F01发酵原料及其处理2015

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淀粉
水解反应
糊精 麦芽糖
复合反应
葡萄糖
分解反应
复合二糖 低聚糖
5-羟甲基糠醛 有机酸、有色物质
2.1.2 淀粉水解糖的制备——酸解法
尽量采用较低 的淀粉乳浓度
盐酸或硫酸
水解压力:0.28 MPa 水解时间:15 min 左右 终点检查:无水酒精检查
淀粉
↓ 调浆
↓ 过筛
↓ 加酸
↓ 进料
↓ 糖化
↓ 放料
不足:生产周期长;设备更复杂。
酸酶结 酸酶法 特点:先先酸酸液液化化,,后后糖糖化化酶酶糖糖化化。。 合法 酶酸法 特点:先先αα--淀淀粉粉酶酶液液化化,,后后酸酸糖糖化化。。
2.1.2 淀粉水解糖的制备——双酶法制备葡萄糖
α-淀粉酶 (淀粉-1,4-糊精酶)
脱支酶 (淀粉-1,6-糊精酶)
γ-淀粉酶 (糖化酶)
优点:工工艺艺简简单单;、水水解解时时间间短短;、设备生产
能力大设。备生产能力大。
不足 :①①高高温温高高压压及及酸酸腐腐蚀蚀;;②②副副反反应应多;
多;③③要要求求淀淀粉粉颗颗粒粒大大小小均均匀匀。。
酶解法
优点:反反应应条条件件温温和和;;淀副粉反液应要少求,低糖;液较
纯净;副淀反粉应液少要,求糖低液。较纯净 。
↓ 冷却
↓ 中和
↓ 脱色
↓ 过滤
↓ 糖液
Na2CO3或NaOH
活性碳 离子交换树脂
新型磺化煤
2.1.2 淀粉水解糖的制备——水解终点检查
淀粉

蓝紫色
无水酒精 不溶
蓝糊精 蓝色 不溶
红糊精 无色糊精 麦芽糖
红色
无色
无色
不溶
不溶
微溶
葡萄糖 无色

2.1.2 淀粉水解糖的制备——酸解法和酶解法的比较
酸来自百度文库法
细胞含水越多,蛋白质变性的温度越低。
(6)微生物细胞菌龄的影响
幼龄细胞更易杀灭。
(7)空气排除情况的影响
如果罐内空气未能排除彻底,温度将达不到要求。
(8)泡沫的影响
泡沫中的空气能形成隔热层,而影响热量发挥杀菌作用。
(9)投料结束后发酵罐的清洗
残留的固形物,在灭菌过程中易形成死角,导致灭菌不彻底。
4.3 连续灭菌过程
2.加热加酸沉淀法
此法又称为 热酸处理法 。工艺上在稀释原糖蜜时采用阶段稀释法, 第一阶段先用 60℃温水将糖蜜稀释至 55~58 oBx,同时添加浓硫酸调整 酸度至5o~6o,进行酸化,然后静止 5~6 h;第二阶段则将已酸化的糖液 再稀释到发酵所需的浓度。
3.添加絮凝剂澄清处理法
先将糖蜜加水稀释至 30~40 oBx,加一定硫酸调 pH至3~3.8,加热至 90℃,添加8×10-6 g/L 聚丙烯酰胺 (PAM) ,搅拌均匀,澄清静止 1 h, 取清液即可用于制备稀糖液。
3.3.2 纤维质原料的水解——半纤维素的酶法水解
4.1.1 典型生长曲线的数学模型
lnNt lnN0
t0 t1
4.1.1 典型生长曲线的数学模型
lnNt lnN0
t0 t1
4.1.1 湿热灭菌原理——热死动力学方程
K:比热死速率常数
ln N0 Nt
K = 1 ln N0 t Nt
0 ln Nt
3.1 非粮食生物质的组成
半纤维素 (Hemicellulose)
木质素(Lignin) 纤维素(Cellulose)
3.1 非粮食生物质的组成 ——木质素
木质素
3.1 非粮食生物质的组成 ——果胶
果胶质是直线型高聚体,以D-半乳糖醛酸为基本结构单位, 通过α-1,4糖苷键连接。
3.1 非粮食生物质的组成 ——半纤维素
5-缓冲器 6-液化层流罐 7-液化液贮罐 11-灭酶罐 12-板式换热器 13-糖化罐 15-压滤机
16-糖化暂贮槽 18-贮糖槽
15
18 16 17 14
糖化条件
温度: 50~60 ℃ pH :4.0~5.0
终点检查:无水酒精检查
2.1.2 淀粉水解糖的制备——水解糖液质量要求
① 色泽:浅黄 ② 透光率:≥60% ③ 糊精反应:无 ④ 还原糖含量:18%左右 ⑤ DE值: ≥90% ⑥ pH:4.6~4.8 ⑦ 其他:无杂菌、不变质、杂质少
乳糖启动子
2.1.1 淀粉水解糖的制备——淀粉颗粒的结构
淀粉(starch)
氢键
聚集
淀粉分子链
针状晶体
淀粉颗粒
