试卷二答案 - 淄博职业学院

课程名称：微生物学

使用班级：P03制药

命题教师：裴砚玲

一、名词解释（共20分，每题4分）

1、野生型：从自然界分离的微生物，在其发生人为的营养缺陷型突变前的原始菌株。

2、菌种的复壮技术：将退化的菌种的优良性状重新恢复的技术

3、生长因子：是一类微生物维持正常生理活动所不可缺少的、需求量不大，但是细胞本身不能合成或者合成量不足，而必须从外界摄取的营养物质。

4、芽孢：某些细菌在其发育后期，在细胞内形成的壁厚、抗性强的休眠体。

5、病毒颗粒：成熟的，结构完整的具有侵染能力的病毒。

二、填空（共30分，每空1分）

1、抗生素法、过滤法

2、利用不同类型的细胞进行接种传代、选择合适的培养条件、采用好的保藏方法、经常进行分离纯化

3、噬菌斑、枯斑、空斑、包涵体

4、物理诱变剂、化学诱变剂、生物诱变剂

5、天然培养基、合成培养基、综合培养基、液体培养基、固体培养基、半固体培养基

6、双糖单位、四肽尾、肽桥

7、头部、颈部、尾部

8、菌落和细胞形态改变、生产性能下降、对生长环境的适应能力减弱

9、游离态、感染态

三、选择题（共6分，每题2分）

1、A

2、B

3、A

四、实验设计题（10分）

主要有四步：

1、样液的准备（2分）

2、稀释（2分）

3、富集培养（3分）

4、检验（3分）

五、简答题（34分）

1、芽孢为什么对不良环境有很强的耐力？（6分）

（1）具有厚而致密的壁不易失水；

（2）含水率低，一般在40%左右；

（3）芽孢中2，6－吡啶二羧酸释放，菌体活性丧失。

（4）含耐热性E ，由于以上特点，芽孢对不良环境如高低温、干燥、化学药物等有很强的抵抗力。细菌的营养细胞在70－80℃时煮10分钟就死而芽孢在120－140℃还能生存几小时，营养细胞在5%苯酚中很快死亡，芽孢却能而授15天。

2、紫外线灭菌的原理及注意事项。（6分）

原理：波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用。其主要作用于DNA，使一条DNA上

相邻的两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体，导致细菌变异死亡。

注意事项：由于紫外线穿透力弱,只限于物品表面和空气消毒灭菌；另外，紫外线对皮肤，眼结膜等有损伤作用，使用时要注意防护；由于紫外线灭菌过程存在光复活现象，应该暗处操作。

3、简述病毒的增殖过程。（8分）

(1)、吸附吸附是病毒感染宿主细胞的前提，具有高度的专一性。在通常情况下，敏感细胞表面具有特异性表面接受部位，可与相应的病毒结合。

(2)、侵入病毒侵入的方式取决于宿主细胞的性质，尤其是它的表面结构。一般来说有三种情况：①整个病毒粒子进入宿主细胞；②核衣壳进入宿主细胞；③只有核酸进入宿主细胞。

(3)、增殖包括核酸的复制和蛋白质的合成。首先，噬菌体以其核酸中的遗传信息向宿主细胞发出指令并提供“蓝图”，使宿主细胞的代谢系统按次序地逐一转向合成噬菌体的组分和“部件”，合成所需“原料”可通过宿主细胞原有核酸等的降解、代谢库内的贮存物或从环境中取得。比如，当噬菌体dsDNA侵入宿主细胞后，首先设法利用宿主细胞原有的RNA聚合酶来转录噬菌体的mRNA。然后由这些mRNA进行转译，以合成噬菌体特有的蛋白质。这种利用细菌原有的RNA聚合酶转录噬菌体的早期基因而合成mRNA的过程常称早期转录，由此产生的mRNA称早期mRNA，其后的转译称早期转译，而产生的蛋白质则称早期蛋白。

