口服重组鸡α干扰素对鸡新城疫病毒感染和疫苗免疫的影响
关于肿瘤免疫治疗疗效评价的思考
中国肿瘤生物治疗杂志 http ：//https://www.360docs.net/doc/d217655527.html, Chin J Cancer Biother ，Feb.2011，Vol.18，No.1 DOI ：10.3872/j.issn.1007?385X.2011.01.002 ·专家论坛· 关于肿瘤免疫治疗疗效评价的思考 任秀宝（天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科，天津300060） 任秀宝，教授、主任医师、博士研究生导师，现任天津医科大学附属肿瘤医院生物技术应用 研究中心副主任、生物治疗科主任、生物技术研究室主任，兼任中国免疫学会肿瘤免疫与生物 治疗分会副主任委员、中国医药生物技术协会临床应用专业委员会秘书长。2008年被评为天津市“131创新型人才”，2009年获国家人事部“新世纪百千万人才”称号。从事肿瘤生物治疗和内科治疗15年，在肿瘤临床治疗和基础研究方面都有很深的造诣，特别是在常规化疗的基础上将细胞免疫治疗、异基因造血干细胞移植免疫治疗、肿瘤疫苗治疗以及分子靶向药物治疗等现代生物治疗技术有机地结合在一起，以此为突破点逐步形成了个体化的肿瘤治疗模式。 主持和参与了国家级和省部级重点项目十余项，获得天津市科技进步奖、中华医学科技奖等多项科研成果奖。发表学术论文81篇，其中被SCI 收录论文共13篇。E?mail ：rwziyi@https://www.360docs.net/doc/d217655527.html, ［摘 要］ 肿瘤免疫治疗有着与传统治疗方式不同的作用机制和疗效表现形式，因此该治疗的疗效评估是否能沿用传统治疗的评估体系是值得思考的问题，其中主要包括以下三方面的问题：一是免疫反应评价是否应被列入免疫治疗疗效评价体系？二是免疫治疗疗效评价的时间点应如何确定？三是新型免疫治疗疗效评价体系应包括哪些主要评价指标？免疫治疗在肿瘤治疗中具有越来越重要的地位，因此，尽快建立科学的评价体系对于肿瘤免疫治疗的发展和临床应用具有重要意义。［关键词］ 肿瘤；免疫治疗；疗效评价 ［中图分类号］ R730.51 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007?385X （2010）01?07?04 Response criteria of tumor immunotherapy REN Xiu?bao （Department of Biotherapy ，Cancer Institute &Hospital of Tianjin Medical University ，Tianjin 300060，China ） ［基金项目］ 国家自然科学基金资助项目（No.30872986/H1611）。Project supported by the National Natural Science Foundation of China （No.30872986/H1611） ［网络出版］ 2011?01?25；http ：//https://www.360docs.net/doc/d217655527.html, /kcms /detail /31.1725.R.20110125.1124.035.html ［Abstract ］ Both the mechanisms and responses of tumor immunotherapy are different from those of the traditional thera?py.Therefore ，whether the traditional clinical response criteria are suitable for assessing the efficacy of immunotherapy is worth exploring.First ，whether the immune response should be included in the response criteria of immunotherapy ？Sec?ondly ，how to determine the time point for evaluating the efficacy of immunotherapy ？Thirdly ，which indices should be in?cluded for the new immune?related response criteria of tumor immunotherpay ？Immunotherapy is showing an increasingly important role in clinical therapy of tumor ，and it is of great significance to establish a scientific response criterion system for the development and clinical application of tumor immunotherapy. ［Key words ］ neoplasms ；immunotherapy ；response criteria ［Chin J Cancer Biother ，2011，18（1）：7?10］ 近年来，随着对机体免疫系统认识的不断深入以及生物技术的迅速发展，免疫治疗已成为肿瘤治疗的重要手段，并且在肿瘤综合治疗体系中占据着越来越重要的位置。但是，当肿瘤免疫治疗进入临床试验之后，仍然以传统的评价体系如WHO 或RECIST （response evaluation criteria in salid tumor ）标准去评价其疗效，导致最终不能确切地认识和评价其治疗效果，使部分进入Ⅲ期试验的免疫治疗项目宣告失败。免疫治疗在临床试验中遭遇的尴尬处 境，使得国内外学者开始反思，套用传统肿瘤治疗疗效评价体系去评价免疫治疗这一新兴肿瘤治疗方法是否具有合理性和可行性。 · 7·
