P16基因与肿瘤
免疫组化p16ki67正常指标
一、概述免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）是一种通过利用抗体与抗原相互作用的技术，来检测组织细胞中特定蛋白的位置和数量的方法。
p16和Ki-67是两种常用的免疫组化标记物，它们在肿瘤诊断和预后评估中扮演着重要的角色。
本文将就免疫组化p16和Ki-67的正常指标进行详细介绍。
二、p16的正常指标p16蛋白是由CDKN2A基因编码的，其主要作用是抑制细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）4和6的活性，从而阻止细胞周期的进程。
在正常组织中，p16的表达通常很低，主要在细胞增殖受到抑制的状态下才会有上调的表达。
在成熟的分化良好的上皮细胞中，p16的表达往往很低，而在受到损伤或者病变刺激时，p16的表达会显著增加。
p16的表达水平在正常组织中往往是比较低的。
三、Ki-67的正常指标Ki-67是一种核蛋白，在细胞周期的G1、S、G2和M期都有表达，但在静止期的G0期是没有表达的。
在快速分裂的肿瘤细胞中，Ki-67的表达水平往往很高，而在正常组织中，Ki-67的表达水平通常很低。
在正常组织的成熟细胞中，Ki-67的阳性率往往很低，而在受到损伤或者刺激时，细胞增殖增加时，Ki-67的表达会显著增加。
Ki-67的表达水平在正常组织中往往是比较低的。
四、p16和Ki-67在肿瘤中的应用p16和Ki-67在肿瘤中的表达与肿瘤的发生、发展和预后密切相关。
在一些肿瘤中，p16的异常高表达与细胞增殖过程的异常有关，而Ki-67的异常高表达则与肿瘤的侵袭性和预后有关。
在临床实践中，医生可以通过检测p16和Ki-67的表达来评估肿瘤的生物学特征，为临床治疗提供参考。
五、结论免疫组化p16和Ki-67的正常指标对于肿瘤的诊断、分型和预后评估都具有重要意义。
正常组织中p16和Ki-67的表达水平往往是比较低的，而在肿瘤组织中，它们的表达水平往往是异常的。
通过检测p16和Ki-67的表达水平，可以辅助医生对肿瘤进行更准确的诊断和评估，为患者的治疗提供更科学的依据。
p16基因甲基化及其与肿瘤发病的关系
区 １带（ ９ ｐ ２ １ ） ， 其ｃ Ｄ Ｎ Ａ全 长 ４ ５ ０ ｂ ｐ 。ｐ １ ６基 因的外 显子 １ 可分 类为 Ｅ １ 和 Ｅ １ Ｂ， 两者的 ５ 端均存在 有启动 子 ， 从 而决 定了有 两种 转录方式 。Ｅ １ Ｂ 、 Ｅ ２及 Ｅ ３可编码 出 １ ８ ０个氨基
细胞失去控制 ， 进 入 旺盛 的 增 殖 转 化 过 程 ， 从 而 引 发 一 系列
蛋 白（ ｒ ｅ ｔ ｉ ｎ ｏ ｂ ｌ ａ ｓ ｔ ｏ ｍ ａ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ， Ｒ ｂ ） 的 回环 结 构 起 作 用 ， 使 之
不能对 Ｒ ｂ蛋 白的丝氨酸或 苏氨酸残基进行磷酸化使 其失去
序列 中， 与此 同时在 Ｃ ｐ Ｇ二核苷酸集 中的 区域 ，即小部 分的
长约 ３ ０ ０～ ３ ０ ０ ０ ｂ ｐ ， 核苷酸 Ｃ Ｇ 出现 率较 高且 较有 价值 的
２ ｐ １ ６基因在 抑制肿 瘤方面的作用
由状 态 的 Ｅ ２ Ｆ通 过 促 进 各 种 相 关 蛋 白表 达 持 续 地 让 细 胞 进 入 Ｓ期 并 进 行 Ｄ Ｎ Ａ复制 ， 细胞 进 入 Ｓ —Ｇ ， 一 Ｍ 期 。 由此 ｐ Ｒ ｂ
１ ｐ １ ６基因的结构及 其转 录特点
１ ９ ９ ４年 ，Ｋ ａ ｍ ｂ等 在 对 ２ ９ ０多种肿 瘤 细胞 系进 行检 测
ｃ ｙ ｃ ｌ ｉ ｎ Ｄ １竞争结合 Ｃ Ｄ Ｋ ４而特 异地 抑制 Ｃ Ｄ Ｋ ４的激酶 活性 ，
直接影响 Ｃ Ｄ Ｋ与 ｃ ｙ ｃ ｌ ｉ ｎ Ｄ的结合 ， 制 止 其 对 视 网膜 母 细胞 瘤
和 参与 Ｄ Ｎ Ａ损伤修 复过程的基 因。其 中抑癌基 因作用很 可 能是 负调控 癌基 因、 细胞周期检验点或者在没有胁 迫情 况下 提供 合适的营养物或 者组分 以高保真地 完成 细胞周期 分 裂 过程的基 因产物… 。所 以抑 癌基 因变异或 者失活 的结果是
P16、Ki—67和Bcl—2在宫颈上皮内瘤变中的表达及应用
P16、Ki—67和Bcl—2在宫颈上皮内瘤变中的表达及应用目的探讨P16、Ki-67、Bcl-2抗体在宫颈上皮内瘤变（CIN）中的表达及应用价值。
方法用快捷免疫组化染色法检测30例正常宫颈组织和66例CIN中p16、Ki-67和Bcl-2的表达，分析比较两组的标记结果。
结果CIN中p16、Ki-67、Bcl-2的阳性率显著高于正常宫颈（P﹤0.05），CINⅡ-Ⅲ的表达率显著高于CINⅠ（P ﹤0.05）。
结论P16、Ki-67和BCL-2抗体联合标记可作为病理诊断CIN和区分级别的重要参考指标。
标签：宫颈上皮内瘤变；CIN；p16；Ki-67；Bcl-2；病理诊断；组织芯片宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是宮颈癌的癌前病变。
根据鳞状上皮异型增生的程度分为CINⅠ、CINⅡ和CIN Ⅲ三个级别[1，2]。
上述病变在临床检查中无法区分，必须通过活检病理诊断才得以确诊。
及早发现CIN并准确进行分级，及时采取相应治疗措施是预防宫颈癌的有效方法。
临床恰如其分地治疗有赖于病理恰当的分级。
由于病理诊断是以显微镜形态学为基础的，尚缺少客观标准，而且宫颈活检常常是破碎的小标本，病理诊断误差在所难免。
如果有一些敏感和特异性的免疫组化标记物用于辅助诊断，可提高诊断质量，在避免过度治疗的同时减少漏诊。
本文旨在能找到一些有价值的免疫组化指标应用于CIN的诊断和分级，为临床治疗方案选择提供可靠依据。
