白细胞介素-6和罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞VaspinmRNA表达的影响
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
４５ ． ８ ５；Ｒ ７７ ９ ．１；Ｒ ７ ９ ７．１ ５
Ｔ ