临床微生物项目与样本采集规范
临床微生物检验采集手册
微生物标本采集
第一章微生物样本采集及要求
1.患者准备（采集前）
1.1.采集标本前,采样人员根据检验申请单检验项目的要求，确认采样计
划并进行适当的准备工作，包括核对医嘱、打印条形码、选择合适的标
本容器、粘贴条形码及指导患者做好采样前的准备工作等。
1.2.样本采集依检验项目的申请，检验申请单提供的信息包括：
●a) 患者姓名；
●b) 患者性别；
●c) 患者年龄或出生日期；
●d) 患者唯一性标识，如病历号；
●e) 就诊病区和病房；
●f) 检验申请者姓名；
●g) 检验申请者科室；
●h) 标本类型；
●i) 标本采集部位；
●j) 检验项目；
●k) 标本采集日期和时间；
●l) 临床诊断和主要临床表现；
●n) 患者和检验申请者的联系电话。
1.3.认真核对患者、标本容器和检验申请是否一致，严防出现差错。
1.4.住院患者
1.4.1.申请单开具：分泌物、脓液、关节液、痰液等开“细菌涂片+培
养”，尿液标本开“尿培养及菌落计数”，血培养开“无菌体液
细菌培养”（血培养需要开一对，也就是两个医嘱），怀疑厌氧
菌开“厌氧菌涂片+培养”。
1.4.
2.检验人员接种标本后，当日报告涂片结果（尿液标本不涂片），
以接收标本之日起3-5天报告培养结果，如有特殊情况需要延长
检测时间，将与临床沟通。
1.4.3.如样本培养阳性，需要后续检测，则由检验人员开具“细菌鉴定
+药敏”并扣除相应费用。
1.5.门诊患者
1.5.1.申请单开具：分泌物、脓液、关节液、痰液等开“细菌涂片+培
养”，尿液标本开“尿培养及菌落计数”，血培养开“无菌体液
细菌培养”（血培养需要开一对，也就是两个医嘱），怀疑厌氧
微生物检查的标本收集原则
微生物检查的标本收集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查。采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型
时，而且必须在使用抗生素或其它抗菌药物之前采集.
2.采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低。
3.收集真正感染的病灶处的样本，且避免邻近区域常居菌群的污染。
4.采用专用无菌容器收集标本。容器须灭菌处理，防止渗漏，但不得使用消毒剂。标本中
不可添加防腐剂。
5.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法与容器收集足量的样本，尽量不要以棉
花拭子收集样本。采集量不应过少，而且要有代表性，同时有些标本还要注意在不同时间采集不同部位标本。如肠热症患者，发病的第1 周应采集血液，第2 周应采集粪便和尿液。否则影响细菌检出率。
6.采样后立即送检，最好在2h内。为保持微生物活性，棉拭子等标本宜放入恰当的运送
培养基送检。一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检，而其他所有的标本采集后最好在2h 之内送到实验室。若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，如尸检组织、支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4 ℃环境中。脑脊液、滑膜液等则要在25 ℃保存。一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h 。
7.混有正常菌群的标本，不可置肉汤培养。
8.每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关临床资料。
（要标明病区、病人姓名、住院号、标本来源、采集部位、采集时间等）
标本运送和验收
血培养
1采血后应该立即送检,如不能立即送检接种入血培养瓶，需室温保存,时间≤24h切勿冷藏! 2拒收培养瓶:血培养瓶标识与化验申请单不符,培养瓶破裂或明显污染，血液凝固的培养瓶。补做培养瓶:血标本采集后放置24h以上,用不适当类型的培养瓶收集标本,用过期的培养瓶收集标本,采血量不足等;建议补做血培养。