神经体液免疫调节
神经体液调节加强练习 1、下面是与促胰液素发现过程有关的四个实验，有关分析错误的是 ( ) ①稀盐酸―→小肠肠腔―→胰腺分泌胰液 ②稀盐酸―→静脉血液―→胰液不分泌 ③稀盐酸―→小肠肠腔(去除神经)―→胰腺分泌胰液 ④小肠黏膜＋稀盐酸＋沙子――→研磨 制成提取液――→注入 静脉血液― →胰腺分泌胰液 A ．①与②、②与④对比说明胰液分泌不是稀盐酸直接作用的结果 B ．①与③对比说明胰液分泌不受神经的调节 C ．①②③④对比说明胰液分泌受小肠黏膜产生的物质(由血液运输)调节 D ．要证明胰液分泌受不受神经的调节应该再设计实验继续探究 2、如果某激素主要作用于机体内某器官的细胞，而对机体内其他器官的细胞影响不大，则该激素的特异性强。下列哪一组激素与靶细胞受体的特异性最弱 ( ) A ．促甲状腺激素释放激素和胰岛素 B ．促性腺激素和催乳激素 C ．甲状腺激素和胰岛素 D ．甲状腺激素和孕激素 3、下列生理活动与相关激素之间的关系不相符合的是 ( ) A ．摄入食物过咸，细胞外液渗透压升高，抗利尿激素分泌量增加 B ．人体内的激素与靶细胞能相互结合的原因是靶细胞膜上有受体蛋白 C ．在人体生长发育过程中，生长激素和甲状腺激素为协同作用，共同促进生长发育 D ．在寒冷条件下，甲状腺激素分泌量增加，肾上腺素分泌量减少 4、下列关于水盐平衡调节的叙述中，错误的是 ( ) A ．当人失水过多后，会在大脑皮层中的相关区域产生渴觉 B ．当给一内环境渗透压正常的人静脉注射抗利尿激素后，尿液明显减少 C ．渗透压感受器和水盐平衡调节中枢都在下丘脑中 D ．水盐平衡是神经—体液—免疫调节共同作用的结果 5、(2012·东城区模拟)现有一种含催产素的新药，它能使人们对陌生人产生信赖感。这一新药可能有助于治疗孤独症等疾病。催产素是由下丘脑合成、垂体后叶释放的一种九肽荷尔蒙。下列有关叙述正确的是 ( ) A ．催产素一定含有C 、H 、O 、N 四种元素，含有9个肽键 B ．孤独症患者直接口服适量催产素可以有效地缓解症状 C ．下丘脑中有些细胞不仅能分泌激素，而且能传导兴奋 D ．催产素参与的调节过程具有作用范围比较局限、作用时间比较长等特点 6、(2012·杭州模拟)右图是血糖调节的部分过程图解。甲、乙表 示器官，a 、b 表示相应激素。下列说法中正确的是 ( ) A ．器官甲、乙的名称分别是胰岛、肾上腺 B ．激素a 能够促进过程①，抑制过程② C ．激素b 是唯一能够升高血糖的激素 D ．激素b 的作用结果反过来会影响激素b 的分泌 7、(2012·临沂一模)“环境激素”是指在人类生产和生活过程中 产生的释放到环境中并持久存在的天然植物激素和人工合成的化学污染物，被称为21世纪的公
基因工程重组人干扰素概述(
根据来源、基因序列和氨基酸组成分类 I 型干扰素： IFNα、IFNβ、IFN τ、IFN ω 来源：白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等 功能：抗病毒感染、抗肿瘤生长 免疫调节(较弱） 其中IFN-α为多基因产物，有23种以上的亚型。 II 型干扰素：干扰素γ（IFN ) 来源：活化的T细胞和NK细胞产生 功能：免疫调节 提高单核巨噬细胞、树突状细胞的抗原提呈能力 增强Tc细胞和NK细胞的杀伤活性 抑制TH2细胞形成，下调体液免疫应答 趋化作用 抗病毒和抗肿瘤作用（次要）
2. 根据动物来源确定分类，例如人干扰素（HuIFN），小鼠干扰素（MuIFN）。 免疫调节作用表现在对宿主免疫细胞活性的影响，如对巨噬细胞、T细胞、B细胞和NK细胞等均有一定作用。 ●对巨噬细胞的作用：IFNγ可使巨噬细胞表面MHCⅡ类分子的表达 增加，增强其抗原递呈能力；此外还能增强巨噬细胞表面表达Fc 受体，促进巨噬细胞吞噬免疫复合物、抗体包被的病原体和肿瘤细胞。 ●对淋巴细胞的作用：干扰素对淋巴细胞的作用较为复杂，可受剂 量和时间等因素的影响而产生不同的效应。在抗原致敏之前使用大剂量干扰素或将干扰素与抗原同时投入会产生明显的免疫抑制作用；而低剂量干扰素或在抗原致敏之后加入干扰素则能产生免疫增强的效果。在适宜的条件下，IFNγ对B细胞和CD8+T细胞的分化有促进作用，但不能促进其增殖。IFNγ能增强TH1细胞的活性，增强细胞免疫功能；但对TH2细胞的增殖有抑制作用，因此抑制体液免疫功能。IFNγ不仅抑制TH2细胞产生IL-4，而且抑制IL-4对B细胞的作用，特别是抑制B细胞生成IgE。 ●对其它细胞的作用：IFNγ对其他细胞也有广泛影响：①刺激中性 粒细胞，增强其吞噬能力；②活化NK细胞，增强其细胞毒作用；
鸡新城疫临床诊断及治疗
鸡新城疫临床诊断及治疗 新城疫（ND）是危害养鸡业的最主要疾病之一。各种品种、性别、年龄的鸡都易感， 发病率和死亡率极高，常在90%以上。近年来，由于饲养管理水平的提高和ND免疫接种的普遍开展，ND暴发流行已很少见，但免疫鸡群发生非典型ND造成鸡只死亡或生产性能下 降的病例仍屡见不鲜。由于非典型ND缺乏特征性的临诊症状和病理变化，容易发生误诊，导致NDV得不到及时消除，ND难以扑灭，给养鸡生产带来更大的经济损失。 现将非典型ND的发病特点、病因及防制措施介绍如下： 1 发病特点 1.1 流行特点 主要发生在已免疫接种ND疫苗的鸡群，以二免20~35日龄和40~60日龄发病最为严重，成年鸡多发生在抗体滴度小于3log2的鸡群。发病率和死亡率不高，明显低于典型ND。 1.2 临诊症状 日龄小的鸡比日龄大的症状明显，但均比典型症状缓和。发病初期出现呼吸道症状， 病鸡呼吸困难，咳嗽气喘，气管有“呼噜”声响，口鼻炎性分泌物增多，病鸡不时甩头， 企图将渗出物排出，倒提病鸡常有酸臭味粘液从口中流出。