1资料与方法1.1一般资料由美国泛普生物技术有限公司（PANTOMICS Inc，桂林）提供组织芯片（批号CIN1021）。
本文入选病例组织芯片均达到优良级，即：样本芯粒大小均匀；阵列无皱褶；镜下细胞结构清晰；着色定位明确。
在同一组织芯片中布阵96例，对照组（正常宫颈或仅轻度慢性炎）30例。
CIN66例（Ⅰ28例、Ⅱ18例、Ⅲ20例）对照组年龄29～52岁，平均43.3岁，CIN组年龄25～73岁，平均44.6岁。
多肿瘤抑制基因p16与肿瘤发生发展的关系
多肿瘤抑制基因p16与肿瘤发生发展的关系【关键词】多肿瘤癌症是人类面临的最大难题，随着分子生物学和基因工程的进展，使我们认识到肿瘤发生的关键是正常细胞内基因组发生了改变，基因改变是导致肿瘤的根本原因［1］。
近期的研究结果显示从肿瘤的诱发到进展是一个多阶段、多因素的复杂过程，这个复杂过程包括肿瘤基因的激活和肿瘤抑制基因的失活，肿瘤基因和肿瘤抑制基因分别以正性和负性调节细胞的生长，并参与肿瘤的形成［2］。
到目前为止，人类已发现100多个癌基因和10多种抑癌基因。
80年代中期抑癌基因被发现以来，其重要作用得到广泛认可，抑癌基因(tumor supress gene)是正常细胞在调控细胞增殖、分化等方面起重要作用的基因，它在保持基因组结构稳定、促进细胞生长、诱导细胞凋亡等方面均有重要意义，它的缺失或失活可引起细胞内癌基因(oncogene)的活化，造成细胞的过度增生、分化，导致恶性肿瘤的发生和发展。
癌基因和抑癌基因共同参与调节细胞周期活动的分子过程已为现今癌症研究的重要课题之一。
研究肿瘤发病的分子生物学机制，了解各种肿瘤细胞增殖周期中调控因子的状况，对于进行基因诊断、基因治疗无疑具有重大意义。
1 p16(MTS1)基因的发现和基本结构1992年美国Skolnick等在黑色素瘤患者中发现有与细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)相结合的蛋白，但这种蛋白的基因未被克隆出，随后对100个黑色素瘤细胞系采用染色体步移法和序列标记位点图进行分析，发现1/2的肿瘤细胞在染色体9p21区发生频繁的基因突变，推测该区域含有黑色素瘤的易感基因［2］，此后在许多人类肿瘤集及体外细胞系中均发现9p21区的缺失和突变。
1993年，美国长岛冷泉实验室研究的细胞先驱Serano等利用酵母双杂和蛋白相关性筛选法(yeast two-hybrid protein interaction screen)发现并分离了特异性的细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)抑制蛋白(CDK4I)-p16蛋白，证明p16与CDK4结合后cyclinD/CDK4复合物的催化作用明显降低，并克隆了p16的cDNA。
口腔癌与抑癌基因p16的研究进展
Ｌ 报 道 『】在 ｉ ｌ， ”
口腔 鳞 状 细 胞 癌 中 Ｍｉ 一 １可 以抑 制 肿 Ｒ ２
５ ５４ 广 东汕 头大 学 医 学院 第二 附属 医 院 ０１ １
ｄ ｉ １ ． ９ ９ ｊ ｉ ｎ ０ ７ —６ ４ ２ １ ｏ ： ０ ３ ６ ／ ． ｓ ．１０ ｓ １ｘ ０ ２
肿 瘤的早期 辅助诊 断 与预后 判 断。Ｃ ｅ ｈｎ 等在他 们发表的文献 中报道 ＪＦｊ ０４ ， Ｉ１５ ０ 呵以增 加 口腔鳞状细胞癌 的侵袭性 ， 其途 径 是通 过增 加 基质 金 属蛋 白酶 （ ＭＭＰ一
２ 的 活性 和 细 胞 的 Ｆ Ｘ ） Ｏ Ｍ１而 达 到 的 。 而 对 于 ｐ６的 过 失 表 达 和 凋 渊 节 Ｌ 子 １ 大 Ｊ Ｓ ｒｉ ｎ的 高表 达 ， Ｋ ａ ｕｖ ｉ ｖ 在 ｈｎ的研 究 报 道 中 称其可作为 口腔 颌面部 恶性 肿瘤 的早 期
１ ００ ３． ７
瘤细胞的凋亡 ， 也就足说如果 …现 ｒ高表
达 的 Ｍｉ Ｒ一２ 则 预示 此 口 腔 鳞 状 细 胞 癌 １ 的 预后 较 差 。Ｋ ｔ ｅ在 对 头 颈 颌 鳞 状 ｊ ａｓ ａ
皮 细胞 癌 的 研 究 中检 测 到 Ｄ ｋ一１Ｉ Ｕ ｋ Ｏ Ｓ Ｃ （０ ｌ． ） １ｑ １２ 等位 基 的缺失… 而此等位 ， 基 因 的缺 失 频 率 呵作 为 其 转 移 的 预 测 指 标 。 以 可 见 在 口 腔 颌 面 部 恶 性 肿 瘤 中 ｐ ６基 Ｌ的 改 变 是 很 普 遍 的 ， 与肿 慵 细 ｌ 太 Ｊ 其 胞 的发 生 及 转 移 等 行 为 有 关 ， 此 口腔 顷 面部 恶 性 肿 瘤 的预 后 与 ｐ ６蛋 白表 达 的 １ 状 况 关 系 密切 ， 可以 通 过 监 测 ｐ６蛋 白 表 １ 达 的状 态 ， 导 临 床 口腔颌 面部 恶性 肿 瘤 指 病 人 的治 疗 。 综 Ｉ 述 ， 量 的 研 究 都 表 明 ｐ６在 所 大 １ 口腔 癌 的发 生 发 展 过 及 预 后 中 起 着 重 要 的作 用 ， ｐ６蛋 白 的表 达 对 ｜ 但 ｌ 『口腔 颌 面部 恶 性 肿 瘤 的诊 断 和 预 后 判 断 的 意 义 在 现 阶段 的临 床 』还 缺 乏 统 一 结 论 ， ： 的 对 于 ｐ ６基 在 正 常 组 织 中 细 胞 周 期 调 节 １ 的作 用 机 制 以 及 基 因 间 的 相 互 协 涮 关 系 和在 口腔颌 面部恶 性肿瘤 中的具 体作 用
p16基因甲基化及其与肿瘤发病的关系林曦
细胞周期的失控与肿瘤发病有直接关系。细胞周期是 通过细胞分裂产生的新细胞的生长开始到下一次细胞分裂 形成子细胞结束为止所经历的过程，其中 G1 ～ S 期间的调节 具有决定性作用。细胞正常完成该期则进入 DNA 复制并使 后面的有丝分裂过程顺利完成［3］，要完成细胞周期，其必须 受到细胞周期蛋白依赖性激酶( CDK) 的活化。CDK 要与细 胞周期蛋 白 结 合 才 能 被 激 活，CDK 中 发 挥 主 要 作 用 的 是 CDK4 和 CDK6，而活跃与其结合的细胞周期蛋白各类中以 cyclinD1 更为重要［4 － 5］。
1 p16 基因的结构及其转录特点
1994 年，Kamb 等在对 290 多种肿瘤细胞系进行检测 时，发现了两个肿瘤抑制基因，并将其命名为多重肿瘤抑制 基因 MTS( multiple tumor suppressor) 1 和 MTS2。MTS1 基因 包含了 3 个外显子及 2 个内含子，其中 307 个 bp 组成的外 显子 2 编码的蛋白质是分子量为 16 kD 的单链多肽，故被称 为 p16 基因［2］。此基因的编码蛋白是 CDK4 活性的抑制因 子，因此也称 p16 INK4( inhibitor of CDK4) ，从属于抑癌基因 INK4 家族，现今认为 p16 基因位于人的 9 号染色体短臂 2 区 1 带( 9p21) ，其 cDNA 全长 450 bp。p16 基因的外显子 1 可分类为 E1α 和 E1β，两者的 5'端均存在有启动子，从而决 定了有两种转录方式。E1β、E2 及 E3 可编码出 180 个氨基 酸组成的 p16 蛋白，而 E1α 类转录方式编码 p16 蛋白仅由 148 个氨基酸组成。
起肿瘤的发生。p16 蛋白便从属于这类蛋白［6］。p16 蛋白与 cyclinD1 竞争结合 CDK4 而特异地抑制 CDK4 的激酶活性， 直接影响 CDK 与 cyclinD 的结合，制止其对视网膜母细胞瘤 蛋白( retinoblastoma protein，Rb) ［7］的回环结构起作用，使之 不能对 Rb 蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基进行磷酸化使其失去 活性，具有活性的 Rb 蛋白抑制了 DNA 合成所必需的转录因 子 E2F 等酶的表达，从而导致 G1 ～ S 期的阻滞，抑制细胞的 生长和分化，防止肿瘤发生。
免疫组化p16、Ki-67病理诊断宫颈上皮内瘤变的临床意义
免疫组化p16、Ki-67病理诊断宫颈上皮内瘤变的临床意义发表时间：2018-10-24T12:11:07.987Z 来源：《航空军医》2018年14期作者：陈大礼李曼妮[导读] p16、Ki-67表达和宫颈上皮瘤变发生、发展存在密切关系，依据两者联合检测结果可进行CIN分级。
（湖南省浏阳市人民医院 410300）摘要：目的对宫颈内皮瘤变诊断中p16、Ki-67的应用价值进行探讨。
方法选择我院2017年6月至2018年5月间收治的宫颈上皮瘤变患者90例作为实验组研究对象，其中包括CINⅠ30例、CINⅡ30例、CINⅢ30例，选择同期于我院健康体检者30例作为常规组研究对象，应用免疫组化技术测定并比较宫颈组织中p16、Ki-67表达。
结果实验组患者宫颈上皮内瘤变组织p16、Ki-67阳性率均显著高于常规组（P<0.05）。
同时随着宫颈上皮内瘤变等级增加p16、Ki-67逐渐上升，不同等级见差异显著（P<0.05）。
结论p16、Ki-67表达和宫颈上皮瘤变发生、发展存在密切关系，依据两者联合检测结果可进行CIN分级。
关键词：p16；Ki-67；宫颈上皮瘤变；免疫组化[Abstract] objective：to explore the application value of p16 and ki-67 in the diagnosis of cervical endothelial neoplasia.Methods：from June 2017 to May 2018 treated 90 patients with cervical epithelial neoplasia as experimental subjects，including CIN Ⅰ 30 cases，CIN Ⅱ 30 cases，CIN Ⅲ 30 cases，choose the same period in our hospital as a regular group of 30 cases of healthy physical examination were the research object，the application of immunohistochemical technique to determine and compare the expression of p16 and Ki -67 in the cervical tissue.Results：the positive rate of p16 and ki-67 in the cervical intraepithelial neoplasia of the experimental group was significantly higher than that of the conventional group（P<0.05）.At the same time，p16 and ki-67 gradually increased with the increase of the grade of cervical intraepithelial neoplasia（P<0.05）.Conclusion：the expression of p16 and ki-67 is closely related to the occurrence and development of cervical epithelial neoplasia.[Keywords] p16；Ki - 67.Cervical epithelial neoplasia；immunohistochemical宫颈上皮瘤变是指正常子宫经磷状上皮发展为癌的过程，为临床常见疾病，会严重影响患者健康和生活质量，并威胁患者生命安全。