2.1.1 淀粉水解糖的制备——淀粉在水 -热处理过程中的物理变化
膨胀
破裂
溶解/液化
糊化 “反生”/老化
2.1.1 淀粉水解糖的制备——淀粉颗粒的糊化
2.1.1 淀粉水解糖的制备——淀粉水解过程中的化学变化
该过程主要用气流-筛式分离机 来完成。
1.2 原料的预处理
(4)粉碎 在发酵生产中,为了加速后续的生物反应和化学
反应等过程的反应速度,对于使用的固体颗粒或块状原料, 常需将其粉碎。
常用的粉碎设备主要有:锤式粉碎机 和辊式粉碎机 。
图1-5锤式粉碎机结构示意图
图1-6辊式粉碎机结构示意图
1.3 培养基的设计
4.1.2 湿热灭菌原理——影响比热死速率常数K的因素
0
t1
t2
t
ln 0.001 N0
ln Nt N0
菌种特性 环境条件 灭菌温度
-K2 -K1
K值越小 灭菌时间越长 微生物越耐热
4.1.2 湿热灭菌原理——温度对K值的影响
图1-18 嗜热脂肪芽孢杆菌营养体细胞及孢子的热死速率
4.1.2 湿热灭菌原理——温度对K值的影响
量的物质。其增产机制有:①是酶的诱导物;②对微生物有某种 益处,使发酵过程更顺利;③稳定发酵产物;④是表面活性剂类 物质,可增加传氧效率,或增加产物的溶解和分散的程度。
1.3.1 前体物质
苯乙酸
δ(L -α-氨基己二酰)半胱氨酸-缬氨酸
异青霉素 N
青霉素 G
1.3.2 产物促进剂
β-半乳糖
IPTG: 异丙基硫代β-半乳糖苷 (β-半乳糖结构类似物)
高温短时灭菌,可以减少对营养物质的破坏
tm'
tm
t
营养物 破坏率
0.001 ln
N0
ln N t N0
-Km'
-Kn 营养物比破坏率 -Kn '
-Km
4.2.1 分批灭菌——操作过程
4.2.2 分批灭菌——影响因素
(1)培养基成分的影响
油脂、糖类及一定浓度的蛋白质可增加微生物的耐热性; 高浓度的盐类、色素等可削弱其耐热性。
配制培养基的 4个原则
目的明确:明确培养对象和实验目的
营养协调:营养物的浓度、配比适宜
理化适宜:物理化学条件适宜 经济节约:原料来源的选择
碳氮比 (C/N) :碳源和氮源的组成比例。
前体 :能直接通过微生物的生物合成过程结合到产物分子上去,
自身结构基本不变,而产物产量却因此有较大提高。
产物促进剂 :既不是营养物又不是前体物质,但是却能提高产
发酵工程
化学与生命科学学院
肖长清
复习题
1.主要的发酵原料及其化学组成。 2.发酵原料的选择原则。 3.碳氮比、前体与产物促进剂。 4.淀粉的分子结构。 5.淀粉在水-热处理过程中的物理变化。 6.淀粉分子在水解过程中的化学变化。 7.双酶法水解淀粉制备糖液的原理及其工艺。 8.非粮食生物质的组成,以及酶法水解的原理。 9.热死动力学方程与灭菌时间的计算。 10.为什么采用高温短时间灭菌既有利于杀灭微生物又有利于 减少营养物质的破坏? 11.分批灭菌与连续灭菌优缺点的比较。 12.主要的连续灭菌流程。
2.化学方法
(1)臭氧分解法 (2)酸水解法 (3)碱水解法 (4)氧化脱木素法 (5)有机溶剂法
3.物理化学方法
(1)蒸汽爆破法 (2)氨纤维爆破法 (3)CO2 爆破法 (4)蒸汽爆裂与乙醇抽提结合法 (5)氨冷冻爆破法
4.生物方法
3.3.1 纤维质原料的水解——酸法水解
3.3.2 纤维质原料的水解——纤维素的酶法水解
N0
t
- K = 1 ln Nt t N0
4.1.1 湿热灭菌原理——灭菌时间的计算
0
t1
t
ln 0.001 N0
-K1 ln Nt
N0 N0:实际测量获得
Nt :技术指标, Nt =0.001
4.1.1 湿热灭菌原理——灭菌时间的计算
【例5-1】某发酵罐内装培养基40 m3,在121 ℃下进行分批灭菌。 设每毫升培养基中含耐热芽孢杆菌为2×105 个,121 ℃时的灭菌 速度常数为1.8 min-1。求理论灭菌时间 (即灭菌失败几率为0.1% 时所需要的灭菌时间,lge=0.4343)。
(2)培养基物理状态的影响
颗粒大灭菌难;颗粒小灭菌易。
(3)培养基中微生物数量的影响
营养丰富或变质的原料中含菌量远比化工原料的含菌量多,因此 灭菌时间要适当延长。
(4)培养基中氢离子浓度的影响
培养基的酸碱度越大,所需杀灭微生物的温度越低。