咳嗽时，咳出浓痰，病重的甚 至咳出血痰，容易误诊为传染性喉气管炎。此时会有零星少量病鸡死亡，大部分病鸡经一 周左右病情好转，病程稍长者往往出现拉白色或淡绿色稀粪。慢性经过的多数有神经症状，表现为运动失调或转圈，有的呈头向后仰嘴向上的观星状姿势。成年鸡症状不明显，产蛋 鸡主要表现为产蛋量急剧下降，产蛋高峰上不去，蛋壳颜色变浅，软壳蛋、薄壳蛋和畸形 蛋较平常明显增多，个别鸡出现拉稀，极易误诊为减蛋综合征。 1.3 病理变化 剖检无明显的病理变化，很少见到腺胃乳头出血、肠粘膜出血及溃疡等特征性病变。 部分病鸡喉头、气管有粘液，气囊混浊并有干酪样渗出物，肠道出血较少，盲肠扁桃体肿大、出血以及泄殖腔粘膜有出血点等。产蛋鸡输卵管粘膜充血或出血，卵巢变软，有的卵 黄呈半煮熟状。 2 发病原因 2.1 鸡场受病毒污染，病毒毒力增强 在我国，大、中、小型鸡场集约化饲养与广大农户散养鸡群并存，饲养管理和防疫水 平参差不齐。许多大、中型养鸡场防疫制度较严格，对发病鸡和死亡鸡只处理适当。而小 型养鸡场和个体养鸡户往往任意出售病鸡，到处乱扔死鸡，造成病原的人为传播。NDV能 随空气、带病毒野鸟广泛传播，有调查表明，我国商品鸡群中普遍存在ND强病毒。NDV污
干扰素
干扰素抗病毒研究进展 摘要: 干扰素（IFN）是一种广谱感病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒，而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白，从而抑制乙肝病毒的复制；同时还可增强自然杀伤细胞（NK细胞）、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力，从而起到免疫调节作用，并增强抗病毒能力干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质（主要是糖蛋白），是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等多种生物活性 IFN具有毒副作用小，高剂量仅有一般生物制剂的常见反应，抗原性弱，可反复应用等优点。随着IFN基因工程产品在临床上的推广应用，将大大提高病毒性疾病的治疗效果，具有广阔的应用。 关键词：干扰素；抗病毒活性；抗肿瘤免疫;生物学特性； 1 干扰素的分类和生物学活性 IFN蛋白家族基于它们的基因序列、染色体定位和受体特异性[2]分为3型，即Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干扰素，Ⅰ型包括IFN-α、β、ω、ε、κ [3]、δ、τ、δ[4]等，但IFN-δ、τ、δ只在猪、牛、反刍动物和鼠体内检测到，在哺乳动物中IFN-α/β是多基因家族，IFN-α包括25个以上的亚型[5]。Ⅱ型干扰素由单基因家族IFN-γ构成，又称为免疫干扰素。Ⅲ型干扰素是一种新发现的细胞因子，与Ⅰ型干扰素关系密切，称为IFN-λ[6-7]，研究认为Ⅲ型干扰素有特殊的生理学功能[8]。干扰素本身并非直接抗病毒物质，其抗病毒作用体现在多方面。IFN对于病毒复制的任何阶段都具有靶向作用，包括穿入、转录、RNA稳定性、翻译起始、成熟、装配和释放过程。 2 干扰素的研究意义
近年来，国际反病毒和抗癌研究领域，在自然免疫调节和抗病毒物质，作为一种天然抗病毒蛋白质干扰素人类开发更多的关注。干扰素将成为一个21世纪的反病毒，防癌，其中最广泛使用的药物之一。α-干扰素治疗慢性乙型肝炎是目前抗病毒药物的第一选择是，对肝炎的药物治疗总有效率约为20％-30％。慢性肝炎的药物干扰素代表发展方向。它是唯一的C型肝炎病毒的药物有效的治疗，它是最广泛的肿瘤细胞因子的临床治疗。病毒性皮肤病，慢性宫颈炎，呼吸道病毒感染和妇科疾病，丘疹皮疹，造血系统恶性肿瘤，淋巴瘤，其主要标志。β-干扰素治疗多发性硬化症复发静脉使用。主要γ-干扰素治疗类风湿关节炎。γ-干扰素的免疫功能比α，β-干扰素强1000倍，不仅能增强机体免疫功能，自身免疫性疾病，还可以调整过渡到接近正常水平的免疫力。干扰素还用于生殖器衣原体感染，膀胱癌，生殖器疣，皮肤疾病，血液病，艾滋病相关综合征的治疗。世界上许多国家已批准生产和使用基因重组干扰素制剂为许多疾病的治疗。治疗后的临床应用表明，通常不严重的副作用，干扰素治疗，临床适应症正在不断发展扩大了干扰素的新用途 3.干扰素的生物学特性 研究表明，IFN生物学活性的发挥有赖于诱导的多种效应蛋白质的合成，其并不直接作为反应作用因子对其效应分子的基因组进行调控，而是通过受体介导的信号转导系统引发一系列特定的生化反应，最终达到效应分子表达的目的，而且IFN具有很强的活性，其活性呈多样性。 3.1抗病毒作用 IFN 、IFN—B、IFN 均有抗病毒作用一。动物试验证明，抗病毒活性远较I型低，和IFN—p能相互加强抗病毒作用。干扰素抗病毒具有广谱性，但它对细胞抗病毒作用是间接的，而且是非特异性的。当干扰素与细胞表面的干扰素受体 结合后，可诱导细胞内产生有酶活性的抗病毒蛋白(AndviralProtein，AVP)。已知的AVP至少有三种：蛋白激酶，磷酸二脂酶和2～5腺酸合成酶，前两种能破坏
注射用重组人干扰素2b说明书