p16基因甲基化及其与肿瘤发病的关系_林曦
起肿瘤的发生。p16 蛋白便从属于这类蛋白［6］。p16 蛋白与 cyclinD1 竞争结合 CDK4 而特异地抑制 CDK4 的激酶活性， 直接影响 CDK 与 cyclinD 的结合，制止其对视网膜母细胞瘤 蛋白( retinoblastoma protein，Rb)或苏氨酸残基进行磷酸化使其失去 活性，具有活性的 Rb 蛋白抑制了 DNA 合成所必需的转录因 子 E2F 等酶的表达，从而导致 G1 ～ S 期的阻滞，抑制细胞的 生长和分化，防止肿瘤发生。
CDK 可与一系列蛋白质即 CDK 抑制因子结合而被抑 制。这是一组参与细胞周期的负性调节的小分子蛋白质，当 这些蛋白发生缺陷时，必然会导致细胞的失控增殖，从而引
* 广西科学基金资助项目（ 编号： 桂科青 0832043） ，广西医疗卫生 重点科研课题资助项目（ 编号： 桂卫重 2011033）
▲在读硕士研究生 △通信作者。E － mail： hxp120@ 126． com
2 p16 基因在抑制肿瘤方面的作用
细胞周期的失控与肿瘤发病有直接关系。细胞周期是 通过细胞分裂产生的新细胞的生长开始到下一次细胞分裂 形成子细胞结束为止所经历的过程，其中 G1 ～ S 期间的调节 具有决定性作用。细胞正常完成该期则进入 DNA 复制并使 后面的有丝分裂过程顺利完成［3］，要完成细胞周期，其必须 受到细胞周期蛋白依赖性激酶( CDK) 的活化。CDK 要与细 胞周期蛋 白 结 合 才 能 被 激 活，CDK 中 发 挥 主 要 作 用 的 是 CDK4 和 CDK6，而活跃与其结合的细胞周期蛋白各类中以 cyclinD1 更为重要［4 － 5］。
1 p16 基因的结构及其转录特点
1994 年，Kamb 等在对 290 多种肿瘤细胞系进行检测 时，发现了两个肿瘤抑制基因，并将其命名为多重肿瘤抑制 基因 MTS( multiple tumor suppressor) 1 和 MTS2。MTS1 基因 包含了 3 个外显子及 2 个内含子，其中 307 个 bp 组成的外 显子 2 编码的蛋白质是分子量为 16 kD 的单链多肽，故被称 为 p16 基因［2］。此基因的编码蛋白是 CDK4 活性的抑制因 子，因此也称 p16 INK4( inhibitor of CDK4) ，从属于抑癌基因 INK4 家族，现今认为 p16 基因位于人的 9 号染色体短臂 2 区 1 带( 9p21) ，其 cDNA 全长 450 bp。p16 基因的外显子 1 可分类为 E1α 和 E1β，两者的 5'端均存在有启动子，从而决 定了有两种转录方式。E1β、E2 及 E3 可编码出 180 个氨基 酸组成的 p16 蛋白，而 E1α 类转录方式编码 p16 蛋白仅由 148 个氨基酸组成。
横纹肌肉瘤p16基因及其蛋白表达的研究解读
横纹肌肉瘤p16基因及其蛋白表达的研究关键词：横纹肌肉瘤；基因；抑制；肿瘤New Page 1 【摘要】目的探讨p16基因及其蛋白表达与横纹肌肉瘤发生发展的关系。
方法应用PCR-SSCP分析及免疫组化方法检测了44例人横纹肌肉瘤(RMS)中p16基因状态和47例RMS中p16蛋白表达情况。
结果 2例有p16基因纯合性缺失,6例突变。
p16基因异常的8例RMS中6例伴广泛浸润、复发或转移。
p16蛋白表达阴性率为38.3%(18/47例)。
p16基因异常的8例中有7例p16蛋白阴性,1例为阳性。
另有11例p16蛋白阴性而未查见基因异常。
在腺泡状横纹肌肉瘤中，p16基因异常发生率及p16蛋白表达缺失率均高于胚胎性横纹肌肉瘤。
p16蛋白阴性的RMS更易伴发广泛浸润、复发或转移。
结论 p16基因异常及p16蛋白表达缺失可能与部分横纹肌肉瘤的发生发展有关。
A study of p16 gene and its protein expression in rhabdomyosarcoma Gao Zhian, Zhang Shiyu, Yang Guanghua. Department of Pathology, First Medical School, West China University of Medical Sciences, Chengdu 610041【Abstract】 Objective To evaluate the relationship between alteration of p16 gene, its protein expression and the pathogenesis and development of rhabdomyosarcoma (RMS).Methods 44 cases of RMS were examined for alteration of p16 gene with PCR-SSCP and 47 cases of RMS were examined for p16 protein expression with immunohistochemical method. Results The homozygous deletion of p16 gene was observed in 2 cases and mutations in 6 cases.Of these 8 cases with altered p16 gene, 6 had extensive invasion, recurrence or metastasis. The total negative rate of p16 protein expression in RMS was 38.3% (18/47 cases). Of these 8 cases