血液中酒精含量检测作业指导书

1．目的

检测血液中乙醇含量。

2. 适用范围

本标准适用于血液中乙醇的定性、定量分析。

3. 职责

技术负责人批准考核合格的毒物分析专业人员完成此项工作。

4. 试剂与对照品

4.1 乙醇（色谱纯99%，Sigma）

4.2 乙醇溶液：精密称取乙醇1.0097g于100ml容量瓶内，添加蒸馏水至刻度，混匀，得10.00mg/ml乙醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至20倍，得0.50mg/ml 乙醇控制液，放置样品室4℃冰箱保存，有效期为6个月。

4.3 叔丁醇（色谱纯99%，Chem Service）

4.4 内标叔丁醇溶液：精密称取叔丁醇0.5026g于100ml容量瓶内，添加蒸馏水至刻度，混匀，得

5.00mg/ml叔丁醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至125倍，得40ug/ml叔丁醇内标工作液，放置样品室4℃冰箱保存，有效期为6个月。

4.5 乙醇标准溶液（Gerilliant）

乙醇标准溶液： 10mg/dl，20mg/dl，50mg/dl，80mg/dl，100mg/dl，200mg/dl，300mg/dl

5.血液中乙醇定性、定量的分析

5.1样品处理

用精密移液器取样品血0.10 mL及0.50 mL叔丁醇40μg/mL内标工作液2份，各加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，置于顶空自动进样器中加热10 min，待测。

5.2 气相色谱仪条件

色谱柱：DB-ALC1毛细管柱（30m⨯0.32mm⨯1.2μm）

柱温：恒温40︒C

检测器：火焰离子化检测器（FID）

检测器温度：250︒C

进样口温度：150︒C

5.3顶空自动进样分析条件

DANI顶空自动进样器(配1mL定量进样环)工作条件：加热箱温度（Oven）65℃，定量环温度105℃，传输线温度（TR.Line）110℃，样品瓶加热平衡时间（Vial EQ.Time）10.0min，样品瓶加压时间（Pressuriz Time）0.10min，定量环充满时间（Loop Fill Time）0.10min，定量环平衡时间0.05min，进样时间（Inject Time）1.00min。

5.4记录

记录检材中色谱峰乙醇及内标物的峰面积值，填入表中，并根据工作曲线定量计算方程计算出样品血中乙醇的浓度。

5.5定量结果评价

样品应同时平行测定两份，单柱单检测器两份样品测定结果的双样相对相差（双柱双检测器两份样品测定结果的相对偏差）若不超过5％时（有凝血块的血样不超过10％），结果按两份样品结果的平均值计算，双样相对相差若超过5％时（有凝血块的血样超过10％），需要重新测定。

| C

1- C

2

|

双样相对相差（%） = −−−−−⨯ 100 C

C 1、C

2

为两份样品平行定量测定的结果。

式中C为两份样品平行定量测定结果的平均值（C

1+ C

2

）/ 2；