临床微生物项目与样本采集规范
BLAST比对
9
苛养菌、厌氧菌、少见菌
10
眼科医院角膜组织-----链格孢霉
杭州艾迪康少见菌分享
11
纤毛菌——血培养 12
女性.65岁，尿液标本 13
பைடு நூலகம்
苛养菌、少见菌
——艾迪康微生物实验室
伤口分泌物，泥土味很重， 咬琼脂，G+杆菌。
——链霉菌
14
15
2 微生物项目组合
16
临床标本的分类
规药敏定量试验(MIC)
47
四、痰液标本采集和运送 • 采集方式：漱口后，用力咳出 • 采集时间：用药前 • 送检：置无菌容器或运送培养基内立即送检
48
49
50
呼吸道组套
• 一般细菌涂片+一般细菌培养及鉴定+真菌培养及鉴定+嗜 血杆菌培养及鉴定+常规药敏定量试验(MIC)
51
咳痰途经口咽部
21
3 微生物项目采集 规范 22
正确的采取、处理与运送标本
临床医生最不能接受的微生物报告结果: 1.阳性率低！ 2.三种菌以上，疑是标本污染！
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微生物样本采样基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低。 4.采样后立即送检（最好在2h内,保存不超过24h ），甚至床旁接种尤其是厌氧培养，
临床微生物学检验标本的采集和转运共识
临床微生物学检验标本的采集和转运共识
1 范围
本标准规定了临床微生物学（病毒学、细菌学和真菌学）检验标本采集和转运的技术要求。本标准适用于开展临床微生物学检验的各级医疗机构及其临床微生物学实验室。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
WS/T 348尿液标本的收集及处理指南
WS/T 499下呼吸道感染细菌培养操作指南
WS/T 442临床实验室生物安全指南
WS/T 503临床微生物实验室血培养操作规范
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1微生物学检验标本 Clinical Microbiological Specimen
本文件微生物学标本指临床病毒学、细菌学和真菌学检验（包括涂片镜检、培养、抗原、抗体和分子技术等）所用的标本。
3.2紧急检查标本 STAT
因疾病可能危及患者生命而需要立即处理的标本。
3.3采样拭子 Sampling swab
用于采集含病原微生物标本的拭子，由两部分组成：① 涂抹棒：柄部常为塑料或铝杆，柄部的一端是具有吸附作用的采样头，采样头材质包括脱脂棉、合成聚酯纤维、聚酰胺纤维、人造丝和泡沫聚氨酯等；② 手柄：位于柄部的另一端，也可作为转运装置（容器或管）的帽。
3.4转运 Transport
标本由采样地点运送到检验地点的过程，分为内部转运（如使用
人工或气动传输等内部送样方式）和外部转运（如使用汽车、飞机或火车等外部送样方式）。
临床微生物样本采集规范-讲解版本
培养瓶消毒程序
打开血培养瓶塑料盖用75%酒精消毒血 培养瓶橡皮塞并擦干表面残余酒精→消 毒皮肤后用无菌注射器抽取血液从橡皮 塞处注入血培养瓶内→用75%酒精重新消 毒血培养瓶橡皮塞并盖好塑料盖→立即 送检。
血培养标本的运送
采集后的血培养瓶应在1小时之内送往 实验室。
20
2
>=36.3
40-60
2-3
采血时机
采血培养应该在使用抗生素之前进行 间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来 之前0.5小时采集血液，不知发热规律应在寒 战或发热后半小时后进行。
采集部位
推荐从外周静脉采集血液标本。 不推荐动脉血，因其诊断价值没有比静
脉血更大。 不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污
抗生素时代，感染仍是 人类健康的主要“杀手”
正确的采取与运送标本 是临床微生物检验成功的关键
如果标本采集与运送不当，即使有经验的实验室工作者 及最好的仪器设备也难以弥补在采集和运送标本时引入 的误差和错误。标本采取与运送的规范化是准确、及时 地向临床提供重要临床感染信息的基础；故标本采集与 运送是细菌培养检验质量保证的重要环节之一。