with alterations of p16 gene, negative expression for p16 protein was observed in 7 cases and positive in only 1 cases. In contrast, no structural abnormalities of the p16 gene were detected in another 11 cases with negative expression of p16 protein. Higher rates of p16 gene abnormality and loss of p16 protein were observed in ARMS than in ERMS. Higher rate of extensive invasion, recurrence or metastasis was also found in the group negative for p16 protein. Conclusion The abnormalities of p16gene and loss of p16 protein expression may be related to the pathogenesis and development of some RMS.【Key words】 Rhabdomyosarcoma Genes, Suppressor, tumor横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)是恶性程度甚高的常见软组织肉瘤，好发于儿童及青少年。
P65和P16在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及其临床意义
现代 II 嗲Modem Medical Journal2021, Feb ；49(2 )： 157-163• 157 •[13]Y O S H I D A T ,I N O U E T ,O M U R A N,et a l . Ureteral wall thickness as a preoperative indicator of impacted stones i n patients with ureteral stones undergoing ureteroscopic lithotripsy [ J ]. Urology ,2017,106 ：45-49.[14J M U G I Y A S,ITO T ,M A R U Y A M A S,et a l . Endoscopic featuresof impacted ureteral stones[J]. J Urol,2004,171 ：89-91.[15]S H I M P E I Y ,Y A S U O K ,T A K A S H I I,et a l . Ureteral wall volu m e at ureteral stone site i s a critical predictor for shock wave lithotripsy outcomes ： comparison with ureteral wall thickness and area[J]. Urolithiasis,2020,48(4) ：361-368..论P 65和P 16在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及其临床意义蒋中秀，崔国元，张晓晔(中国医科大学附属盛京医院第四肿瘤科，辽宁沈阳110020)[摘要]目的：探讨P 65和P16在皮肤恶性黑色素瘤（CMM)患者中的表达及其临床意义。
方法：采用免疫组化检测89例CMM 患者中P65、P 16的表达情况，统计患者的临床资料分析其表达与临床特征的相关性，采 用Kaplan-Meier 曲线对随访数据进行预后分析。
肿瘤标志物P16^(INK4A)在器官纤维化治疗中的研究进展
综述肿瘤标志物P16INK4A在器官纤维化治疗中的研究进展施建估，韦天文综述，刘加宝，王连生审校[摘要]P16m K4A蛋白又被称作细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子2A，通过影响细胞周期蛋白D和CDK4/6的结合阻遏 细胞增殖，促进细胞衰老。
肿瘤细胞通过细胞周期逃逸实现无限增殖，器官纤维化作为慢性疾病的终末状态会导致大量的衰 老细胞累积，在这两种疾病模型中均发现了卩16^^蛋白的阳性表达,同时将P16INK4A蛋白作为治疗靶点已经在纤维化疾病中 得到了应用。
文章就肿瘤标志物？16^«在器官纤维化治疗中的研究进展进行综述。
[关键词]P16I N K4A ;细胞衰老;肿瘤标志物;器官纤维化[中图分类号]R733 [文献标志码] A [文章编号]1008-8199(2021)01-0093-04[D O I] 10.16571/ki. 1008-8199.2021.01.017Advances of tumour biomarker P16INK4A in treatment of organ fibrosisSHI Jian-zhou, WEI Tian-wen reviewing, LIU Jia-bao, WANG Lian-sheng checking(Department o f Cardiology, The First Affiliated Hospital o f Nanjing Medical University^ Nanjing 210029, Jia n g su, China )[Abstract ] P161N K4A, also