补体火花,导致精子失去活动能力。

3. ELISA法测抗体:

原理:以特异性精子可溶性抗原包被反应板微孔,待测血清中如存在AsAb,则可与之结合,再加入酶标抗人IgG抗体和酶底物/色原溶液,出现呈色反应。呈色强度可反应AsAb的水平。

4. 间接免疫荧光法测定抗精子抗体:

原理:将正常人精子充分洗涤后,包被于载玻片上,依次加待测血清河异硫氰酸荧光素标记得抗人IgG、IgA、IgM多价或单价抗体,反应后洗涤,置荧光显微镜下观察。

5. 免疫珠试验测定抗精子抗体:

原理:免疫珠试验是WHO推荐用于检测精子表面IgG、IgA、IgM类抗精子抗体(直接免疫珠试验)或检测待测血清(精浆,宫颈粘液)中抗精子抗体(间接免疫珠试验)的一种方法。直接法是将待测精子悬液与包被有兔抗人Ig(总免疫球蛋白)或包被有抗人IgG、抗人IgA、抗人IgM的聚丙烯酰胺微珠悬液混合,如精子表面有抗精子抗体,则可粘附相应的免疫珠。包被有兔抗人Ig多价抗体的免疫珠可用于筛查试验,而包被有抗Ig不同类别糠秕的免疫珠则可用于精子表面抗体的分类。间接法是将待测血清与正常精子悬液和免疫珠悬液混合,如待测血清中有抗精子抗体,可与精子结合,精子即可黏附免疫珠。用包被的抗人总Ig或包被抗人IgG、IgA、IgM抗体的免疫珠试验,可达到待测血清中AsAb筛查和分类的目的。

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