注射用重组人干扰素α 2b 说明书请仔细阅读说明书并在医师指导下使用警示语：1.对重组人干扰素α 2b 或该制剂的任何成份有过敏史者禁用。2.患有严重心脏疾病者禁用\。3.严重的肝、肾或骨髓功能不正常者禁用。4.癫痫及中枢神经系统功能损伤者禁用。5.有其他严重疾病不能耐受本品者，不宜使用。[药品名称]通用名称：注射用重组人干扰素α 2b 商品名称：利分能英文名称：Recombinant Human Interferon α 2b for Injection 汉语拼音：Zhusheyong Chongzu Ren Ganraosu α 2b [成份]主要成份为重组人干扰素α 2b，由高效表达人干扰素α 2b 基因的腐生型假单孢菌，经发酵、分离和高度纯化制成。辅料为人血白蛋白、甘露醇、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。[性状]应为白色薄壳状疏松体，加入标示量注射用水后应迅速复溶为澄明液体。[适应症]1.用于治疗某些病毒性疾病，如急慢性病毒性肝炎、带状疱疹、尖锐湿疣。 2.用于治疗某些肿瘤，如毛细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、多发性骨髓瘤、非何杰金氏淋巴瘤、恶性黑色素瘤、肾细胞癌、喉乳头状瘤、卡波氏肉瘤、卵巢癌、基底细胞癌、表面膀胱癌等。[规格]3×106IU/支，复溶后体积1.0 毫升。[用法用量]本品可以肌肉注射、皮下注射和病灶注射。 1.慢性乙型肝炎：皮下或肌肉注射，3—6×106IU/日，连用四周后改为3 次/周，连用16 周以上。2.急慢性丙型肝炎：皮下或肌肉注射，3—6×106IU/日，连用四周后改为 3 次/周，连用16 周以上。 3.丁型肝炎：皮下或肌肉注射，4—5×106IU/日，连用四周后改为3 次/周，连用16 周以上。4.带状疱疹：肌肉注射，1×106IU/日，连用6 天，同时口服无环鸟苷。5.尖锐湿疣：可单独应用，肌肉注射，1—3×106IU/日，连用四周。也可与激光或电灼等合用，一般采用疣体基底部注射，1×106IU/次。6.毛细胞白血病：2—8×106IU/m2/天，连用至少3 个月。7.慢性粒细胞白血病：3—5×106IU/m2/天，肌肉注射。可与化疗药物羟基脲、Ara—c 等合用。8.多发性骨髓瘤：作为诱导或维持治疗，3—5×106IU/m2，肌肉注射，3 次/周，并与VMCP 等化疗方案合用。9.非何杰金氏淋巴瘤：作为诱导或维持治疗，3—5×106IU/m2，肌肉注射，3 次/周，并与CHVP 等化疗方案合用。10.恶性黑色素瘤：6×106IU，肌肉注射，3 次/周，与化疗药物合用。11.肾细胞癌：6×106IU，肌肉注射，3 次/周，与化疗药物合用。12.喉乳头状瘤：3×106IU/m2，肌肉注射或皮下注射，每周3 次（隔日1 次）。13.卡波氏肉瘤：50×106IU/m2/天，连续5 天，每次静脉滴注30 分钟。至少间隔9 天再进行下一个5 天的治疗期。14.基底细胞癌：5×106IU，瘤灶内注射，3 次/周，3 周。15.卵巢癌：5—8×106IU，肌肉注射，3 次/周，与化疗药物合用。[不良反应]使用本品常见有发烧、头痛、寒战、乏力、肌痛、关节痛等症状，常出现在用药的第一周，不良反应多在注射48 小时后消失。如遇严重不良反应，须修改治疗方案或停止用药。一旦发生过敏反应，应立即停止用药。少数病人还可出现白细胞减少、血小板减少等血象异常，停药后即可恢复正常。偶见有厌食、恶心、腹泻、呕吐、脱发、高（或低）血压、神经系统紊乱等不良反应。[禁忌]1.对重组人干扰素α 2b 或该制剂的任何成份有过敏史者。2.患有严重心脏疾病者。3.严重的肝、肾或骨髓功能不正常者。4.癫痫及中枢神经系统功能损伤者。5.有其他严重疾病不能耐受本品者，不宜使用。[注意事项]1.本品冻干制剂为白色疏松体，溶解后为无色透明液体，如遇有浑浊、沉淀等异常现象，则不得使用。包装瓶有损坏、过期失效不能使用。2.以注射用水溶解时应沿瓶壁注入，以免产生气泡，溶解后宜于当日用完，不得放置保存。[孕妇及哺乳期妇女用药]孕妇用药经验有限，孕期内安全使用本品的方法尚未建立，因此，给孕妇注射，须在病情十分需要，并由临床医生仔细斟酌后确定。[儿童用药]儿童用药经验仍有限，对此类病例应小心权衡利弊后遵医嘱用药。[老年用药]对有心脏病的老年患者，老年癌症晚期患者，在接受本剂治疗前及治疗期中都应做心电图检查，遵医嘱做剂量调整或停止用本品。[药物相互作用]干扰素可能会改变某些酶的活性，尤其可减低细胞色素酶P450 的活性，因此西咪替丁、华法令、茶碱、安定、心得安等药物代谢受到影响。在与具有中枢作用的药物合并使用时，会产生相互作用。[药物过量]尚未有药物过量的报告，但大剂量应用时，
神经、体液、免疫调节试题
神经、体液、免疫调节试题 一、单项选择题 1.一般情况下，有抗原免疫机体，血清中抗体浓度会发生相应变化。如果第二次免疫与第一次免疫所用的抗原相同且剂量相等，下列四图中能正确表示血清中抗体浓度变化的是（） 2.下列关于人体生命活动调节的叙述，不正确的是() A．血糖浓度过高时，会使胰岛B细胞的分泌活动增强 B．当人处于寒冷环境中时，温觉感受器产生兴奋 C．神经纤维膜内局部电流的方向与兴奋传导方向一致 D．下丘脑通过垂体控制性腺的生长发育 3.下图中曲线显示了两种使人体获得免疫力的方法。据此判断下列说法正确的是D A．当一个人被狗咬伤时，可能会感染狂犬病病毒，此时采用方法②进行免疫比较好 B．采用方法①可以使人获得比方法②更持久的免疫力 C．采用方法②使人体获得抗体的过程叫细胞免疫 D．医学上一般采用方法②进行免疫预防 4.某种病菌感染人体并侵入细胞内后，机体可以对该靶细胞产生免疫反应，其中有 A、效应B细胞接触靶细胞，导致胞细胞裂解，从而使病菌抗原被白细胞介素消灭 B、效应B细胞接触靶细胞，导致胞细胞裂解，从而使病菌抗原被抗体消灭
