登革病毒毒力基因的筛选与鉴定研究

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● 在实验动物中,以脑内途径接种1-2日龄乳
微生物学检查
鼠最为敏感。
● 成蚊白纹伊蚊的亲代接种在7日获得结果,
华丽巨蚊或它的四龄幼虫的脑内接种在2-5 日内取得病毒分离结果。
血清学检查 检查患者血清抗体时,用两种以上的方 法得到的结果均为阳性,且双份血清抗体效 价4倍增高时才有诊断意义。 酶联免疫吸附技术:检测登革病毒抗体IgM/IgG 间接免疫荧光技术:登革病毒抗体IgG.
胶体金快速免疫吸附技术:登革病毒IgM、IgG检测
免疫酶斑点技术:登革病毒IgM、IgG检测
分子生物学方法
斑点杂交、RT-PCR适于早期诊断
传染源主要是病人:发病前数小 时到病后3~5日传染性最强。 此时应在有良好防蚊设备的房间 进行治疗。 目前尚无被批准的登革疫苗。
治疗
尚无特效药物治疗登革热 基础治疗: 卧床休息,避免劳累,多饮水, 常进菜汤、果汁等流质或半流质 食物。 对症治疗: 补液、用退热剂和镇痛药控制发 热和疼痛等。
● 潜伏期不清楚。 ● 发病时以急性高热和许多与DF相似的
症状开始,但昏昏欲睡和昏睡症状更 为明显,通常在发病第三天出现出血 症状,胸、四肢和腋出现瘀斑。胃肠 道、鼻和牙龈都可能相继出血。
皮下出血 胰腺组织切片
登革休克综合症 (dengue shock syndrome, DSS)
血浆进入外渗区造成的渗漏会进一 步导致DSS,患者会出现脉搏快速而虚弱、 低血压、寒战和疲惫等症状。除了由常见 的脉管炎引起的血浆渗漏外,还存在散布 的血管内凝血。
致病性

传染源 自然宿主是人、低等灵长类动物和蚊。 ● 丛林型疫源地地区 猴类动物 ● 城市型疫源地地区
隐性感染者和病人
传播媒介
埃及伊蚊和白纹伊蚊 最有 效
人群易感性
感染后产 生的同型 免疫抗体 保持终生
人群普 遍易感
同时获得对其 它血清型的免 疫能力(异型 免疫)仅持续 6~9个月
儿童第二次感染登革2型病毒 时,较易发生登革出血热。
核衣壳
壳体蛋白C
脂双层膜
分型
• 根据其特异性抗原的不同 四种血清型(1~4型) • 各型病毒间抗原性有交叉
培养
● 白纹伊蚊传代细胞
(C6/36细胞)

猴肾、地鼠肾原代和
传代细胞
● 黑猩猩、恒河猴、长臂猴、狒狒:与人
类相似的病毒血症,却无任何症状。 ● 用已适应在鼠脑组织中复制的登革病 毒经脑内接种可使小鼠产生脑炎。
1988年以前 国外实验室登革病毒感染有12例 1988-1991年 4例
★ 未做好防护措施(没穿长袖背后系带的
工作服,未戴手套、面罩及护目镜)
★ 有3例在实验操作中未使用生物安全柜ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
★ 实验室人员处理的都是高浓度的病毒
进行登革病毒(尤其是高浓度病毒) 的操作时应严格遵守BSL-2级标准
实验室废弃物的处理
登革出血热
对症治疗: 包括补充血容量、调 整电解质平衡,纠正 休克和控制出血等。
预后
一般预后良好,不存在携带者。
实验室生物 安全防护
登革病毒可 存在于
血液
脑脊液
中枢神经系统或其他组织
以及受染的节肢动物中
DF实验室相关性感染的基本途径
★病毒意外经胃肠道外途径注入体内 ★受损的皮肤或黏膜接触到病毒 ★被已接种实验室啮齿或节肢动物咬伤 ★传染性气溶胶可能是潜在的传染源
登革病毒
DENGUE VIRUS
登革病毒— 骑在蚊子身 上的火枪手
我国登革热属输 入性,台湾、广 东、海南、广西 、云南。
2001年8月6日中午,泰国参议院负责 旅游的有关官员,及泰国旅游局香港办事 处的有关负责人在北京召开了一个面对新 闻媒体和旅行社的“泰国旅游研讨会”, 向中国公众解释近日以来骇人听闻的“登 革杀人”事件。
谁的眼泪在飞?
我的眼泪你看到了吗?
“我其实是个烂人。无 论作为父亲、儿子还是 丈夫,尤其是作为球员 ,我知道自己毛病不少 。……(但)我想再次 加入国家队,以便给大 家带去更多的欢乐。” ———罗马里奥致斯科 拉里
生物学特性
★ 球形颗粒 ★ 直径45~55nm
登革病毒颗 粒电子显微 镜图
单股正链RNA
微生物学检查
一、样本采集
病 人 尸体 检材 蚊
无菌采集发病后5d内静脉血3mL,放
冰壶送实验室分离血清接种细胞进 行组织培养。 可取血、脑脊液、脑组织、肝等。
采集吸过血的埃及伊蚊,白纹伊蚊或
其他可疑蚊种,用研磨器研碎,取上 清液。
病毒分离 ● 白纹伊蚊C6/36细胞微量培养是目前分离登 革病毒最敏感、最简便、分离阳性率又最 高的一种方法。
登革热(dengue fever, DF)
● 潜伏期3~14日,平均4~7日。 ● 主要表现为发热和分散的斑疹和丘疹。 ● 很少需要用支持疗法。
较严重的DF 头痛和眼眶后疼痛、关节痛、肌痛, 皮疹和丘疹突然出现。热病期通常持续 6日, 疹会扩散为红斑。
登革出血热 (dengue hemorrhagic fever,DHF)
抵抗力
● 对乙醚和酸敏感
易受各种理化 因子的影响
● 紫外线照射、福尔马林、高锰酸钾、离子型或 非离子型去污剂灭活 ● 56℃处理30分钟都可灭活 ● 可以在-70℃或冷冻干燥状态下长期保存
措施
• 紫外线照射 • 高压灭菌 • 焚化


★ 登革病毒主要通过埃及伊蚊和
白纹伊蚊传播。
★ 登革病毒为三类病原微生物, 涉及活的登革病毒的实验应在 BSL-2级实验室中操作。
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