大蒜素检测方法

大蒜素研究进展2

1.GC及GC-MS联用

最低检测限0.2ng 为避免被测物在高温条件下分解，柱温不易过高，适宜温度为70℃；

GC-MS可以测出大蒜油中各种组分及含量最低检测限为0.005g/100g

2. 高效液相色谱法(HPLC)

高效液相色谱法克服了气相色谱法中温度高, 不稳定的缺点, 柱温可控制在较低温度, 大蒜素的检测一般采用反相高效液相色谱法。测定波长为240 nm。该方法最低检测浓度为0. 18 g /mL

3.定硫法

定硫法的原理[ 16] 是大蒜中蒜氨酸的亚砜基和大蒜素的硫代亚砜基被浓硝酸氧化成硫酸离子, 与氯化钡反应形成硫酸钡沉淀, 根据硫酸钡的重量换算出大蒜素的含量。在定硫法中, 氧化剂的用量, 酸度和沉淀剂用量等因素都会对测定结果产生影响。

氧化剂用量在2. 0~ 5. 0 mL之间较好, 氧化剂量过多或过少都会使测定结果偏低, 测定溶液的酸度值在2. 0~ 3. 0之间最佳, 沉淀剂用量在5~ 30 mL之间对测定结果影响较小。

在大蒜素保健食品中常用该方法进行大蒜素含量测定

4.分光光度法

在一定温度下大蒜素在蒜酶的作用下水解产生丙酮酸, 可以利用测定丙酮酸含量的方

法测定大蒜中大蒜素的含量。丙酮酸可以和2, 4- 二硝基苯肼作用生成丙酮酸- 2, 4 - 二硝基苯腙沉淀。利用分光光度计对苯腙进行比色分析, 测出消光值D, 在D- C 标准曲线上找出对应的苯腙浓度, 从而换算出大蒜素的含量。

除此之外, 还可以通过测定半胱氨酸的含量从而计算出大蒜素含量。其原理是基于一分子的大蒜素会与两分子的半胱氨酸发生反应, 可以通过过量的半胱氨酸与大蒜素反应, 用5, 5 -'二硫代双( 2- 硝基苯甲酸) 法测定反应前后半胱氨酸的量, 根据半胱氨酸减少量计算大

蒜素含量。结果为大蒜素平均含量0. 270 mmol/100g。

5. 其他方法

除以上方法外, 还有生物检测法, 薄层扫描法, 硝酸汞沉淀法, 适用于定性分析。

大蒜素的研究进展（2）

pH对大蒜素活性的影响

常温下大蒜素水溶液在偏酸性（尤其是pH 5~7）的条件下较为稳定；而在碱性条件下大蒜素水溶液的稳定性很差，且碱性越强大蒜素含量下降越快。原因是：碱性条件会加速大蒜素的水解反应，引起大蒜素分子中二硫键断裂，进而发生一系列化学反应，生成二烯丙基二硫化物和二氧化硫等产物[3]。

温度、溶剂对大蒜素活性的影响

大蒜素在水溶液中很不稳定，而在无水乙醚、95%乙醇和调和油中稳定性很好，大蒜素含量随时间延长呈缓慢下降趋势。大蒜素在有机溶剂和植物油中的良好稳定性可能是由于大蒜素为酯类化合物，因而易溶于和分散于非极性溶剂（植物油）中，并借助两者之间的范德华力而稳定，大蒜素分子中的二硫键也因此不易断裂[3]。

糖类物质对大蒜素活性的影响

蔗糖、阿拉伯胶、可溶性淀粉和β-环糊精对大蒜素均有稳定作用，尤以β-环糊精和可溶性淀粉对大蒜素的稳定性作用为佳，而蔗糖对水溶液中的大蒜素保护作用很小。β-环糊精对大蒜素能起稳定作用的原因是：β-环糊精分子可利用其中空结构包含大蒜素分子，并借助氢键和范德华力稳定大蒜素分子中的二硫键。阿拉伯胶、可溶性淀粉对大蒜素的稳定作用则可能是由于可溶性淀粉和阿拉伯胶均为高分子聚合物，溶于水后可形成一定的网络结构，吸附大蒜素分子，稳定其二硫键。

大蒜素的研究进展（3）

蒋慧等[20 ] 采用反相柱,以甲醇--水--甲酸(85∶15∶0. 1) 为流动相,于225 nm 处测定大蒜素注射液中大蒜素的含量,线性范围为30～250μg·mL - 1。

黎维勇等[21 ]建立了固相微萃取2气相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素的含量,采用固相微萃取器在样品顶空瓶上空平衡吸附样品,在仪器高温下解吸附,采用毛细管柱、氮气为载气、氢火焰离子检测器检测,线性范围为0. 500～2. 775 μg·L - 1 ，大大提高了检测的灵敏度。