苦参碱的综述

苦参碱的测定方法和药理作用

摘要：对苦参中的苦参碱进行提取、分离方法，并对其进行深入的工艺、药理、药效和生物利用度等方面的系统研究具有重要的意义。苦参碱具有抗炎、抗肿瘤、镇痛、抗心律失常、平喘、镇咳、杀菌等作用。近年来国内外在研究和使用苦参类生物碱的过程中, 进一步发现了其多方面的药理活性和临床功能，是一类很有前途的药物。本文就苦参类生物碱含量测定方法及其药药理作用的进展作一综述。

关键词：苦参碱提取分离药理作用应用前景

引言：苦参又名苦骨、川参、凤凰爪、牛参、地槐、野槐等，为豆科多年生落叶亚灌木植物舌参的根，采挖后去芦头及须根晒干切片入药，全国各地均产，功能主要为清热、燥湿、杀虫等，主治热毒血痢、肠风下血、黄疸、赤白带下、小儿肺炎、急性扁桃体炎等多种炎症和痔漏、疥癞恶疮、皮肤瘙痒、阴疮湿痒等疾病( 据研究得知，苦参的根含有多种生物碱，如氧化苦参碱、羟基苦参碱、甲基野靛碱、臭豆碱、赝靛叶碱、脱氢苦参碱、槐果碱)等多种生物碱及黄酮类化合物( 因为苦参碱具有多方面的药理作用，如抗肿瘤作用、抗癌作用、抗病毒作用，所以对苦参总碱的提取与分离具有重要的意义。)

1苦参碱以及其化学结构

1.1苦参碱基本性质

苦参碱（Matrine）系从豆科植物苦参（sophra flavescens Ait.）苦豆子（S.alopecuroides L. ）、山豆根（S,subprostrataCHun et T.Chen）中分离出来的生物碱，是上述 3种传统中草药的主要活性成分之一，是苦参类生物碱的代表( 《中国药典》 2000 年版一部中，是以苦参碱的含量作为苦参药材的质量控制指标［1］。) 2005 年版一部中，苦参碱的含量也是苦参药材的质量控制指标之一。

1.2苦参碱的化学结构

苦参碱是白金雀儿碱（lupanine）的异构体，属于喹喏里西啶类衍生物，由2个喹喏里西啶环骈合而成，有 2个氮原子，一个是叔胺氮，一个是酰胺氮，其

分子式为C

15H

24

N

2

O,分子量为245.37，苦参碱有 4 种形态：α-苦参碱为针状或

柱状结晶，熔点为76℃；β-苦参碱为斜方晶状，熔点为 87℃；γ-苦参碱为液体，沸点为 223℃；δ - 苦参碱是柱状结晶，熔点为84℃常用的是α- 苦参碱。2含量测定方法

目前苦参类生物碱的含量测定方法主要包括酸碱滴定法、酸性染料比色法、荧光猝灭法,薄层扫描法、毛细管气相色谱法, 高效液相色谱法以及高效毛细管电泳法等。下面分别予以介绍：

2.1酸碱滴定法苦参类生物碱均具有较强的碱性,因而可以采用酸碱滴定法测定其含量。如周慧等[2]采用该法对苦参碱胶囊的初步稳定性进行了研究。具体方法: 精密量取混合均匀的苦参碱胶囊内容物200 mg, 置于三角烧瓶中,精密加入

0.05 mol•L- 1硫酸溶液20mL ,用0.1 mol•L- 1氢氧化钠溶液滴定至橙黄色即可(每

1 mL 0.05 mol•L- 1硫酸溶液相当于24.84 mg 的苦参碱)。

2.2酸性染料比色法某些酸性染料在一定pH 条件下,可与生物碱定量结合显色。根据这一原理可以利用比色法测定生物碱的含量。章育中等〔 3〕把苦参及其制剂中的苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱和槐定碱经硅胶 G 分离后, 在pH7.6缓冲液中与溴麝香草酚蓝形成离子对,用氯仿提取后,进行比色测定。总生物碱不经薄层分离即可直接比色测定。苦参碱、氧化苦参碱及槐果碱的回收率分别为97.3% ,97.2% ,96.0%

2.3荧光猝灭法苦参碱和氧化苦参碱均具有叔胺氮,能使乙酸乙烯酯荧光试剂产生荧光猝灭。庞志功等[4]用丙二酸和醋酐缩合自制乙酸乙烯酯荧光试剂,利用苦参碱、氧化苦参碱对其有定量猝灭作用,达到测定苦参碱、氧化苦参碱的目的。其线性范围为2×10- 9～ 8×10- 6g•mL- 1。苦参碱与氧化苦参碱的最低检测限分别为1.4×10- 11g.mL- 1和4.5×10- 12g•mL- 1, 平均回收率分别为94.9% 和92.8% , 苦参碱与氧化苦参碱的相对标准偏差分别为