known as cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, inhibits cell proliferation by interfering the combination of cyclin D with CDK4/6, which promotes cell senescence. Positive expression of P16I N K4A has been discov-ered in the modes of tumour and organ fibrosis due to the infinite proliferation of tu-mour cells through cell cycle escape and the accumulation of senescence cells in organ fibrosis, an end stage of chronic diseases. Meanwhile, anti-fibrotic therapy targeting P16I N K4A has been in application. This article summarizes the advances of tumour biomarker P16I N K4A in the treatment of organ fibrosis.[Key words ] P161N K4A；cell senescence；tumour biomarker；organ fibrosis〇引 言P16_A蛋白是由ink4a基因编码的一种16 k D a的小分子蛋白，又被称之为细胞周期依赖性蛋 白激酶抑制因子 2A (cyclin-dependent kinase inhibit o r2A, C D K N2A)。
头颈部肿瘤多瘤抑制基因p16表达研究
头颈部肿瘤多瘤抑制基因p16表达研究傅新文;胡银英;宋晓萍;袁铿;郭江梅;袁佳蕾;李龚琼;刘利;张民宪【摘要】目的探讨多瘤抑癌基因蛋白p16表达与原发性和继发性头颈部肿瘤生物学行为之间的关系.方法通过细针吸取及术中印片细胞学诊断病例获取标本,进行免疫细胞化学技术分析,检测220例头颈部良、恶性肿瘤及其他病变中p16蛋白表达水平,并对头颈部肿瘤组织学类型、分化程度的关系进行分析研究.结果 p16蛋白在头颈部良性病变的阳性表达率为84.63%,明显高于恶性肿瘤的表达率53.90%,差异有显著性(P<0.05).p16蛋白表达与恶性肿瘤的细胞分化程度有关,高分化肿瘤其表达水平明显高于低分化肿瘤,同时显示p16蛋白表达程度与头颈部肿瘤大小及有无转移均无明显关联.结论多瘤抑癌基因蛋白p16参与了肿瘤的发生及分化,检测p16蛋白表达水平,可能成为肿瘤诊断和预测预后的一项新指标.【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2010(028)005【总页数】3页(P439-440,452)【关键词】多瘤抑制基因p16;基因表达;头颈部肿瘤/细胞学【作者】傅新文;胡银英;宋晓萍;袁铿;郭江梅;袁佳蕾;李龚琼;刘利;张民宪【作者单位】江西省人民医院,江西,南昌,330006;江西省医学科学研究所;江西省人民医院,江西,南昌,330006;江西省医学科学研究所;江西省人民医院,江西,南昌,330006;赣南医学院临床医学系;江西省妇幼保健院;江西省人民医院,江西,南昌,330006;南昌大学现代教育技术中心【正文语种】中文【中图分类】Q786%R730.43%R739.91多瘤抑制基因p16(multiple tumor suppressor l，MTS 1)作为一种新型的抑癌基因，它直接参与细胞周期的调控，可抑制细胞增殖及分裂，具有明显抑癌作用，p16基因或蛋白异常与肿瘤发生、发展及恶性程度密切相关。
检测p16基因表达水平对判断患者肿瘤的易感性以及预测肿瘤的预后具有十分重要的临床意义。
抑癌基因p16和肺癌
3I N FOR I GN M D I L TR TM NT中外医疗随着分子生物学技术的不断发展,细胞周期及其调控机制的研究也取得了长足的进步。
人们逐渐认识到细胞增殖失控是癌症的重要特征,调节细胞周期的分子机制参与肿瘤的发生。
近年来发现一系列细胞周期素依赖激酶(cyc l i n de pe nde nt ki nas es,C D K s)和周期素(cycl i n)结合,催化细胞周期进程;而周期素依赖激酶抑制剂(cycl i n-depende nt -ki nase-i nhi bi t or s,C D K I s)抑制它们的活性,是细胞周期的负调控因子。
在这些负调控因子中,p16基因是目前已确认的最重要的因子之一。
有关p16基因的研究已成为当前肿瘤分子生物学和分子遗传学研究的重要课题,它与肺癌的关系成为近来肺癌研究的热点。
下面就p16基因的分子生物学特性以及它和肺癌的关系作一综述。
1p16基因的结构和功能1993年,Se r r a no 等[1]利用酵母双杂合蛋白相关性筛选法(yeast t w o-hybr i d pr ot ei n i nt e r a ct i on sc r ee n)研究与C D K 4作用的蛋白时,发现了p16基因,并克隆了p16的c D N A 。
1994年,美国学者K a m b 等[2]发表了有关p16基因的研究工作结果。
应用克隆技术对46个人类恶性细胞系进行了研究,p16基因被定位于人类染色体9p21,全长8.5kb,由2个内含子和3个外显子组成,编码一种分子量为16kD 的核酸蛋白p16。
该蛋白包含一个148个氨基酸的开放阅读框架,并由4个回钩状重复序列组成其空间构型。
p16蛋白是CD K 4的抑制因子(CD K 4I ),在细胞周期中发挥着重要的作用。
