肺部感染的病原体检查

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采血部位
• 采血部位通常为肘静脉
• 对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人， 在病灶或髂前（后）上棘处消毒后 抽取骨髓培养。
• 疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉 或股动脉采血为宜。
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22ຫໍສະໝຸດ Baidu
血液采集
• 收集血液作培养时，须特别小心
• 许多微生物，尤其是葡萄球菌属。 通常存在于皮肤表面或近表层处，易污染。
每次采集血培养的间隔时间？
1. 每份血培养间隔应不超过5分钟，因为网状内 皮系统对于一过性菌血症和间歇性菌血症在 15～30分钟内可清除（CLSI规定每份血培养 应同时获得，或尽可能短的时间内）
2. 对怀疑亚急性感染性心内膜炎，间隔1小时， 连续采集3份血培养
血培养排名前10位的临床致病菌
细菌名称 金葡 大肠埃希菌 凝固酶阴性葡萄球菌 肺克 肠球菌 绿脓 肺链 白念 草绿链 阴沟
• 病理情况下痰量增多，呈不透明并 有性状改变。
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标本采集方法
• 自然咳痰法 • 支气管镜采集法 • 防污染毛刷采集法 • 环甲膜穿刺经气管吸引法 • 经胸壁针穿刺吸引法 • 支气管肺泡灌洗法
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痰标本的正确采集
• 痰液标本的采集以清晨为好，因此时痰量多， 含菌量大 。
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实验前质量控制
一份不合格的标本
•可能造成所有的努力功亏一篑 •测量越准确，结果越错误
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分析前误差占总误差的比例
标本的质量是 影响微生物室检验结果
最重要的因素
“Garbage in, Garbage out.”
黄文贵 前台湾医事检验学会理监事制作
PUMCH：痰涂片染色镜检
血液标本的病原学检查
血培养采血条件
• 体温过高(≥38℃) • 体温过低（≤36℃) • 白细胞过多（≥10000/μl），并有
核左移现象 • 中性粒细胞过少（≤1000/μl）
上述4项中一项或同时发生时， 应进行血液培养。
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采血时间
• 一般在发热初期和高峰期采集
正确 87.2 99.3
12.4
100.0 69.9 96.4 100.0 90.0
38.0
100.0
污染率 6.4 0.0
81.9
0.0 16.1 1.8 0.0 0.0 49.3 0.0
不确定 6.4 0.7 5.8 0.0 14.0 1.8 0.0 10.0 12.7 0.0
血液液分分离离的的707例0例凝凝固固酶阴酶性阴葡性萄葡球萄菌球分菌析
• 应作严格皮肤消毒后，采静脉血
–70%酒精擦拭静脉穿刺部位 –再以碘酊擦拭 –最后再以70%酒精脱碘
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采血量
• 自动化仪器要求通常成人8～10 ml/瓶，儿童1～ 5 ml/瓶
• 一份(一套）血培养为2瓶，即1个需氧瓶和1个厌 氧瓶
采血套数及血量 1套(20ml) 2套(40ml)
• 在医生或护士指导下取样。 • 嘱病人漱口三遍以除去浅表固有定植菌。 • 指导病人深咳以取得下呼吸道标本（而不是
唾液及鼻咽部的分泌物 ）置于一无菌容器 。
• 注意:咳痰不能做厌氧培养!!!
标本的运送
• 痰以深咳排出后，应装于有密封瓶盖的无菌 塑料容器中，以免感染自己或他人
• 标本应及时送检，室温≤3h
• 对间歇性寒战或发热应在寒战或 体温高峰到来 之前0.5～1h 采血
• 最好在未应用抗生素之前采血
• 若已应用抗生素，应在下次应用 抗生素前采血
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Chills 寒战
Blood Cultures 血培养
BACTEREMIA
LEVEL 菌血症的水平
Temp 体温
0
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送检标本种类与临床意义
临床意义低的标本 • 痰、咽拭子（HI，SP除外） • 粪便、肛拭子（ADCD除外） 临床意义中等的标本 •尿 • 脓、伤口分泌物 临床有意义的标本 • 血、脑脊液、胸腹水、无菌体液
痰标本的病原学检查
痰液
• 痰液由气管、支气管和肺泡所分泌
• 正常情况下分泌物甚少，呼吸道粘 膜受刺激时，分泌物增多，但多为清晰、 水样，无临床意义。
检出率
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65%
80%
Cockrill2004年报告:163位病人,血培养
3套(60ml)
96%
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• 每名患者应至少采集2份血培养，最好为3 份（CLSI规定采集2～3份血培养）
• 在一名败血症患者初期诊断时，绝不能只 采集1份血培养（CLSI强调了此观点）
• 注意：1“份”是指一次静脉穿刺
鲍曼不动杆菌在人体的定植率高于感染发生率
Dijkshoorn L等在Nature发表的一篇综述中指出：
鲍曼不动杆菌在人体定植比感染更为常见， 在鲍曼不动杆菌易感人群也如此
Nature Publishing Group. natur e reviews.2007;5:939-951
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• 若不能及时处理，可选择运送培养基运送和 保存标本，但不应≥48h
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痰标本要求
• 白细胞（WBC）≥25/LPF • 鳞状上皮细胞（SEC）＜10/LPF • 如不符合上述指标，应重新采样
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痰涂片革兰染色，报告？
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PUMCH：痰涂片染色镜检
• 对呼吸道标本临床意义的判断
感染？定植（寄植）？污染？
– 鲍曼不动杆菌感染与定植比例为 1: 3.5-12 – 在ICU中院感控制的意义大于治疗本身
• ICU环境“无处不在，无时不有” • 很少有单独ABA在HAP感染的病例 • 有统计，ABA相关的HAP与其它病原感染死
亡率并无显著差异
CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, July 2008, p. 538–582
• 有意义：
①合格痰标本培养优势菌中度以上生长 (》+++)；
②合格痰标本少量生长，但与涂片镜检 结果一致(肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、 卡他莫拉菌)；
③多次培养到相同细菌；
• 无意义：
①痰培养有上呼吸道正常菌群的细菌 (如草绿色链球菌、表皮葡萄球菌、非致 病奈瑟菌、类白喉杆菌等)；
②痰培养为多种病原菌少量(<+++)生 长。
瓶瓶数数 60 50 40 30
52.9%% （37）
39.3％ （24）
菌血症 污染菌