取活检标本，伤口表面定量培养不一定有意义。 代表性的标本应采自病灶活动区域或基底部有而不
仅仅是脓液。
临床微生物标本采集规范
标本收集部位
非无菌部位 眼 耳 呼吸道 肠胃道 泌尿道 皮肤 毛发
无菌部位 血液 骨髓液 胸膜液 腹膜液 关节液
一、血培养标本采集规范
一、血培养标本采集规范
（一）血培养检测指征 临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液 感染的患者 1. 发热（≥38℃）或低温（≤36℃） 2. 寒战 3. 白细胞增多（>10×109/L） 4. 中性粒细胞减少（<1×109/L）
（三）注意事项
1.生殖器是开放性器官，标本采集过程中应严格遵 循无菌操作规程以减少杂菌污染。
2.由于阴道正常菌群的存在而使细菌的分离鉴定 受到干扰，所以在采集女性生殖道标本时应注意尽 量减少或避免正常菌群的污染。
3.疑有宫腔感染，如遇产妇需行剖宫产，待胎儿 娩出后取宫腔分泌物，并同时取婴儿耳拭子一同送 检。
（3）最后用75%酒精脱碘，待酒精挥发 干燥后采血。
新生儿及对碘过敏的患者，只能用 75%酒精消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干 燥后穿刺采血。
2.培养瓶消毒程序： （1）用75%酒精（不要用碘液消毒）消毒 血培养瓶橡皮塞，作用60秒。 （2）用无菌纱布或无菌棉签擦去橡皮塞 表面剩余的酒精，然后注入血液。
❖ 革兰氏阴性菌血症
5 to 1000 organisms/ml
❖ 75%幼儿菌血症病人血液有＞100 organisms/ml
2024版年度临床微生物标本采集规范总结
对于不同种类的微生物标本，要分别使用不同的 采集器具，避免交叉污染。
采集后要及时将标本送往实验室，避免在运输过 程中发生污染。
2024/2/2
20
确保标本量足够且代表性好
2024/2/2
采集标本时要确保采集到足够 的数量，以满足实验室检测的
需求。
采集过程中要注意选择具有 代表性的部位进行采集，确 保标本能够真实反映患者的
02
正确的标本采集方法、时机和部位对于提高微生物检验的阳性
率和准确性至关重要。
准确的微生物学诊断有助于临床医生判断感染类型、确定治疗
03
方案和评估预后。
4
指导治疗意义
微生物标本的检测结果可以为临床医生提供针对性的抗生素治疗建议，避免滥用抗 生素。
对于一些特殊病原体感染，如结核分枝杆菌、真菌等，正确的微生物学诊断有助于 选择合适的治疗药物和方案。
2024/2/2
重症患者样本
对于重症患者，其样本也 应优先处理，以便医生及 时了解患者病情。
特殊项目样本
对于某些特殊项目，如细 菌培养、药敏试验等，也 应优先处理，以缩短检验 周期。
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及时反馈问题并改进工作流程
反馈问题
分析原因
在接收和处理过程中发现的问题，应及时反 馈给相关科室和人员。
对反馈的问题进行分析，找出问题产生的原 因。
临床微生物标本采集和运送基本原则
临床微生物标本采集和运送基本原则有：
第一，要及时采集微生物标本，做病原学检查。
第二，严格执行无菌操作，减少和避免污染。
第三，标本采集之后，要立即送到实验室，床旁接种可以提高病原菌的检出率。
第四，尽量的在使用抗菌药物之前采集标本，这样对于结果的影响比较小一些。
第五，以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭子或伤口拭子要立刻送检。第六，盛标本容器须经灭菌处理，不要使用消毒剂。
第七，送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。
第八，对于混有正常菌群的污染标本，要做定量或半定量培养，然后判断是感染菌和定植菌。
第九，对分离到的病菌，要做药敏实验，提倡分级报告和现实报告。
2022临床微生物标本的规范采集与送检(全)
再从另一部位采血接种另一个厌氧瓶 ➢ 一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单个血培养 ➢ 儿童厌氧菌感染机会不高，通常只需采集需氧瓶