4.2.2 分批灭菌——影响因素
(5)微生物细胞中水分的影响
A.未预处理的玉米秸秆,酶解 3 h后,表面光滑,仅有个别微孔,仅有 11% 的纤维素转化为葡萄糖; B.190℃处理 15 min的玉米秸秆,酶解 3 h后,表面有大量的微孔, 40%的纤维素转化为葡萄糖。
3.2 纤维质原料的预处理
l.物理方法
(1)机械法 (2)高温液态法 (3)高温分解 (4)微波处理 (5)高能辐射
木聚糖是主要的半纤维素成分,是自然界中除纤维素之外含量 最丰富的多糖。
木聚糖的结构是一种多聚五碳糖,由 β-D-1,4-木糖苷键连接起 来,并带有多种取代基。
彻底降解得到的五碳单糖有:木糖、阿魏糖、阿拉伯糖等, 其中以木糖为主。
3.1 非粮食生物质的组成 ——纤维素
3.2 纤维质原料的预处理
图1-13 预处理和未预处理玉米秸秆酶解效果的比较
第一章 发酵原料及其处理
第一节 发酵工业原料
? 主要原料组成 ? 原料的预处理 ? 培养基的设计
第二节 淀粉水解糖的制备 和糖蜜原料的处理 第三节 非粮食生物质原料的加工 第四节 培养基的灭菌
? 湿热灭菌原理 ? 分批灭菌过程 ? 连续灭菌过程
1.1.1 发酵的工业原料
①粮谷类:玉米、大米、谷子、大麦、小麦、高梁、燕麦、黍、稷等。 ②薯类:甘薯、马铃薯、木薯、山药等。 ③农产品加工副产物:豆粕、米糠饼、麸皮、淀粉渣等。 ④野生植物:橡子仁、葛根、土茯苓、蕨根等。 ⑤非粮食生物质:稻草、秸秆等。
期长,②发灭酵菌罐周的期利长用,率发低酵。罐的利用率低。
优点:①①营营养养成成分分得得到到了了最最大大限限度度的保的护保,护适,宜适宜
① 因地制宜,就地取材。 ② 要求原料内糖类含量较多,蛋白质含量适当。 ③ 原料资源要丰富,容易收集。 ④ 原料要容易贮藏。 ⑤ 对人体无毒害,影响发酵过程的杂质含量少。 ⑥ 原料价格低廉。
1.2 原料的预处理
(1) 除铁 将夹杂在原料中的小铁块、螺丝等金属杂物, 用磁选设备 除去。
磁选设备的主要部件是磁体,多采用永久磁体。
磁选设备分: 永磁溜管 和永磁滚筒 两种类型。
图1-1 永磁溜管示意图
图1-2永磁滚筒结构示意图
1.2 原料的预处理
(2)精选 按颗粒长度进行分级,以除去不必要的杂粒。 常用的精选机有:滚筒精选机 和碟片精选机 两种。
(3)筛选 生产用的发酵原料大多数都是颗粒状的,其中常 含有各种杂质, 筛选 是其清理除杂最常用的方法。
DE值(葡萄糖值)= 还原糖量(以葡萄糖计) 干物质量
2.3.1 糖蜜原料的处理——糖蜜的来源
2.4 糖蜜原料的处理——糖蜜前处理的方法
1.加酸通风沉淀法
此法又称为 冷酸通风处理法 ,是将糖蜜加水稀释至 50 oBx左右,加入 0.2%~0.3% 浓硫酸,通入压缩空气 1 h,静止澄清 8 h,取出上清液用于 制备糖液。
1.1.1 发酵原料的化学组成——糖
淀粉(starch)
α-1,4-糖苷键
α-1,6-糖苷键
1.1.1 发酵原料的化学组成——糖
β-1,4-糖苷键
1.1.1 发酵原料的化学组成——蛋白质
黄豆 豆粕
1.1.1 发酵原料的化学组成——脂肪
黄豆
三酰甘油 (油脂的主要存在形式)
蓖麻
油棕
麻疯树
1.1.1 发酵原料的选择原则
分批灭菌与连续灭菌
4.3 连续灭菌过程
优点:①①设设备备要要求求低低;;②②操操作作技技术术含量含低量;低;③适
用范围③广适,用适范合围于广含,有适固合体于颗含粒有或固较体多颗泡粒沫或培较养
分批灭菌 基的灭多④菌适泡;合沫④培于适小养合的基于的发小酵灭的罐菌发。;酵罐。
不足:①①对对培培养养基基营营养成养分成破分坏破较坏大较;大;②灭菌周
β-淀粉酶 (淀粉-1,4-麦芽糖苷酶)
葡萄糖
麦芽糖
2.1.2 淀粉水解糖的制备——双酶法制备葡萄糖

蒸汽
液化条件
淀粉状态:先加热糊化 温度: 80~90 ℃ pH :6.0~7.0
液化程度控制:碘液显色
4
6
6
1
55
23
10
7
12
11
13
89
1-调浆配料槽 2,8-过滤器 3,9,14,17-泵 4,10-喷射加热器
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