C、效应T细胞接触靶细胞，导致胞细胞裂解，从而使病菌抗原被外毒素消灭 D、效应T细胞接触靶细胞，导致胞细胞裂解，从而使病菌抗原被抗体消灭 5.人体受到某种抗原刺激后会产生记忆细胞，当其受到同种抗原的第二次刺激后 A．记忆细胞的细胞周期持续时间变短，机体抗体浓度增加 B．记忆细胞的细胞周期持续时间变长，机体抗体浓度增加 C．记忆细胞的细胞周期持续时间变短，机体抗体浓度减少 D．记忆细胞的细胞周期持续时间不变，机体抗体浓度减少 6.能够识别抗原的细胞或物质是() ①吞噬细胞②T细胞③B细胞④记忆细胞⑤浆细胞⑥效应T细胞⑦抗体⑧干扰素 A．①②③④⑦B．①②③④⑥⑦ C．②④⑤⑥⑦D．①②③④⑤⑥⑧ 7.下列各项中，与效应T细胞的形成有关的一组是() A．造血干细胞、胸腺、T细胞、B细胞、抗体和抗原 B．造血干细胞、吞噬细胞、宿主细胞、T细胞、记忆细胞和抗原 C．造血干细胞、胸腺、T细胞、B细胞、记忆细胞和抗体 D．造血干细胞、胸腺、吞噬细胞、T细胞、记忆细胞和抗原 8.下列关于细胞免疫的叙述错误的是() A．它与体液免疫各自有其独特的作用，又可以相互配合，缺一不可 B．效应T细胞产生的淋巴因子能特异性地与抗原结合，杀灭抗原 C．进行细胞免疫时，抗原也需经吞噬细胞的吞噬和处理 D．记忆T细胞接受同一种抗原再次刺激时，会迅速增殖分化成效应T细胞 9.下图为人体甲状腺激素分泌调节的示意图，下列叙述中错误的是() A．甲状腺机能亢进患者激素③分泌过多 B．缺碘时激素①和②浓度都高于正常水平 C．图中共有3处箭头表示反馈调节 D．垂体还能分泌与激素③有相似生理效应的激素
重组干扰素的生产 (2)
题目浅析重组干扰素的生产 姓名杨胜德学号11113173 专业生物工程学院微生物 指导教师鞠守勇 二零一二年十一月
目录 摘要﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍3 关键词﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍3 Abstract﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍3 Key words﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍3 前言﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍4 1.基因工程菌的构建﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍4 1．1目的基因的获取﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍4 1．1.1干扰素mRNA的获取﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍4 1．1.2 cDNA的合成﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍4 1．1.3 cDNA第二链的合成﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍5 1．2 大肠杆菌质粒的获取﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍5 1．3重组质粒的获取﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍5 1．3.1重组质粒的合成﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍5 1．3.2 重组DNA的转化﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍5 1．3.3重组体的筛选与鉴定﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍5 2.目的基因的表达﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍5 3.产物的提取与纯化﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍5 4.质量控制和要求﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍6 4.1半成品检定﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍6 4.2成品检定﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍6 5.参考文献﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍7 6.致谢﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍8
鸡新城疫的诊断与防治
鸡新城疫的诊断与防治 鸡新城疫(New castle Disease)又称亚洲鸡瘟，是由新城疫病毒(New castle Disease Vires，NDV)引起的一种急性、烈性传染病。除鸡可发病外，其它家禽和许多野禽也可发病，水禽和海鸟通常抵抗力强，呈隐性感染。国际兽医局(OIE)将其列为A类传染病。随着我国养鸡业的高速发展，新城疫在鸡群中的流行特点和发病情况已发生了很大的变化。 1流行病学 本病以鸡感受性最高，其他易感动物包括鸽子、火鸡、珍珠鸡、鸭、鹅等，水禽、野生鸟如野鸡、麻雀和观赏鸟也易感染此病。主要传染源是带毒禽和病禽，经消化道和呼吸道感染。病毒存在于病鸡的所有组织器官、体液、分泌物和排泄物中。轻症病鸡和临床健康的带毒鸡，是危险的传染源。当鸡抵抗力低时，可使鸡群80％以上的鸡感染发病，90％以上的病鸡死亡或淘汰。本病一年四季均可发病，但以春秋两季居多。新城疫病毒的抵抗力不强，容易被消毒药、日光及高温杀死。在室温或高温条件下存活期较短，在阴冷、潮湿的环境中，病毒可以长时间生存。常用的消毒药，如l％～2％甲醛、2％烧碱、3％石炭酸溶液、l％臭氧水和l％来苏儿等，均可于几分钟至20min内将其杀死；加热至80℃，经5min即可致死，但在30℃环境下能存活数月。 2 临床症状 自然感染的潜伏期一般为3~5d，人工感染2-5d。根据临床表现和病程长短，可分为最急性、急性、亚急性或陛3种类型。 2.1最急型 突然发病，常无特征病状，突然死亡，多见于流行初期和雏鸡。 2.2急性型 病初体温高达43℃—44℃，突然减食或不食，鸡冠和肉垂呈深红色或紫黑色，精神萎顿，离群呆立，整天缩颈或翅膀下垂，腹泻，粪便呈黄绿色或黄白色，有时混有血液，病鸡口、鼻、咽、喉头积聚大量粘液，摇头，张口呼吸，发出咯咯的喘