2022临床微生物标本的规范采集与送检（全）
6. 采血量及标本运送
➢ 采血量：自动化血培养仪要求成人8-10ml/瓶，儿童1-5ml/瓶
2022临床微生物标本的规范采集与送检（全）
1 -30 个绅菌/ml 1 -20 个绅菌/ml 1 -300个绅菌/ml 1 -10个绅菌/ml
婴幼儿病人:
➢ 革兰阴性菌血症
5 -1000 个绅菌/ml
➢ 75%幼儿菌血症病人 ＞100个绅菌/ml
2022临床微生物标本的规范采集与送检（全）
7. 血培养的报告周期
➢ 95%-97%的有临床价值的绅菌会在3-4天内被自动血培养系统 检出，目前仍推荐5天的培养周期
• 肠杆菌科细菌 • 非发酵菌 • 链球菌属 • 肠球菌属
10.2h 12.2h 15.0h 12.7h
• 葡萄球菌 • 真菌
23.1h 39.9h
2022临床微生物标本的规范采集与送检（全）
张肖,等。实用医学杂志 2012年08期
临床分析：血培养较可靠的细菌
➢ 链球菌 ➢ 金黄色葡萄球菌 ➢ 脑膜炎奈瑟菌 ➢ 李斯特菌 ➢ 肠球菌 ➢ 弧菌属 ➢ 念珠菌
临床微生物标本采集和运送规范
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
10
ml
血培养的采集时间、数量和间隔
❖ 采集时间：据研究表明：细菌通常在病人寒战和发烧前 1小时进入血流，因此规范规定在病人发热高峰前1小时抽血。 考虑到方便操作，建议常规血培养应尽量在使用抗菌药物 前，于病人寒战或发热开始时30-60分钟内，同时于不同部 位采集2-3份血培养，除非怀疑有感染性心内膜炎或其他静 脉内感染，才可分开时段采集。
❖ 采血量：成人8-10ml，儿童1-3ml。 骨髓采集量1-2ml ❖ 采血时间和数量: ➢ 采血时间:在寒战或体温高峰到来之前0.5-1h，或于寒战
或发烧后1h内采血。
➢ 采血数量：尽量在使用抗菌药之前（感染性心内膜炎除 外），在24h内采集2-3份血培养。
➢ 采血间隔：在采集血培养后的2-5天内不需要再重复采血 （除外心内膜炎和导管相关性败血症）
❖ 标本运送：立即送检，室温保存，切勿冷藏。
8
血培养的采集规范
❖ 皮肤消毒程序（三步法）:①70％酒精擦拭静脉穿刺部位 待30s以上②用一根蘸有碘酊或碘伏的棉签消毒皮肤（1 ％-2％碘酊作用30s或10％碘伏60s），从穿刺点向外以 1.5cm-2cm直径画圈消毒。③70％酒精脱碘：用70％酒 精涂去碘液，待酒精干燥后采血。
❖ 采集方法：清洁中段尿法。采集中段尿时要先用肥皂 清洗女性的外阴和男性的外生殖器包括包皮内，然后 用清水冲洗。把开始的尿液弃掉，然后取中段的尿液。
临床微生物标本规范化采集和送检
艰难梭状杆菌需在厌氧环境中生存，建议在
床旁进行标本的采集及接种。接种后的标本
立即放入厌氧袋内，送至实验室。重复采集
标本，可提高阳性检出率。
粪便标本采集法
1.自然排便法
患者在干燥清洁便盆（避免使用坐式或蹲式 马桶）内自然排便后，挑取有脓血、黏液部 分的粪便2-3g（液体粪便则取絮状物1-3ml） 放入无菌便盒内送检。若无黏液、脓血，则 在粪便上多点采集送检。此为常规方法。
四)实验室拒收Fra Baidu bibliotek则
对于没有将患者和采集信息标识完整的标本应及时联系临床医师，补全信息对于标 本容器贴错标签、送检容器不合格、送检时间超过规定时间、样本保存不当、有明显的污 染等时应拒收。
第六节：生殖道标本
生殖系统感染主要包括外阴部病变、尿道炎、阴道炎、阴道病、宫颈炎、子宫 内膜炎和盆腔炎。病原体包括细菌、真菌、淋病奈瑟菌、解脲脲原体和人型支原 体、沙眼衣原体等。各类感染的临床症状和体征比较相似，临床不易区分。通过 检测明确诊断对于治疗，尤其是保证患者治疗依从性至关重要。
2. 直肠拭子法
用肥皂水将肛门周围洗净，将占有无菌生理 盐水的棉拭子插入肛门4-5cm（儿童为23cm）。棉拭子与直肠粘膜表面接触，轻轻旋 转拭子，可明显在拭子上见到粪便。将带有 粪便标本的棉拭子插入运送培养基，立即送 检。本方法仅适用于排便困难的患者或婴幼 儿，不推荐使用拭子做常规标本。
临床微生物检验标本的采集、运送及接种要点
采集时机
通常选择在患者使用抗生素之 前采集，以确保检验结果的准
