免疫学检验的质量控制

（一）定量免疫检验
• 定量免疫检验通常需要使用全自动免疫分析仪，
在测定时须用校准品对仪器进行校准。
• 室内质控则应选择特定试剂盒或方法的测定范围
内的高、中和低三种浓度的质控品， 以监测不同 浓度标本测定结果的变化。
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（二）半定量免疫检验
• 半定量实验在免疫检验中比较少用，此类实验主 要有酶免疫试验、荧光免疫试验等，测定结果通 常以抗体的滴度、效价等表示。 • 半定量免疫检验质控要点在于在有阴性质控的前 提下，采用多个相应滴度或效价的抗体作为室内 质控品，与临床标本同时测定。
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• 最佳变异条件(optimal conditions variance，OCV) 是指在仪器、试剂和实验操作者等可能影响实验 结果的因素均处于最佳时，连续测定同一浓度同一 批号质控物20批次以上，即可得到一组质控数据， 经计算可得到其均值( X )、标准差(s)和变异系数 （CV），此CV即为OCV。
• 由于所用的仪器种类繁多，试剂盒品牌不一， 实验室工作人员业务能力的差异等，造成不同 实验室间的测定结果差异较大。
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• 临床免疫检验试剂盒保质期一般为6个月以上，有 些检验机构为了节约成本，分数次使用试剂盒，势 必会使酶标抗原处于溶解状态，影响试验结果。 • 试剂盒抗体储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成 • 抗体浓度越高（浓度大于10mg/ml），越稳定，易 保存；浓度低时，应加0.1%~1.5%的牛血清白蛋白 作保护剂。 • 酶标记抗体在应用防腐剂时要注意不能用NaN3。 • 抗体浓缩液应在-20℃保存，避免反复冻融。
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• 质控品（quality testing materisls）
又称质控物，是指含量已知并处于与实际标本相同 的基质当中特性明确的物质，这种物质通常与其他 杂质混在一起，故质控品必须按患者标本一样对待 进行检测。
1、室内质控品：用于临床实验室标本检测误差的控制 2、室间质评样本： 评价实验室常规测定的准确度 3、质控血清盘：用于特定的定性免疫测定试剂盒的评价 人民卫生出版社
• 如何保证检验结果的质量，在日常检测中如何贯 彻实施质量保证是免疫学检验的一个重要内容。
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第一节 免疫学检验质量控制的概念
• 免疫检验要保证检验结果的准确、可靠、及时、 有效，并尽可能使各实验室间检验结果有可比性， 这是免疫学检验质量控制的基本目的。
• 只有明确免疫学检验质量控制的有关概念，才能 真正理解免疫检验的质量控制，有助于准确、有 效地完成质量控制工作。
第二节 免疫检验质量控制的特殊性
• 免疫学检验方法的种类较多，其测定方法的灵敏 度和检验质量控制包括定量、半定量和定性免疫 检验三种类型。
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一、标准品 （一）标准品的概念和分类 • 标准品（standard）
所差异。
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生产技术 难度大
引起试剂 盒批间变 异原因是 多方面的
提纯方法 不好掌握 质量控制 要求较高 产品质量 不易稳定
每批原材
料的纯度
和活性都
有所差别
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四、检测试剂的稳定性
• 稳定性是体外检测诊断试剂随时间推移保持特性 一致性的能力，是试剂必须具有的基本属性，是 确保体外检测诊断试剂使用过程中安全有效的重
第三十章 免疫学检验的质量控制
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本章要点
1. 掌握免疫学检验质量控制的相关概念。 2. 掌握标准品的分类及基本条件。
3. 掌握定量、半定量和定性免疫检验的方法类型
4. 熟悉室间质量评价的方式、评分及意义。
5. 学会常用的免疫学质控图类型、结果判断及失控
的处理程序。 6. 熟练实验室确定人群中Cutoff值的主要方法
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免疫学检验质控常用国际标准品
标准品
类风湿关节炎血清 抗核抗体血清 ( 均质型 ) 人血清 IgG 、 IgA 、 IgM 人血清 IgD 人血清 IgE 人 AFP 人 CEA FITC —绵羊抗人 Ig FITC —绵羊抗人 IgM μ 链 血清蛋白(白蛋白、 α 1-抗胰蛋白酶、 C3 铜蓝蛋白、转铁蛋 白) 人补体成分 (C4 、 C5 、 Clq 、 B 因子 ) FITC —绵羊抗人 IgG γ 链 过氧化物酶标记绵羊抗人 Ig 抗 RNP 抗体 平滑肌抗体 线粒体抗体
• 偏倚（bias） 待测物的测定值与可接受参考值之间的差异。可 分为批内偏倚和批间偏倚，计算公式如下：
• 均值（mean） 一组测定值中所有值的平均值。计算公式如下： xi 均值（x ） n
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• 标准差（standard deviation，SD或S）
又称标准偏差，用来表示一组测定数据的分布情 况，即离散度。它是反映一组数据的精密度和离 散程度的最主要指标。其计算公式如下：数据的 分布情况。
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（二）理想标准品的基本条件