p16蛋白在正常细胞中起负反馈调节作用。
我们知道,真核细胞的分裂增殖必须通过两个关键点:①D N A 合成开始的G 1-S 卡点;②有丝分裂开始时的G 2-M 卡点。
抑癌基因p16与胃癌的研究进展
ｐ１６基因甲基化阳性率明显高于高分化 型（８１．３％１）５ ４０．０％．Ｐ＜０．０５），有淋巴结 转移的胃癌组织中．ｐ１６基因甲基化阳性 率与无转移组的差异有显著性（８１．０％”ｓ ３０．Ｏ％．Ｐ＜０．０５）。认为ｐ１６基肉的高甲 基化与胃癌分化程度、淋巴结转移相关， 且ｐ１６基凼甲基化的发生从正常、癌前 病变到胃癌有逐渐增加的趋势。Ｙｕ Ｓｕｎ 等【１９ｊ报道胃癌组织和癌前病变组织的
ｐ１６基因的甲基化水平差异有显著性（Ｐ＝ ０．０４８），得出了ｐ１６基因的甲基化水平与 胃癌的恶性程度有相关性。此外。也有大
量的研究认为ｐ１６基因外显子２的异常 甲基化主要出现在低分化型胃癌和进展期
胃癌，认为Ｐ１６基因外显子２的甲基化程 度与胃癌的临床分期和进展有关．随着胃 癌进展其甲基化程度逐渐七升ｉ矧。总之， ｐ１６基因启动子ＣｐＧ岛异常甲基化是胃 癌发生发展中的常见分子事件。与胃癌的 恶性进展有一定的相关性．研究胃癌组织 中ｐ１６基因的甲基化情况可能对胃癌的 早期诊断以及治疗有一定的参考价值。 ５结语
ＤＮＡ甲基化是目前肿瘤病因学研 究的热点。被认为是ｐ１６基因失活的一 个重要机制ｕ８』。胃癌组织中存在基冈组普 遍低甲基化（如癌基因）和局部区域的过 甲基化（如抑癌基因）现象。ＤＮＡ异常甲 基化是一种典型的表遗传学表达机制 （ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ）．其甲基化后ＤＮＡ 的序列并未发生改变．ｆＨ基凼表达受影 响。目前的研究认为ＤＮＡ甲基化抑制基 因表达主要发生在转录水平．其町能的 机制有：（１）ＤＮＡ甲摹化直接干扰特异性 转录与各自启动子的识别位置结合…。 （２）通过在甲基化ＤＮＡ上结合特异的转 录阻遏物，或称甲基一ＣｐＧ结合蛋白而起 作用。这种蛋白质能与转录因子竞争甲 基化ＤＮＡ结合位点ｆ１０］。（３）通过影响染 色体结构，介导转录抑制。近年来。大量 的研究认为，ｐ１６基埘启动子区域ＣｐＧ 岛的甲基化是导致ｐ１６表达下调的主要 原凶之一．其在胃癌致病机制中的作用 远大于ｐ１６基因突变和缺失。 ４ ｐ１６基因与胃癌发生发展的关系 ４．１ ｐ１６基因突变及缺失与胃癌 １９９３ 年．Ｓｅｒｒａｎｏ等：“Ｊ发现了一种能特异性地 与ＣＤＫ４／６结合并抑制ＣｙｃｌｉｎＤ．ＣＤＫ４／６ 复合物活性的蛋白——ｐ１６。１９９４年， Ｋａｍｂ和Ｎｏｂｏｒｉ两个研究小组分别克隆
p16基因与乳腺癌关系的研究进展
用 在检 查点 （ ｃ ｈ ｅ ｃ ｋ ｐ ｏ ｉ ｎ ｔ ） ， 现今 认 为存 在 两 个 重 要 检
查 点—— Ｇ ／ Ｓ检 查 点 和 Ｇ ／ Ｍ检查点， 前 者 控 制 Ｄ Ｎ Ａ复制 ， 而后 者控 制细 胞有 丝分 裂 。细胞 通过 Ｇ ／ Ｓ检 查点 进入 Ｓ期 ， 则 完成 Ｄ Ｎ Ａ 复制 ， 并 易 于通 过 剩
蛋 白（ ｃ ｙ ｃ ｌ ｉ ｎ ｓ ） 相结合 ； 起 初他 们 的研 究 主要 集 中于 ３
个基因， 即 １ 号、 ９号染 色 体 长臂 和 ６号染 色 体 短 臂 。
后 期更 加关 注 于对 ９号染 色 体 的 研究 ， 并且发现有 ３ 条 证据 支持 ９号 染 色体 短臂 中段 的 ２ １区存 在一 个 等
用， 而 Ｃ Ｋ Ｉ ｓ 则 起 抑 制 作 用 。 细 胞 周 期 调 节 的 关 键 作
、
ｐ １ ６基 因 发 现
１ ９ ９ ２年 美 国 的 Ｔ ｒ ａ ｖ ｉ ｓ 在 研究 黑 色 素瘤 基 因 时 ， 发 现其 存在 某些 蛋 白能 够 与细 胞 周 期 蛋 白依 赖 激 酶 （ ｃ ｙ ｃ ｌ ｉ ｎ—ｄ ｅ ｐ ｅ ｎ ｄ ｅ ｎ ｔ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ｓ ， Ｃ Ｄ Ｋ ｓ ） 及 对 应 细 胞 周 期
位 基 因丢失 以及 另一 个保 留等位 基 因突变 ， 因此 推 测
余 检查 点 而 完 成 有 丝 分 裂 ， 因此 Ｇ ． ／ Ｓ的 调 节 更 为
重要。
Ｃ Ｄ Ｋ ４和 Ｃ Ｄ Ｋ ６是 参 与 细胞 周 期 Ｇ ／ Ｓ过 渡 调 节 中起关 键作 用 的细 胞 周期 蛋 白依 赖 激酶 ， ｃ ｙ ｃ ｌ ｉ ｎ Ｄ和 ｃ ｙ ｃ ｌ ｉ ｎ Ｅ为 参 与 该
P16基因甲基化状态与子宫肌瘤发生机制的研究
P16基因甲基化状态与子宫肌瘤发生机制的研究【摘要】目的：通过检测子宫肌瘤组织与相邻的正常子宫肌层组织的p16基因启动区甲基化的状态的差异性，以探讨子宫肌瘤的发病机理；方法：对2009年9月至2010年12月在我院就医的60例30-48岁妇女子宫肌瘤患者，采用甲基化特异性聚合酶链式反应（methylation-specific pcr, msp）法检测p16基因启动区域cpg 岛异常甲基化，可在一定程度上反应该基因失活情况，从肿瘤的分子生物角度研究妇女子宫肌瘤的特点及子宫肌瘤的发病机理；以及采用化学发光法检测雌孕激素受体，子宫肌瘤与雌孕激素受体水平的关系；以及采用统计方法分析数据，探讨p16基因启动区甲基化状态变化与雌孕激素受体水平的关系；结果：受体阳性细胞的百分数分为4级：阴性(一)，阳性细胞76％，细胞核深棕色；结论：甲基容纳和免疫组化测定了30例子宫肌瘤及其临近肌层组织总体dna 甲基化状态，发现与临近肌层相比子宫肌瘤组织呈现总体低甲基化，子宫肌瘤对雌、孕激素具有高应答性, 且雌激素受体(estrogen receptor, er)和孕激素受体(progesterone receptor, pr)高表达。