确性。
采集方法
根据标本类型选择合适的采集 方法，如血液、尿液、痰液等
。
采集量
确保采集足够的标本量以满足 检验需求，同时避免浪费。
临床微生物检验标本运送
运送容器
选择无菌、防漏、有盖 的容器，确保标本在运
送过程中不被污染。
运送条件
运送时间
运送标识
粪便标本采集
自然排便
采集部位
采集自然排出的新鲜粪便，避免用棉签或 纸类擦拭肛门。
选取含有脓血、黏液等异常成分的粪便， 若无异常则多部位采集。
采集容器
应使用无菌、有盖、干燥的容器。
避免污染
采集过程中应避免尿液、水等污染。
呼吸道标本采集
01
痰标本
采集前应用清水漱口，深咳出痰液 至无菌容器中。
鼻咽拭子
02
根据采集部位和标本类型，指导患者进行相应的准备，如清洁
口腔、排空膀胱等。
签署知情同意书
03
在采集标本前，让患者签署知情同意书，确保患者了解并同意
采集过程和相关风险。
采集器具及试剂选择
1 2 3
选择合适的采集器具
根据标本类型和采集部位，选择适当的采集器具， 如无菌棉签、注射器、试管等。
选择适当的培养基和试剂
报告审核
微生物样本采集基本原则
微生物样本采集基本原则
微生物样本采集基本原则
微生物样本采集是临床微生物诊断的重要环节之一。严格遵循采集原
则对确诊疾病、选择适当用药等方面都有着重要的意义。本文将从采
集方式及注意事项两方面，分述微生物样本的采集基本原则。
一、采集方式
1.标本类型
不同的临床疾病需要专门的样本采集。如呼吸道感染应选择痰液、咽
拭子和鼻咽拭子等样本；中枢神经系统感染应选择脑脊液等样本。采
样时应选择合适的标本类型以提高检测率和准确性。
2.采集部位
除了标本类型外，不同疾病的采集部位也各异。如下呼吸道感染应集
成深喉部或痰栓所在部位痰液或咽拭子，而不是口腔或鼻腔的分泌物。应针对不同疾病得出相关采集部位。
3.采集数量
样本数量的不足会导致诊断结果的不确定性。在采集样本的时候，必
须收集足够的样本数量，确保微生物诊断的可靠性和准确性。
二、注意事项
1.避免污染
样本采集时候的卫生防护十分重要。手套、口罩和防护衣等装备必须佩戴得当，避免污染。在采集样本时也应该离开源头，避免空气中的颗粒污染。
2.采集前应进行预处理
采集前应进行处理，如使用无菌消毒剂处理采集部位、使用无菌设备采集样本等方法，以保障采集样本的质量。
3.采集后迅速送检
采集完成后应迅速将样本送往实验室进行检测。样本放置时间不宜过长，一般在采集后1小时内送至实验室为妥。
总结
微生物样本采集是临床微生物诊断过程中不可或缺的一部分，正确的采集方式和采集后注意事项在临床诊断中起着至关重要的作用。临床
医生应深刻了解微生物样本采集基本原则，提高采集样本的质量，为准确诊断、确定治疗方案等方面提供重要保障。
临床微生物标本采集与送检规范(试行)
临床微生物标本采集与送检规范(试行）临床微生物标本采集与送检是目前临床实验室诊断质量保证中
较为薄弱的环节，严重影响临床微生物学实验室对感染样本中致病菌的分离培养的阳性率和医院感染病原体监控，也影响临床诊断，合理选用抗菌药物，降低耐药菌的产生和提高感染的治愈率，而且对预测或及时发现医院感染的暴发流行、杜绝感染蔓延、研究医院感染的发病机制和环节、制定有效的医院感染控制措施等，均具有十分重要的意义。严格实施正确的微生物标本送检和检验方法，是做好医院感染病原体监测的关键。鉴此，希望临床各科能按照本操作规范采样送检.
一、医院感染标本的采集和运送基本原则
1．发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，我院总的医院微生物标本送检率应不低于40％。
2．尽量在抗菌药物使用前采集标本。
3．标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。
4．标本采集后立即送至实验室,床旁接种可提高病原菌检出率。5．以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭子或伤口拭子，应立即送检。6．盛标本容器须经灭菌处理,但不得使用消毒剂.
7．送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物.