通常为含蛋白质的缓冲液，对测定结 果无明显影响。 标准品浓度在方法的测定范围即可。
标准品的 基本条件
在规定保存条件下具有良好的稳定性 无已知传染危险性，对已知的血液传 播病原体必须做灭活处理。 标准品浓度在方法的测定范围即可。 人民卫生出版社
二、定量、半定量和定性免疫检验
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• 运输模拟研究是将样本暴露于预先设定的改变的环境条件下 用于模拟产品在到达消费者前的过程中所能忍受的最坏的环 境条件，此研究结果用于确定检测试剂最适宜的运输和保存 条件，要求检测试剂至少有1个产品批号通过这种测试。
• 目前欧盟有关体外检测诊断试剂的法规规定：
对于长期稳定性研究，应采用3个批次产品； 对于模拟运输条件下的稳定性研究，可采用1个批次产品； 对于延长保存期限的稳定性研究，应采用3个批次产品； 对于可能影响稳定性的变更，可采用1个批次的产品。 人民卫生出版社
SD
2 ( x x ) i
n 1
或SD
1 1 2 2 x ( x ) i n i n 1
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• 变异系数（coefficient of variation，CV）
标准差与平均值之比用百分比来表示，即为变异系 数。CV是相对比，没有单位，更便于资料间的分析比 较。
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指含量明确的处于一定基质中其特性明确的物质， 通常用于比较检测未知的物质或成分。
• 标准品质量的优劣 直接影响样品的测定结果。
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• 根据标准品性质的差异，可分为三级：
一级标准品 二级标准品 三级标准品
为冻干品，内含 即国家标准品， 由二级标准品的 载体蛋白，数量 是由国家的有关 比对而来的，通 有限，可使用 权威机构制备， 常由实验室自己 10~20年。通常 供国家内部使用， 或试剂生产厂家 为国际标准品， 其效价单位与国 由WHO指定的实 制备。 际标准品一致 验室制备
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（三）定性实验
• 定性免疫检验是免疫学检验的重点，其测定方法有很多， 常以“有”或“无”也即“阳性”或“阴性”来表达测定 结果。 • 定性测定的室内质控要点是控制测定下限，设置临界 cutoff值（CO值）的低值弱阳性质控物是定性室内质控的 关键。 • 应选择靶抗原或抗体浓度接近试剂盒或方法的测定下限的 质控品进行室内质量控制，并与临床标本的测定同时进行， 这一点对于使用肉眼判定测定结果的方法尤为重要 人民卫生出版社
SD CV 100 % x
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• 误差（error）
待测物的测定值与客观存在的真值之间的差异。误 差包括系统误差和随机误差。 系统误差是实验过程中产生的误差，它的值恒定不变 或遵循一定的变化规律，通常是由仪器、方法以及操 作人员等因素引起。 随机误差则是一类不恒定的，随机变化的误差，主要 是由实验人员的操作等随机因素所致，该误差的出现 难以完全避免和控制。
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•常规条件变异(routine conditions variance，RCV) 是指在仪器、试剂和实验操作者等可能影响实验结 果的因素均处于通常的实验条件下时，连续测定同一 浓度同一批号质控物20批次以上，即可得到一组质控 数据，经计算可得到其均值( X)、标准差(s)和变异系 数（CV），此批间CV即为RCV。
三、检测试剂的批间差异
不同厂家 不同批号 同一批号 产品的质量、技术 含量的区别 原料来源、纯度不同 以及生产条件变动 地区储存、运输条 件不同
• 利用可靠的定值血清对购入的试剂盒进行性能 检测和批间差异评价，只有质量符合实验质量 要求的试剂盒方可用于临床实际检测工作。
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• 引起试剂盒批间变异原因是多方面的：
1、试剂盒的原材料是依靠生物工程技术生产的， 生产技术
要求难度大，工艺提纯方法不好掌握， 质量控制要求较高， 产品质量不易稳定，使每批原材料的纯度和活性都有所差别； 2、用不同的提纯方法及不同批号的抗原或抗体所制备的试 剂质量不一样； 3、同一批号的原料， 不同组装工艺， 其结果也不尽一样； 4、组装工艺相同， 质量标准控制稍有欠缺， 其结果也会有
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正态分布是质量控制图的理论依据，也是许多统 计方法的理论基础，正常情况下测量（或实验） 误差服从正态分布。
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二、质量保证的有关概念 • 质量保证（quality assurance，QA）
致力于为某一产品或服务满足特定的质量 要求，提供充分可信性所要求的有计划和系 统的措施。
IU / 支
100 100 100 100 11500 100000 100 100 100 100 100 100 100 -
建立的年份 Mg / IU
1965 1970 1970 1971 1973 1975 1975 1976 1978 1978 1980 1981 1982 1983 1983 1983 0.1710 0.1860 0.1847 0.8100 0.06562 0.001399 0.0236 0.0594 0.0447 1.1140 1.1070 0.0923 0.0316 -