【关键词】p16基因；子宫肌瘤；发生机制【中图分类号】r361 【文献标识码】b【文章编号】1005-0515(2011)08-0304-02子宫肌瘤(hysteromyoma)是女性生殖器官最常见的良性肿瘤之一，多见于3o～5o岁妇女。
子宫肌瘤为良性肿瘤，但它们可无限制生长，且可发生癌变。
研究表明许多分裂素、原癌基因、肿瘤抑制物和其他分子与肌瘤发生相关，但没有一个因素或系统可以解释之。
基础与临床均证实性激素在其中起着决定性的作用，但其确切机制未明。
随着后基因时代的到来,已有更多的研究者从基因的表达方面来比较子宫肌瘤和正常子宫肌层的异同,从而找出有明显差异的基因变化,为进一步深入研究提供基础。
P16基因在喉癌中的表达
维普资讯
２０ ０６年 ９月 第 ３ 第 ９期 卷
Ｗｏｌ Ｈｅｌ Ｄｉ ｓ ｒ ｄ ａｈ ｇ ｔ ｔ ｅ
・
论 著 ・
Ｐ 基因在喉癌中的表达 １ ６
范锦 荣
（ 苏省滨海县人 民医院耳 鼻喉科 江
［ 摘
２４ ０） ２５０
Ｐ Ｒ １ 要］ 目 的 探 讨 Ｐ ６基 因的表达与喉癌 的关 系。方法 采用 ＲＴ— Ｃ 方法检测喉癌 中 Ｐ ６ｍＲＮＡ表 达情况 。 结 １ 论 Ｐ ６基 因在 喉癌 中的 １
２ 结果
２ １总 Ｒ Ａ的 检 测 ， Ｎ 可
见 ２Ｓ和 １ Ｓ条带明亮 、 晰 、条带锐利 ，并 凡２ Ｓ的亮度 在 ８ ８ 清 ８ １Ｓ条带的两倍 以 ，提示 Ｒ Ａ术降解 。Ｄ ６ ／Ｄ ８ ８ Ｎ Ｏ ２ ０ Ｏ ２ ０为 １８ ， ．２ 说明 Ｒ Ａ纯度满 意。结果见 图 １ Ｎ 。
９ ℃ 灭 活 ５ ｉ ， 再 即冰 浴 ，一 Ｏ ℃ 备 用 。 ５ ｍｎ ２
恶性肿瘤 的发生是 由于癌 基因被激 活、 癌基因失活所导 抑 致的癌细胞异常增殖 的结 果。 １ Ｐ ６基因是一种新 型抑 癌基因…，
１４引物 设计 ，
根据 Ｇ ｎ ａ ｋ提供 的 Ｐ ６基 因 已知序列 ｅＢｎ １
１ ５ Ｐ Ｒ扩增 ． Ｃ
总体积 ２ １ Ｐ Ｒ反应体系 ：喉组织总 ５ｕ Ｃ
p16基因多态性与鼻咽癌发生的相关性
［ ］ 叶建 荣 ， 瑾 ，郑 宏 ， ．不 同 麻 醉 方 法 对 行 单 侧 下 肢 手 术 老 Ｉ 俞 等
阮侠 ， 仲煌．髋关节手术新型麻 醉方式 ： 丛、 徐 腰 坐骨神经 及 椎旁神经联合 阻滞 ［ ］ Ｊ ．协 和医学 杂志 ， ０ １ ２ ４ ３ ６— ２ １ ， （ ）： ２
２０例鼻咽癌 患者 ，０ 正常人 群为研 究对 象。选取 ｐ６基 因 Ｓ Ｐ￣ ０ ３４ ６位 点作为遗传标记 ， ０ ２ ０例 １ Ｎ ８２ ５ ０ 用聚合 酶链 式
反应 一限制性片段长度 多态性 （ Ｃ Ｐ Ｒ—Ｒ Ｌ ） Ｆ Ｐ 和测序 方法检 测 ｐ ６基 因多态性及 其基 因突 变分布频 率。结果 １
Ｇ Ｇ Ａ Ｇ Ａ Ｇ Ａ Ｇ Ｇ 一 ３ ：下 游 ５ 一 Ａ Ｇ Ａ Ａ Ｇ Ａ Ｇ Ｇ ＧＡ Ｇ Ａ ．
１１ 一般 资料 ．
选取 ２ １ ００年 ３月至 ２ １ 年 ９月在 我 ０１
院放疗科住 院鼻咽癌 患者 （ 咽癌组 ） ０ 。男女各 鼻 ２０例
Ｇ Ｇ Ｔ ｃ Ａ １ Ａ Ａ一３。特异性 扩增 ｐ ６基 因产物 Ａ ｃ Ｇ ｃ ＡＴ ｃ ｒ １
片段 大小长为 １７ｂ 。 ８ ｐ
１２ ３ Ｐ Ｒ扩增 ２ Ｌ反应体 系含 ２×Ｐ ＲＴ ｑ ｘ ．． Ｃ ５ Ｃ ａＭｉ
△通信作 者。教授 ， 博士研 究生导师 ； Ｅ—ｍ ｉ ｚｕ ｉ ｄｎ １６ ＠ ａｌ ｈｘａ ｏｇ９ ６ ： ｏ
ｙ ｈ ｏ ｃ ｒ． ｎ ａｏ ．ｏ ｃ ｎ
疗等干 预措 施 的处 理 。主要 临 床 表 现 ： 颈部 包 块 ８ ４ 例； 鼻部症状 ： 血涕 ７ ０例 ， 鼻堵 ４ ２例 ， 鼻出血 １ ９例 ； 耳 部症状 ５ ６例 ； 头痛 ４ ３例 ； 神经 症状 ４ 颅 ８例 。对 照 组 ２０例 ， 同期 健康 体 检者 ， 女 各 １０例 ， ０ 为 男 ０ 年龄 ２ １～
p16基因在骨肉瘤中的表达
加 入 １ ７ ％ 乙 醇 ， 轻 轻 洗 涤 沉 淀 。 ４ 离 心 ， ｍｌ ５ ℃ １ ｏ ０ｃｘ ｍｉ ， 上 清 。 晾 干 ， 入 ２ ｆ Ｏ ０ ｒｆ ５ ｎ 弃 加 ０ ｌ的 ＤＥ Ｃ Ｐ
水 溶 解 （ ５ 促 溶 ｌ ～ ５ ｎ 。 甲 醛 变 性 胶 电 泳 检 测 ６ ℃ ０ １ ｍｉ ） 其 完 整 性 。 采 用 紫 外 分 光 光 度 计 ， 测 定 ｏＤ２ ０ 及 ６ ｏＤ２ ０值 ， 算 ＲＮＡ 总 含 量 。 ８ 计 １３ ． 逆 转 录 反 应
．
【 键词１ １ 关 ｐ ６；Ｒ — Ｃ Ｔ Ｐ Ｒ； 骨 肉瘤 【中 图 分 类 号 １ Ｒ７ ０２ ３ ．３ 【 献标 识码 】 Ａ 文
骨 肉 瘤 是 原 发 于 骨 组 织 的 常 见 恶 性 肿 瘤 ，约 占
１ ｒ ｏ， 匀 ， 温 静 置 ５ ｎ ｍｌＴ ｉ ｌ 混 ｚ 室 ｍｉ 。加 入 ０５ 氯 仿 ， ．ｍｌ
基 因 被 激 活 、抑 癌 基 因 失 活 所 导 致 的 癌 细 胞 异 常 增
殖 的 结 果 。ｐ ６基 因 是 一 种 新 型 抑 癌 基 因 ， 能 够 最 １ 它 直 接 的 抑 制 肿 瘤 发 生 ， 且 与 许 多 肿 瘤 的 发 生 发 展 密 切 相 关 ， 细 胞 增 殖 周 期 的 调 节 和 抑 制 者 。 抑 癌 机 是 其 制 与 细 胞 周 期 的 调 控 密 切 相 关 …。 目 前 有 关 ｐ ６基 １
时 期 的 四 肢 长 骨 ， 龄 越 大 ， 病 率 越 低 。 其 病 因 和 年 发 发 病 机 制 迄 今 尚 不 清 楚 。 恶 性 肿 瘤 的 发 生 是 由 于 癌
上 清 。 加 入 ０５ ．ｍｌ异 丙 醇 ， 管 中 液 体 轻 轻 混 匀 ， 将 室