菏泽市犬瘟热病毒的分离与鉴定

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犬瘟热是由犬瘟热病毒（ｃａｎｉｎｅｄｉｓｔｅｍｐｅｒｖｉｒｕｓ，ＣＤＶ）引起犬科动物的一种高度接触性、致死性的传染病，该病毒属于副黏病毒科麻疹病毒属，该病的发病率高达１００％，死亡率在３０％一８０％之间，有 “ 毁灭性传染病 ”之称，严重影响养犬业的发展，并对多种毛皮动物以及珍稀动物熊猫、虎等的生命安全构成威胁，甚至与人亚急性硬化性全
ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｔｅｓｔ．Ｉｔｗａｓｓｈｏｗｎｔｈｔａｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｃｏｕｌｄｇｒｏｗａｎｄｒｅｐｌｉｃａｔｅｉｎｖｅｒｏｃｅｌｌｓ，ｈａｄｅｎｖｅｌｏｐｅａｎｄｗａｓｒｅｓｉｓｔａｎｔｔｏａｃｉｄａｎｄａｌｋａｌｉａｎｄｗａｓｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．ＴｈｅＴＣＩＤ５０ｗａｓ１０５．８３２．Ｔｈｅａｎｉｍａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｃｏｎｉｆｒｍｅｄｔｈｅｖｉｒｕｓｗａｓ
丹区畜牧局兽医站动物门诊、专家动物门诊，经诊断试纸确诊为感染犬瘟热死亡的犬，采集２０只死亡犬的肝脏、脾脏、淋巴结及脑组织并保存于
．
８０ ℃ 的超低温冰箱。１．２试验动物未接种犬瘟热疫苗的１－２月龄健康幼犬８只，
关键词：犬瘟热病毒；分离；鉴定
中图分类号：￥８５６２．６５９．６文献标识码：Ａ文章编号：１００５ — ９４４Ｘ（２０１３）１１－百度文库００７５ — ０５
ＴｈｅＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＩｄｅｎｔｉｉｃｆａｔｉｏｎｏｆＣａｎｉｎｅＤｉｓｔｅｍｐｅｒＶｉｒｕｓｉｎＨｅｚｅ
ｆｏｒｐａｔｈｏｇｅｎｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｗａｓｓｕｂｊｅｃｔｅｄｔｏｐｈｙｓｉｃ — ｃｈｅｍｉｃａｌｔｅｓｔ，ｖｉｒｕｓｔｉｔｒａｔｉｏｎａｎｄａｎｉｍａｌ
ＷａｎＳｈｕａｎｇｘｉｕ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＨｅｚｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｌｉｖｅｒｓ，ｓｐｌｅｅｎｓ，ｌｙｍｐｈｎｏｄｅｓａｎｄｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｓｗｅｒｅｔａｋｅｎｆｒｏｍ２０ｄｅａｄｄｏｇｓａｔｔｈｒｅｅｐｅｔｈｏｓｐｉｔａｌｓｉｎＨｅｚｅ
菏泽市犬瘟热病毒的分离与鉴定
万双秀
（菏泽学院制药工程系，山东菏泽
摘
２７４０００）
要：通过采集本市３家宠物医院２０只死亡犬的肝脏、脾脏、淋巴结及脑组织，一进行病毒的分离培养、理化
性质的测定、病毒毒力测定、及动物回归试验，确定了该病毒可以通过ｖｅｒｏ细胞进行培养增殖，有囊膜，耐酸碱，对温度敏感，ＴＣＩＤ５０为１０５．８３２，最后通过动物实验确定了该病毒为犬瘟热病毒，对犬类具有高度致病性。
２．３月龄幼犬１６只，购自当地农户。１．３病毒分离培养取保存于一８０ ℃冰箱中的感染犬瘟热幼犬的肝脏、淋巴结、脾脏和脑，剪碎，加入双抗，研磨后与Ｈａｎｋｓ缓冲液以１：１０混合，反复冻融三次，４ ℃ ５０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，取上清液，再放入离心机以１２０００ｒ／ｍｉｎ于４ ℃离心２０ｍｉｎ。取上清液过滤后接种于Ｖｅｒｏ细胞培养，３７￣Ｃｌｈ后倾去组织悬液，并加入维持液培养观察，同时设正常对照［４］。将出现稳定病变的病毒培养液、ＣＤＶ阳性血
ｈｉ曲ｌｙｐａｔｈｏｇｅｎｉｃａｎｄｉｄｅｎｔｉｉｆｅｄａｓｃａｎｉｎｅｄｉｓｔｅｍｐｅｒｖｉｕｓｒ．
Ｋｅｖｗｏｒｄｓ：Ｃａｎｉｎｅｄｉｓｔｅｍｐｅｒｖｉｒｕｓ：Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ；Ｉｄｅｔｉｎｉｃｆａｔｉｏｎ