干扰素基础知识
干扰素基础知识
干扰素 干扰素（IFN）是一种广谱抗病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒，而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白，从而抑制乙肝病毒的复制；同时还可增强自然杀伤细胞（NK细胞）、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力，从而起到免疫调节作用，并增强抗病毒能力。干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质（主要是糖蛋白），是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。 目录： 一、干扰素 二、干扰素简介 三、干扰素多少钱 四、发现 五、什么叫干扰素（IFN） 六、品种及价位 七、作用机制 ①间接性 ②广谱性 ③种属特异性 ④发挥作用迅速 八、分类 九、干扰素制剂如何分类 十、临床上常用的干扰素有哪些制剂
1自然干扰素 2人体白细胞重组干扰素 3复合干扰素 十一、干扰素适应症 十二、干扰素有哪些不良反应 十三、如何应对干扰素的不良反应 十四、干扰素研究、应用历程 十五、病毒的克星——干扰素 十六、哪些人不宜使用干扰素治疗 十七、什么是长效干扰素 十八、普通干扰素和长效干扰素的区别 十九、干扰素治疗的禁忌证 二十、用途及用法 二十一、干扰素治疗乙肝效果 一、干扰素 药物类别：抗肿瘤药，抗病毒药；所属类别：生物反应调节剂药物名称：干扰素英文名称：Interferon 药物别名：序号中文别名英文别名 一．α干扰素 制剂/规格：序号制剂规格 1．注射剂5×10。单位（1 ml）；1×106。单位（1 ml）； 2．冻干剂l×10。单位
成份/化学结构：序号成份化学结构 药理作用：1.抗病毒作用：其抗病毒活性不是杀灭而是抑制病毒，它一般为广谱病毒抑制剂，对RNA和DNA病毒都有抑制作用。当病毒感染的恢复期可见干扰素的存在，另一方面用外源性干扰素亦可缓解感染。 2．抑制细胞增殖干扰素抑制细胞分裂的活性有明显的选择性，对肿瘤细胞的活性比正常细胞大500～1000倍。干扰素抗肿瘤效果可以是直接抑制肿瘤细胞增殖，或通过宿主机体的免疫防御机制限制肿瘤的生长。 3．诱导细胞凋亡：干扰素可以诱导肿瘤细胞凋亡，从而杀灭肿瘤细胞。 4.干扰素对体液免疫、细胞免疫均有免疫调节作用，对巨噬细胞及NK细胞也有一定的免疫增强作用。 药动学：干扰素在肌内注射或皮下注射后入血的速度较慢，需较长时间才能在血中测到。肌内注射后Tmax为5～8小时。一次肌注：106单位，血清浓度为100单位/ml，这比在病毒感染时自然产生的干扰素量为高。循环中的干扰素半衰期为2～4小时。只有少量干扰素能进入血脑屏障，脑脊液内的浓度约为血内浓度的l/30，只有在兔身上研究过排泄，排出量只有0.2%～2.0%。 适应症：1.用于多种恶性肿瘤，包括毛细胞白血病、慢性白血病、非何淋巴瘤、骨髓瘤、膀胱癌、卵巢癌、晚期转移性肾癌及胰腺恶性内分泌肿瘤、黑色素瘤和Kaposi 肉瘤等。 2．与其他抗肿瘤药物并用。 3．作为放疗、化疗及手术的辅助治疗剂。 4．病毒性疾病的防治。 用法用量：
注射用重组人干扰素α2b(假单胞菌)
注射用重组人干扰素α2b（假单胞菌）Zhusheyong Chongzu Ren Ganraosu α2b (Jiadanbaojun) Recombinant Human Interferon α2b for Injection （P.putida） 本品系由高效表达人干扰素α2b基因的腐生型假单胞菌，经发酵、分离和高度纯化后冻干制成。含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。 1基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2制造 2．1工程菌菌种 2．1．1名称及来源 重组人干扰素α2b工程菌株系由带有人干扰素α2b基因的重组质粒转化的腐生型假单胞菌菌株(Pseudomonas putida VG-4)。 2．1．2种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2．1．3菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2．1．3．1划种LB琼脂平板 应呈典型腐生型假单胞菌集落形态，无其他杂菌生长。 2．1．3．2染色镜检 棒状，可运动，有荚膜，无芽孢。涂片染色后应呈典型的革兰阴性。 2．1．3．3对抗生素的抗性 应与原始菌种相符：硫酸链霉素150μg/ml，盐酸四环素50μg/ml和氨苄西林100μg/ml。 2．1．3．4电镜检查（工作种子批可免做） 应为典型腐生型假单胞菌形态，无支原体、病毒样颗粒及其他微生物污染。 2．1．3．5生化反应 不液化明胶，不水解淀粉和聚β-羟基丁酸酯（附录ⅪⅤ），不能利用反硝化作用进行厌氧呼吸，能够合成荧光色素。 2．1．3．6干扰素表达量 在摇床中培养，应不低于原始菌种的表达量（1.0×109IU/L）。 2．1．3．7表达的干扰素型别 应用抗α2b型干扰素参考血清做中和试验，证明型别无误。 2．1．3．8质粒检查 该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒相符。 2.1. 3.9 目的基因核苷酸序列检查 目的基因核苷酸序列应与理论值相符。 2．2原液 2．2．1种子液制备