二、常见医院感染标本送检方法
1．血液与骨髓
①通常采血部位为肘静脉.疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静脉点滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
②采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养基前，应更换针头或过火消毒针头.血培养瓶应在避光室温中保存,不必置
临床微生物标本采集和运送规范
与原送检部门联系，退回申请单，要求审核并重 送符合要求的标本。
与原送检部门联系，要求补充完整申请单或重贴 标签或重送标本。
➢ 7.采样后立即送检，最好在2h内。如不能及时送检，应将标本置 于适当的储存环境待送，但存放一般不能超过24h。
4
微生物检查的标本采集、运送原那 么
➢ 8.尽量不要以棉花拭子收集标本。以棉拭子采集的标 本如咽拭子、伤口拭子等宜插入恰当的运送培养基送 检。淋球菌培养等标本应使用专用的纤维拭子，不得 使用一般棉拭子。
5
二、临床各类标本的采集、 运送及保存标准
6
血培养的采集、Biblioteka Baidu送标准
❖ 采集程序: ❖ 皮肤消毒程序：推荐三步法 〔酒精→碘伏→酒精〕 ❖ 培养瓶消毒程序：75%酒精消毒 ❖ 静脉穿刺和培养瓶接种程序
❖ 采血量：成人8-10ml，儿童1-3ml。 骨髓采集量1-2ml ❖ 采血时间和数量: ❖ 采血时间:在寒战或体温顶峰到来之前0.5-1h，或于寒战
❖ 标本采集后立即送检，禁止冷藏！
16
粪便标本采集运送标准
❖ 采集时间：腹泻患者应在用药前、急性期采集；沙 门菌感染、肠热症应在第2周或第3周采集。
❖ 采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有脓血和黏 液的部位的粪便2-3克，〔如液状粪便取絮状物13ml〕盛于无菌的、密封的、不吸水的容器内送检； 对不易获得粪便患者及幼儿，可用直肠拭子采集。
2024版临床微生物标本采集规范
临床微生物标本采集规范
•微生物标本采集意义与原则
•临床常见微生物标本采集方法
•微生物标本采集注意事项与操作规范
•微生物标本运输、保存和处理流程目录
•临床微生物实验室检测技术应用与进展
•总结回顾与拓展思考
01微生物标本采集
意义与原则
准确诊断指导治疗
监测病情变化预防和控制感染
通过采集微生物标本，可以对病原体进行准确鉴定和分类，为医生提供准确的诊断依据。通过对微生物标本的连续检测，可以及时了解患者病情的变化情况，为医生调整治疗方案提供依据。
根据微生物标本的检测结果，医生可以选择针对性的治疗药物和方法，提高治疗效果。通过对微生物标本的检测和分析，可以及时发现和控制感染源，防
止感染的扩散和传播。
无菌操作正确选择采集部位采集足量标本及时送检01020304
在采集微生物标本时，必须严格遵守无菌操作原则，避免污染标本和引入外源性微生物。根据不同的病原体和感染类型，
选择正确的采集部位，以提高
标本的阳性率和准确性。
采集足够量的标本，以保证检
测的准确性和可靠性。
采集后的微生物标本应及时送
检，避免延误诊断和治疗。
血液标本
通过静脉采血或末梢采血获得，用于检测血液
中的病原体和抗体等。
尿液标本
通过患者自行排尿或导尿获得，用于检测泌尿系
统感染等。
粪便标本
通过患者自行排便或灌肠获得，用于检测肠道感染和寄生虫病等。
呼吸道标本
通过鼻咽拭子、喉拭子、痰液等获得，用于检测呼吸道感染和肺部感染等。
生殖道标本
通过阴道分泌物、宫颈分泌物、前列腺液等获得，
用于检测生殖道感染和性传播疾病等。
其他标本
如脑脊液、穿刺液、组织活检等，用于检测相应部位的感染和病变情况。
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一、血培养操作规范
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其它如组织、眼部标本等
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临床微生物检验项目
组套项目：
痰培养：包含标本类型：痰、咽拭子、肺泡灌洗液 一般细菌涂片+一般细菌培养及鉴定+真菌培养及鉴定+嗜血杆菌培养及鉴定+常规药敏定量试验 (MIC)
生殖道分泌物培养（女）：包括阴道分泌物、宫颈分泌物、后穹窿分泌物 ①支原体+衣原体+一般细菌培养及鉴定+常规药敏定量试验(MIC)+念珠菌培养及鉴定 生殖道分泌物培养（男）：包括前列腺液、精液、尿道分泌物 一般细菌培养及鉴定+常规药敏定量试验(MIC)+淋球菌培养及鉴定+淋球菌涂片
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六、生殖道标本采集规范 • 推荐使用男性或女性专用拭子，置运送培养基送检。 • 男性前列腺：用肥皂和水清洗阴茎头，通过直肠按摩前列
腺，用无菌拭子收集液体或使液体进入无菌管内。 • 男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2～4cm，旋转拭
子，至少停留20s，而使之容易吸收。
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• 女性阴道：擦除过多的分泌物和排出液，用2支无菌拭子 从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物。 1支需要涂片,1支拭子 做培养。
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31
血培养假阳性的危害
1、增加患者抗生素用量，破坏其 微生态环境 2、延长了住院天数 3、延误病情诊断 4、增加经济负担
防止皮肤寄生菌或环境微生物 污染
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关于采血的一些问题
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血培养送检指征（需100%送检率）
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采血时机
• 采血培养应该在使用抗生素之前进行，如已 应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之 前采血培养
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临床微生物检验项目
普通项目 真菌培养及鉴定+药敏：皮屑、指甲、趾甲、毛发等 厌氧菌培养及鉴定：深部伤口 检测类项目：衣原体检测，G/GM试验，内毒素检测/肥达外斐试验/ TSPOT： 院感类：空气、物体表面、手卫生、消毒液、消毒器械、内镜、透析液/透析用水
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• 若只送阳性菌株鉴定的情况，请按16S测序（自主定价） 或微生物质谱。
