紫外分光光度法测氧氟沙星片剂中氧氟沙星的含量

紫外分光光度法测定氧氟沙星片剂中氧氟沙星的含量

一、实验目的

1、掌握紫外分光光度法测定氧氟沙星的原理和方法

2、熟悉绘制工作曲线的一般方法和应用。

二、实验原理

氧氟沙星属第3代喹诺酮类光谱抗菌药物，其抗菌作用强，对厌氧菌、支原体以及肺炎衣原体等也有一定作用。氧氟沙星在三氯甲烷中略溶, 在水或甲醇中微溶或极微溶解, 在冰醋酸或氢氧化钠溶液中易溶,在0.1mol/L盐酸中可溶。考虑到0.1mol/L盐酸溶液较为常用，因此选择0.1mol/L的盐酸溶液为溶剂。氧氟沙星的吸收光谱上的最大吸收峰波长为294±1 nm。本实验采用紫外分光光度法测定氧氟沙星片剂中的含量，简洁、快速，可用作生产过程的快速测定。氧氟沙星的结构如下：

三、仪器与试剂

仪器：UV—2550紫外分光光度计，容量瓶（100ml）,烧杯，具塞刻度试管（10ml），玻璃棒，微量加样器，研钵，布氏漏斗，吸量

管。

试剂：氧氟沙星标准样品，氧氟沙星片（0.1g/片），0.1 mol/L 盐酸溶液。

四、实验步骤

1、标准溶液的配制：

精密称取105 ℃干燥至恒重的氧氟沙星标准品10mg，置于烧杯中，用0.1 mol/L盐酸溶液溶解，然后转移至100ml容量瓶中，稀释至刻度，定容，摇匀，得100μg/m l氧氟沙星标准溶液。

2、波长的选择

精密量取一定量的上述标准溶液11份，分别取0.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1、1.2、1.6、2.4、4、5ml的标准溶液于10ml的刻度试管中，用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度线，摇匀。制成浓度分别为0.2、2、4、6、8、10、12、16、24、40、50μg/m l的溶液。以0.1mol/L 盐酸溶液作为空白溶液，用1cm的比色皿在紫外可见分光光度计上测定每份溶液的吸光度。测定前，选取其中浓度为8μg/mL的溶液，以0.1 mol/L盐酸溶液作参比，在200～400 nm波长围扫描，从光谱中找出吸收峰，以吸光度值最大的波长作为测定波长

3、标准工作曲线实验

在最大吸光度的波长处，分别测定上述溶液的吸光度，在线性围用吸收度(X)对质量浓度(Y)进行回归，得回归方程及相关性系数R。

4、检出限的测定：

取0.1mol/L盐酸溶液1份于10ml的刻度试管中，在相同条件下

于λ处测定其吸光度11次，按检出限公式：D=3σ/K计算。

5、精密度的测定：

分别吸取已配制好的100ug/ml标准溶液1ml于6个10ml的刻度试管中，并用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，制成浓度为10μg/m l 的溶液。在相同条件下测得各自的吸光度A1、 A2 、A3 、A4 、A5、A6，求RSD。

6、样品的测定

取氧氟沙星片10 片, 精密称定, 研细,精密称取（约相当于氧氟沙星0.1g），置100ml容量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，用布氏漏斗抽滤，精密量取续滤液1ml，置10ml的刻度试管中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。吸取供试品溶液8ml于100ml的容量瓶中用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，作为样品。取配制好的样品溶液于吸收池中，在相同条件下于λ处测定其吸光度，求出氧氟沙星片剂中氧氟沙星的实际含量c x。7、回收率的测定：

分别取上述2μg/ml,12μg/m l,40μg/m l的标准溶液5ml，与5ml的上述8μg/m l的样品混合于10ml的刻度试管中，在相同条件下测定吸光度A7、A8、A9在标准曲线上找到其对应的溶度，换算成质量。求出回收率。

五、数据记录及处理

1、波长的选择

2、标准曲线的绘制

标准曲线吸光度

标准液C

0.2 2.0 4.0 6.0 8.0 10 12 16 24 40 50

（ug/ml）

λ处吸光度

3、检出限的测定

测得11份0.1mol/LHCl溶液在最大吸光度值的波长处的吸光度，如下：

组数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

吸光

度A

由标准偏差公式得σ，求D=3σ/K

4、精密度的测定

平行测定的10ug/ml氧氟沙星溶液在最大吸光度值的波长处的吸光度如下：

组数A1 A2 A3 A4 A5 A6 平均值

吸光度

求RSD。根据标准偏差公式求得σ。其相对标准偏差RSD=σ/x*100% (x为A的平均值)

5、求氧氟沙星片剂中的含量c x。

6、计算回收率（回收率=加入纯品后的测得量-加入前的测得量/

纯品加入量*100％)。