中药治疗小儿EB病毒感染的疗效评价及免疫干预的研究
中药治疗小儿EB病毒感染的疗效评价及免疫干预的研究 目的探讨中药治疗EB病毒感染的疗效和免疫干预效果。方法选取2012年10月～2014年10月我院收治的EB病毒感染患儿74例作为研究对象，根据患儿的治疗意愿分为观察组和对照组，各37例。观察组患儿给予中药治疗，对照组患儿给予西药治疗。结果观察组患者治疗有效率、IgG、IgM、IgA等免疫功能指标以及退热时间、咽充血持续时间、扁桃体肿大持续时间均明显优于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在对EB病毒感染患儿实施治疗的过程中，中药治疗的运用可以提高治疗有效率，改善患儿各项免疫功能指标，缩短患儿各症状持续时间，具有显著的疗效，值得临床应用。 标签：中药治疗；西药治疗；EB病毒感染；免疫干预 EB病毒属于γ-疱疹病毒家族，在人群中广泛的存在，与大多数人建立了终身潜伏的状态，与鼻咽癌的发生有着密切的关系。而小儿EB病毒感染是我国临床上较为常见的一种小儿疾病，可能导致传染性单核细胞增多症的发生，如果不能得到及时有效的治疗会导致恶性疾病的发生，并影响患儿的自身免疫性情况，我国临床上在对这一疾病患儿实施治疗的过程中常用的方法有抗病毒治疗和免疫调节治疗等，但是疗效并不明显，因此应该对更好的治疗方法和药物进行探讨和分析[1-2]。本文选取我院收治的EB病毒感染患儿74例作为研究对象，对中药治疗EB病毒感染的疗效和免疫干预效果进行探讨和分析，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2012年10月～2014年10月我院收治的EB病毒感染患儿74例作为研究对象，其中男39例，女35例，年龄1～15岁，平均年龄5.68岁，病程9～28天，平均病程16.9天，所有患儿均符合EBV感染的中医辨证分型标准以及西医的诊断标准，根据患儿的治疗意愿分为观察组和对照组，各37例。两组患儿在性别、年龄以及病程等一般情况比较，差异无统计学意义（P>0.05）。 1.2 方法 观察组患者给予中药治疗，药方为：鲜芦根15 g、连翘10 g、薄荷6 g、生石膏15 g、银花10 g、柴胡 10 g、丹皮10 g、黄芩6 g、夏枯草10 g、薏苡仁15 g、青蒿10 g、栝蒌15 g、僵蚕10 g、焦山楂10 g、丹参10 g、炒栀子6 g，可根据患儿治疗阶段不同调整药物，1剂/d， 2次/d，用水煎服，体重20 kg者，200 ml/次。
神经体液调节关系、免疫调节练习题(详解)
神经体液免疫调节 1、与激素调节相比，高等动物神经调节的特点是 （ ） ①调节速度快 ②调节速度慢 ③作用的范围广泛 ④作用的部位准确 ⑤作用的时间短暂 ⑥作用的时间比较长 A ．①③⑤ B ．②④⑥ C ．①③⑥ D ．①④⑤ 2、决定反射时间长短的主要因素是（ ） A ．刺激强度的大小 B ．感受器的兴奋性 C ．中枢突触数目的多少 D ．效应器的兴奋性 3、下列关于人体体温调节的叙述，正确的是 ( ) A ．温觉感受器只分布在皮肤 B ．体表温度一定与体内温度相同 C ．人体热量的来源主要是细胞中有机物的氧化分解 D ．人体散热主要通过体液调节实现 4、天气变冷时，维持体温所散失的热能增多，人体内下列哪些腺体的分泌量会增多( ) ①垂体 ②甲状腺 ③胰岛 ④肾上腺 ⑤卵巢 A ．①②③ B. ①②④ C ．②④ D. ③④ 5．下列关于抗利尿素分泌的叙述中，正确的是( ) A ． 喝水多，抗利尿素分泌多 B.喝水少，抗利尿素分泌多 C. 喝水少，抗利尿激素分泌少 D.出汗多，抗利尿素分泌少 6、有三只生存状况一致的小狗，分别切除它们的下丘脑、甲状腺、垂体，然后检测促甲状腺激素释放激素、促甲状腺激素和甲状腺激素的含量变化，结果如下表所示： 促甲状腺激素释放激素 促甲状腺激素 甲状腺激素 甲 － － － 乙 ＋ － － 丙 ＋ ＋ － 注：“＋”代表增加，“－”代表减少 则甲、乙、丙三只小狗被切除的器官分别是 ( ) A ．垂体、下丘脑、甲状腺 B ．垂体、甲状腺、下丘脑 C ．甲状腺、垂体、下丘脑 D ．下丘脑、垂体、甲状腺 7．如图为人体内体温与水平衡调节的示意图，有关叙述不正确的是（ ） A.当受到寒冷刺激时，a 、b 、c 激素的分泌均会增加 B.c 激素分泌增多，可促进骨骼肌与内脏代谢活动增强，产热量增加 C.下丘脑有体温调节中枢 D.在调节水平衡过程中，下丘脑只有合成、释放d 激素的作用 8.下面关于下丘脑功能的叙述中，正确的是（ ） ①大量出汗后，下丘脑分泌的抗利尿激素增加 ②寒冷刺激使下丘脑分泌促甲状腺激素，促进甲状腺的分泌活动来调节体温 ③下丘脑是体温调节的高级中枢，在下丘脑产生冷觉和热觉 ④血糖浓度低时，下丘脑通过有关神经的作用，促进胰岛A 细胞的分泌活动 ⑤内环境渗透压的升高，使下丘脑某部位产生的神经冲动传至大脑皮层产生渴觉 A.①②③ B.②③④ C.②④⑤ D.①④⑤ 9下列叙述，错误的是（ ） A.血液中甲状腺激素增加时会促进垂体分泌促甲状腺激素 B.血浆渗透压的大小主要取决于血浆中无机盐和蛋白质的含量 C.内分泌腺分泌的激素释放到内环境中，然后作用于靶细胞 D.淋巴中的淋巴细胞可以通过淋巴循环由锁骨下静脉汇入血液 10.人体血液中各种激素的含量能够维持在一个相对恒定的正常水平上，这是通过下列哪项实现的 ( ) A.激素间的协同作用 B.激素间的拮抗作用 C.神经---体液调节 D.反馈调节 11．下列各项中属于特异性免疫的是 A ．皮肤表皮细胞排列紧密 B ．呼吸道粘膜分泌粘液 C ．吞噬细胞的吞噬作用 D ．