• 不可避免地受到污染 • 唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 ～ 109/ml。 • 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现
象。
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咳痰标本不合格，退检吗？
• 如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，白细胞小于10个， 应不做或仅在特殊要求时做培养。
• 如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污 染明显”。
• 一个项目一个标本
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• 因淋病奈瑟菌对温度相当敏感。应以专用拭子采集的标本， 应尽快送检（或床旁接种），不可置于冰箱保存。直接接 种标本于淋球菌专用培养基培养。
服用过这些物品，至少在5d后再采集标本。
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注意事项
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项目组合
• 一般细菌培养及鉴定+沙门菌和志贺菌培养及鉴定+真菌培养及鉴定+ 常规药敏定量试验(MIC)
• 一般细菌培养及鉴定监测患者肠道菌群失调； • 真菌培养及鉴定监测患者有无抗生素用量过渡，有无丝状真菌引起
的肠道腹泻； • 沙门志贺培养及鉴定为肠道常见致病菌。
液等全身各个部位的体液穿刺 • 采集方法同血培养；严格无菌操作，抗菌药物使用前采集
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• 采集足够的量（＞10ml），同时注入需氧和厌氧瓶； • 若标本量少（>2ml），可以只注入需氧瓶；若＜2ml，直
接床旁接种巧克力平板和血平板； • 再留至少0.5ml样本于无菌管内用于标本涂片。
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• 项目组套
临床微生物项目 与样本采集规范
汇报提纲
01
微生物新技术
02
微生物新项目组合
03
微生物项目采集规范
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1 微生物新技术
3
微生物新技术
• MALDI-TOF-MS • 16S rRNA和真菌ITS/D2（28S)测序
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微生物质谱仪
16S rRNA
6
• 判断16S rRNA序列扩增是否成功：经琼脂糖凝胶电泳在1500bp附近 出现条带，说明16S rRNA已经扩增成功。由于16S rRNA序列长度一 般1500bp左右。
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痰培养的送检次数
• 对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续 2～3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性 状出现改变；
• 怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送 检；
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五、大便培养标本采集规范
• 采集时间：用药前 • 采集方法：脓血和黏液；对不易获得粪便患者及幼儿，可
用直肠拭子采集后置保存液或输送培养基中送检。 • 送检：置无菌容器或运送培养基立即送检 • 避免在服用硫酸钡、油、镁或结晶物后立即采集标本；如
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BLAST比对
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苛养菌、厌氧菌、少见菌
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眼科医院角膜组织-----链格孢霉
杭州艾迪康少见菌分享
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纤毛菌——血培养 12
女性.65岁，尿液标本 13
苛养菌、少见菌
——艾迪康微生物实验室
伤口分泌物，泥土味很重， 咬琼脂，G+杆菌。
——链霉菌
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2 微生物项目组合
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临床标本的分类
• 宫颈：用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见，用拭子从宫颈上 拭去黏液和分泌物，丢掉拭子，用新的无菌拭子紧帖宫颈 内道轻轻采样。
• 后穹窿：送抽吸液。
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生殖道分泌物培养（女）：包括阴道分泌物、宫颈分泌物、后穹窿分 泌物 ①支原体+衣原体+一般细菌培养及鉴定+常规药敏定量试验(MIC)+念珠 菌培养及鉴定； 生殖道分泌物培养（男）：包括前列腺液、精液、尿道分泌物 一般细菌培养及鉴定+常规药敏定量试验(MIC)
规药敏定量试验(MIC)
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四、痰液标本采集和运送 • 采集方式：漱口后，用力咳出 • 采集时间：用药前 • 送检：置无菌容器或运送培养基内立即送检
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49
ຫໍສະໝຸດ Baidu 50
呼吸道组套
• 一般细菌涂片+一般细菌培养及鉴定+真菌培养及鉴定+嗜 血杆菌培养及鉴定+常规药敏定量试验(MIC)
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咳痰途经口咽部
一套血培养（一套为血培养及鉴定（需氧培养）+厌氧菌培养及鉴定（ 厌氧培养）+一般细菌涂片
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三、脑脊液操作规范
• 若标本量少（≥3ml），注入儿童瓶；若＜3ml，直接床旁 接种巧克力平板和血平板；
• 再留至少0.5ml样本于无菌管内用于标本涂片。
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• 项目组套 • 一般细菌涂片+一般细菌培养及鉴定+真菌培养及鉴定+常