3.3% 和3.5%。

2.4薄层扫描法薄层扫描法具有样品不需要净化、操作简便等优点,因而被广泛应用于苦参类生物碱的含量测定中。

张尧明等[ 5]用双波长反射法锯齿形扫描测定了苦参碱和氧化苦参碱的含量。

以硅胶 G- CM C- Na 板为层析板,以CHCl

32-CH

3

OH-NH

3

.H

2

O(60…8…0.3)为展

开剂；改良碘化铋钾试剂为显色剂。扫描波长: λ

S = 510nm ，λ

R

= 650nm；苦参

碱在0.15 ～ 4.5μg 范围内线性关系良好。氧化苦参碱在1 ～ 20 μg范围内呈线性关系。苦参碱及氧化苦参碱的平均回收率为101.4% 及101.7% ,相对标准偏差分别为2.1%及2.3%。

2.5毛细管气相色谱法毛细管气相色谱法具有柱效高、分析速度快等特点,因此

能够简便、快速、准确地测定生药苦参及其制剂中苦参类生物碱的含量。

刘晓东等[6]研究苦参碱在兔体内的药代动力学时,血样分析采用毛细管气相色谱法, 线性范围为0.1 ～ 7 mg•L- 1, 回收率为96.6%～ 106.8% , 相对标准偏差为5.0%。本方法简便、快速,但由于毛细管柱内径细, 液膜薄,柱容量小,出峰快,因此对色谱仪的进样、检测和记录系统等有些特殊要求，局限较大。

2.6 高效液相色谱法杨凤珍等[7]采用HPLC法测定了苦参素注射液中氧化苦参

键合柱, 流动相为乙腈-磷酸水碱与氧化槐果碱的含量。选用Lichrosorb- NH

2

)-无水乙醇(80…8…10),在220nm 处进行检测。氧化苦参碱的线性范溶液(pH

2

围为0.04 ～ 0.12 g•L- 1, 日内和日间 RSD 分别为0.93% 和0.89% , 苦参素注射液的平均回收率为98.8% (RSD =1.01%)。

孟根达莱等[ 8]用高效液相色谱法测定人血浆中氧化苦参碱的含量。血浆样品经碱化后以氯仿-正丁醇(98…2) 提取, 吹干后以甲醇-正己烷(4…1, 氨水调pH 至8)为流动相, 经硅胶柱分离后在220nm处检测。氧化苦参碱血浆浓度在1.2 ～36 mg•L- 1范围内呈线性关系,平均回收率为 98.3%～ 109.0% ,日内和日间精密度均小于4% ,氧化苦参碱的最低检测限为0.1mg?L- 1(S/ N = 2)。该法为氧化苦参碱的血药浓度测定及药代动力学研究提供了一种简便可行的方法。

2．7高效毛细管电泳法苦参类生物碱药物的碱性强、极性大,在采用HPLC 分析时,往往因为被色谱柱吸附太强,造成峰形不好甚至拖尾。而采用高效毛细管电泳法对其分离效果很好。李顺祥等[9]采用高效毛细管电泳用外标峰面积法测定了苦参中苦参碱、氧化苦参碱的含量。电泳条件: 0.02 mol •L- 1磷酸缓冲液(pH 7.0), 电压20 kV ,温度25℃,检测波长201nm ,进样量10 kPa•s。苦参中生物碱得到了较好分离,苦参碱和氧化苦参碱的加样回收率分别为97.5% 和97.7%。该方法简便、准确、重现性好,可作为苦参中生物碱的质量控制方法。罗明等[10]采用高效毛细管区带电泳法测定了苦参碱和氧化苦参碱的含量,二者的线性范围分别为0.126～ 1.26和0.10～ 1.0g•L- 1, 最低检测限分别为1.0和0.5mg•L- 1, 平均回收率分别为95.9% 和101.9% , 其日内、日间相对标准偏差均小于5.7%。

3苦参类生物碱的药理作用

近年来发现苦参碱类生物碱在保护中枢神经系统和心血管系统、抗病毒、抗炎、免疫抑制及抗肿瘤等方面有重要的药理活性和应用前途[11]

3.1苦参碱的抗肿瘤作用

苦参碱类药物对于多种实验性肿瘤均有抑制作用，且多为移植性实体瘤。苦参碱和氧化苦参碱同是苦参中抗癌有效成分，对癌细胞有直接杀伤作用。电镜观