利用早期蛋白中新合成的或更改后的RNA聚合酶来转录噬菌体的次早期基因，借以产生次早期mRNA的过程，称为次早期转录。由此合成的mRNA称次早期mRNA，进一小的转译称次早期转译，其结果产生了多种次早期蛋白。例如分解宿主细胞DNA的DNA酶，复制噬菌体DNA的DNA聚合酶，以及供晚期基因转录用的晚期mRNA聚合酶。晚期转录是指在新的噬菌体DNA复制完成后对晚期基因所进行的转录作用。其结果产生了晚期mRNA，现经晚期转译后，就产生一大批可用于子代噬菌体装配用的“部件”--晚期蛋白，它们是头部蛋白，尾部蛋白，各种装配蛋白和溶菌酶等。(4)、装配病毒核酸的复制与病毒蛋白质的合成是分开进行的，由分别合成好的核酸与蛋白质组成完整的新的病毒粒子的过程。

(5)、释放成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程称为病毒释放。病毒的释放是多样的，有的通过破裂，出芽作用或通过细胞之间的接触而扩散。

4、简述培养基的配制原则。（8分）

（1）、适合微生物的营养特点，各种微生物营养类型不同，所需营养物质成分也各不相同。自养微生物所用的培养基，是由无机物构成的，碳源和能源，有的微生物对营养要求较复杂，需有多种有机物才能很好生长。

（2）、按微生物需要量调好营养配比

选择适于微生物生的营养配方及其用量，根据菌体化学组成和代谢产物成分来配制。通常微生物用一份碳组成细胞物质，四份作能源，故碳需要量较大，碳源不是微生物易早衰老，调好碳氮比至关重要。

（3）控制微生物的培养条件

微生物生长还受PH值、氮与二氧化碳含量和渗透压等条件的影响。

PH值：不同微生物要求不同PH值，制备培养基时必须调PH值，一般细菌、放线菌PH 值为7.0－7.5之间，霉菌和酵母（真菌）的PH值为4.5－6.0之间，另外，在微生物培养过程中PH值发生变化，这是由于微生物代谢活动引起的。使含糖的培养基变酸，PH值下降。微生物分解蛋白质又可产生氨，使PH值上升。为了维持微生物适宜的PH 值的相对稳定，常用缓冲液进行调节

调节氧和CO2的浓度：需氧微生物的氧气一般可从空气中获得，发酵罐培养时常通入无菌空气，使发酵液中含有充分的溶解氧，保证微生物需氧量。厌氧微生物培养时，需制造无氧环境，常加入还原剂，制造氧化还原电位低环境如加胱AA、巯基乙酸钠Na2S 抗坏血酸等。

调节培养基的渗透压：培养基中各种物质的浓度要适当，过高会抑制微生物的生长，因此配培养基时要掌握好营养物质的浓度及各种营养成分的比例，

(4)经济节约的原则

5、说明根霉、毛霉、曲霉、青霉的形态特点以及主要的繁殖方式(6分)

形态特点:

根霉：单细胞，菌丝较粗，有匍匐菌丝和假根。假根处向上生出孢子囊梗，梗上有较大的球形孢子囊（囊内有明显的囊轴和囊托）呈“褐色、黑色”

毛霉：单细胞，无匍匐菌丝和假根，气生菌丝生出单枝或分枝的孢子囊梗，梗上有球形孢子囊（囊内无囊托）呈白色或褐色.

曲霉：多细胞，有足细胞，足细胞向上生出直立或略有倾斜的分生孢子梗

梗上有菊花型的分生孢子穗。呈黑色、黄褐色、褐绿色。

青霉：多细胞，有扫帚状分枝，呈蓝绿色、灰绿色。

生殖方式:

根霉生成孢囊孢子繁殖

毛霉孢囊孢子繁殖（无性）、接合孢子繁殖（有性）

曲霉产生分生孢子繁殖（无性）、有性繁殖极少发生。

青霉产分生孢子繁殖（无性）有的也进行有性生殖。