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3 微生物项目采集 规范 22
正确的采取、处理与运送标本
临床医生最不能接受的微生物报告结果: 1.阳性率低！ 2.三种菌以上，疑是标本污染！
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微生物样本采样基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低。 4.采样后立即送检（最好在2h内,保存不超过24h ），甚至床旁接种尤其是厌氧培养，
7
16Sr DNA测序获得序列
GCATGCGGCGTGCTATACATGCAAGTCGAACGAACTCTGGTATTGATTGGTGCTTGCATCATGATTTACATTTGAGTGAGTGGCGAACTGTGAGTAACACGT GGGAAACCTGCCCAGAAGCGGGGGATAACACCTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAACAACTTGGACCGCATGGTCCGAGTTTGAAAGATGGCTTCGGCTA TCACTTTGGATGGTCCCGCGGCGTATTAGCTAGATGGTGGGGTAACGGCTCACCATGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGCCACATTGGG ACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGGTTTC GGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAACATATCTGAGAGTAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAG CCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAA GAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAA GGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGTATGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATACCGTAAACGATGAATGCTAAGT GTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCC GCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACTATGCAAATCTAAGAGATTAGACGTTCCCTTCGGG GACATGGATACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATTATCAGTTGCCAGCATTA AGTTGGGCACTCTGGTGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAA TGGATGGTACAACGAGTTGCGAACTCGCGAGAGTAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGTCGGAAT CGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCTGAGAGTTTGTAACACCCAAAGTCGGTGGGG TAACCTTTTAGGAACCAGCCGCCTAAGGTGACAGAGATGG
血培养（成人）：标本类型：全血 双套血培养（一套为血培养及鉴定（需氧培养）+厌氧菌培养及鉴定（厌氧培养）
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临床微生物检验项目
组套项目 粪便（住院患者）：包含标本类型：肛拭子、粪便 一般细菌培养及鉴定+沙门菌和志贺菌培养及鉴定+真菌培养及鉴定+常规药敏定量试验(MIC) 穿刺液、胸腹水： 一套血培养（一套为血培养及鉴定（需氧培养）+厌氧菌培养及鉴定（厌氧培养）+一般细菌 涂片 一般细菌培养及鉴定+药敏+真菌培养及鉴定+药敏：脓液、伤口分泌物、眼部分泌物、尿液等
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血培养阳性率统计
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血培养检出率
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血培养污染和假阳性
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血培养的套数
❖ CLSI建议方针 ➢ 对于每位需要血培养的患者需采取2至3套（一瓶需氧瓶和一瓶 厌氧瓶为一套）。婴幼儿则只采集一瓶需氧瓶培养。 ➢ 对于成年患者的血培养，只采单一的血培养是不允许的。因为单 一血培养的结果的临床意义很难解释。 ➢ 采血培养后的2至5天内，不需要重复采血培养，因为治疗后的2 至5天内血液中的感染细菌不会马上消失。
带菌样本
相对无菌样本
痰、咽拭子
尿液
生殖道分泌物：
女：阴道分泌物、宫颈分泌 物、后穹窿分泌物；
血管内导管 肺泡灌洗液
粪便
生殖道分泌物：
男：前列腺液、精液、尿道分 泌物
脓液、伤口分泌物、眼部分泌 物
无菌样本
全血、骨髓
脑脊液
胸腹水
穿刺液：关节腔积液、鞘膜 积液、盆腔积液、心包积液 等全身各个部位的体液穿刺 胆汁
• 间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来 之前0.5小时采集血液，不知发热规律应在 寒战或发热后半小时后进行。
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血培养采集流程
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血培养采集流程
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血培养采集流程
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血培养采集流程
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血培养采集流程
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血培养采集流程
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二、穿刺液操作规范
• （除血液、骨髓、脑脊液外）的无菌体液 • 胸水、腹水、关节腔积液、鞘膜积液、盆腔积液、心包积