感冒病毒刺激人体产生抗体 12．由造血干细胞在骨髓中直接发育成的淋巴细胞是 A ．T 细胞 B ．B 细胞 C ．效应T 细胞 D ．效应B 细胞 13．流感是一种由流感病毒引起的常见病。有人注射了一种流感疫苗后，在流感流行期间未患流感，但流感再次流行时，却患了流感。下列说法错误的是 （ ） A ．流感病毒可能发生了突变 B ．抗体在体内存留的时间短 C ．流行的流感病毒与注射的流感疫苗可能不是同种类型 D ．流感病毒使人的免疫系统受损 14．受抗原刺激后的淋巴细胞 （ ） A ．细胞周期变长，核糖体活动增加 B ．细胞周期变长，核糖体活动减弱 C ．细胞周期变短，核糖体活动减弱 D ．细胞周期变短，核糖体活动增加 15．关于对抗体的描述中，错误的是 A ．属于免疫球蛋白 B ．受抗原刺激后产生的 C ．主要分布在血清中 D ．其参与的免疫是细胞免疫 16．参与过敏反应的是： A ．抗体 B ．淋巴因子 C ．效应T 细胞 D ．干扰素 17．自身免疫病产生的原因： A ．人体免疫系统对病原菌的免疫反应 B ．人体免疫系统对过敏原的反应
干扰素的研究进展
干扰素的研究进展 摘要：干扰素是细胞和机体受到病毒感染, 或者受核酸、细菌内毒素和促细胞分裂素等作用后, 由受体细胞分泌的一种广谱抗病毒糖蛋白。它具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等活性的细胞，能通过多种机制影响肿瘤细胞功能，促进免疫细胞的活性。近半个世纪以来, IFN 一直是病毒学、细胞学、分子生物学、临床医学、免疫学和肿瘤学等相关领域的研究热点。干扰素基因序列研究结果表明, 该序列早在5亿-10亿年前就存在于生命细胞的基因序列中, 是生物体内一种古老的保护因子。 关键词：干扰素；基本性质；作用机制 干扰素是在用灭活的病毒处理鸡胚以后发现的, 即灭活的病毒可以诱导干扰素的产生。能够诱生干扰素的物质很多, 一般称他们为干扰素诱生剂,主要包括:(1)活病毒、灭活的病毒及其产物, 如双链RNA；(2)其他病原微生物及其产物, 如细菌和细菌脂多糖；(3)有丝分裂原等；(4)特异性免疫诱导剂。第一类物质诱生干扰素最有效,后两种主要诱生II型干扰素,即IFN-γ。 IFN-α和IFN-ω主要由白细胞产生,IFN-B主要由成纤维细胞产生,尽管在适宜的诱导情况下,大部分的人类细胞都能够产生这几种干扰素。而IFN-γ主要由活化的T 细胞产生。α、β、ω和γ等几种干扰素主要由诱生剂诱导产生。IFN-κ在静息状态下表皮角化细胞和先天性免疫系统的细胞(如单核细胞和树突状细胞)中有表达, IFN-γ、IFN-β、病毒与双链RNA 诱导会使IFN-κ表达显著增强[1]。IFN-κ表达的这些特点是和角化细胞的防御功能相适应的。IFN-τ不能被病毒等诱生剂诱生, 仅仅在怀孕早期的一个特定时间由滋养层细胞表达, 它们的主 要功能是为怀孕的完成做准备[2,3]。Lin it in主要在骨髓、肾脏表达, 也不需要诱导, 主要活性是抑制淋巴系细胞的生成, 对骨髓系细胞和红细胞前体则没有抑制作用[4]。IFN-K在正常的血液、脑、胰腺等不同的组织中都有低水平的表达, 也可以被病毒或者干扰素等诱导表达[5,6]，。
重组人干扰素α-2b
重组人干扰素α-2b生产工艺设计 (赵杨杨，河南城建学院，平顶山，4567000) 摘要：重组人干扰素α-2b(rIFN 2b)是一种广谱抗病毒、抗肿瘤和调节机体免疫功能的药物。干扰素是病毒进入机体后诱导宿主细胞产生的反应物，它从细胞释放后可促使其他细 胞抵抗病毒的感染，干扰素增强免疫功能的机理是：调节机体的免疫监视，防御和稳 定功能，使杀伤(NK)细胞、Tc细胞的细胞毒杀伤作用增强；使吞噬细胞的活力增强； 诱导外周血液中单核细胞活性；增加或诱导细胞表皮主要组织相容复合物抗原的表达。临床用于治疗多发性骨髓病，后天免疫缺损症(AIDS)病人所患的卡波济肉瘤、恶性黑 色素瘤、毛状细胞白血病及慢性活动性乙型肝炎。 关键词：重组人干扰素α-2b、菌种构建、分离、纯化、检测 1.基因工程假单胞杆菌菌种的建立 1.1干扰素基因的克隆 从感染新城疫病毒的人血红白细胞中分离干扰素α-2b基因的mRNA，由逆转录酶将Poly（A）RNA反转录形成cRNA第一链。再由DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段催化聚合形成cDNA第二条链。在dCTP存在的条件下，利用末端转移酶给cDNA加Poly（dC)尾，连接到质粒pBR322上。转化到大肠杆菌感受态细胞中，并用氨苄青霉素和四环素筛选抗性克隆，获得编码人干扰素α-2b的基因序列。 1.2干扰素表达载体的构建 把干扰素基因与宿主载体pAYC37连接，筛选出序列正确的表达载体pVG。将表达载体导入假单胞杆菌中，筛选得到干扰素工程菌，表达重组人干扰素-α-2b不低于2.0×109IU/L，并具有氨苄青霉素、四环素和链霉素的抗性。 2.重组人干扰素α-2b发酵与纯化 2.1重组人干扰素α-2b工程菌的发酵 取菌种1ml接种于100ml LB培养基(含50μg/ml氨苄青霉素)的锥型瓶中,摇床30℃震荡 培养6~7h,OD值达0.6~0.7h,按1∶20的比例转种于1000ml LB培养基中,摇床30℃震荡培养 7~8h,OD值达1.0~1.2h,接种30L发酵罐中,30℃培养4~5h后,42℃培养4h,离心收集菌体。2.2菌体破碎及包涵体的提取 将菌体加入A液悬浮洗涤3~5次,取洗涤后的菌体加入4倍体积的A液,冰浴条件下超声破碎15次,30s/次,每次间隔30s,离心收集沉淀,加入B液和C液各洗涤3次,离心后收集沉淀物即为包涵体。 2.3包涵体的溶解及复性 包涵体加入5倍体积的D液,冰浴条件下,抽提2h,再将抽提液迅速用E液100倍稀释,4℃放置2h后装透析袋,于20倍体积的F液透析20~24h。 2.4重组人干扰素α2b的纯化