实验十人类染色体核型分析PPT课件

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实验十人类染色体核型分析
• 实验目的: 1、了解人类外周血淋巴细胞的培养和染色 体标本的制备方法 2、了解人类染色体的形态和分组特征,学 习染色体组型分析方法
• 实验内容与原理: 1、人类染色体标本制作简介
人类外周血淋巴细胞的培养及染色体标本制作技术 淋巴细胞——G0期或G1期 1960年Nowell和Morhead
F 19~20 小 中部
无 要求不与其他组相混
G 21~22 最小 近端
有 要求21、22与Y区分
染色体Biblioteka Baidu排列规则:
①染色体的大小,大→小
②着丝粒位置,中部→端部
(2)染色体的长度及着丝粒位置
1 μm:微型染色体
1~4 μm :小型染色体
4~12 μm :中型染色体
12 μm < :大型染色体
• 实验材料与用具: *人类染色体照片(复印) *剪刀、胶水、组型分析报告纸
• 实验步骤: 1、染色体分组编号 了解各染色体的特点 一个照片作对照,另一分组编号用 2、核对、调整、粘贴 着丝粒在横线上,p在上q在下 3、分析结果
• 作业:
组 编号 形态 着 丝 粒 位 置 随 鉴 别 要 求

大小

A 1~3 最大 1、3中部2近中 无 要求明确区分各号
B 4~5 次大 近中
无 要求不与其他组相混
C 6~12 中等 近中
无 要求6、7、8不与其他混
D 13~15 中等 近端
有 要求不与其他组相混
E 16~18 较小 16中17、18近中 无 要求明确区分各号
植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)
外周血淋巴细胞的培养和染色体标本制作的步骤: ⑴培养液的分装: 培养液:RPMI1640或M199、小牛血清、PHA、 肝素、双抗(青霉素、链霉素) ⑵采血:静脉采血 ⑶培养:37℃培养66~72h ⑷秋水仙素处理:秋水仙素→分裂阻止剂 ⑸低渗处理:使红细胞破碎,白细胞膨胀 ⑹离心:收集白细胞 ⑺固定:固定液——甲醇:冰醋酸=3:1 ⑻离心、再固定: ⑼再离心:弃上清,留白细胞 ⑽制片:
①相对长度:
相对长度

单个染色体长度 染色体组全长
100%
②臂率:
臂率

长臂 短臂

q p
1.01~1.70 中部着丝粒染色体m
1.71~3.00 近中着丝粒染色体sm
3.01~7.00 近端着丝粒染色体st
7.01 ~∞
端部着丝粒染色体t
③着丝粒指数
着丝粒指数

短臂长度 染色体全长
100%
(3)随体及次缢痕的有无
⑾染色:Giemsa染液 ⑿镜检: ⒀封片: ⒁显微摄影→进行核型分析 2、人类染色体组型分析 *核型(karyotype) *组型 (idiogram) *染色体组型分析 (1)染色体的数目
人类染色体2n=46 核型:正常男性—— 46,XY 正常女性—— 46,XX
人类染色体按其形态大小分7组:A、B、 C(X)、D、 E、F、 G(Y),其主要特点和鉴别要求如下:
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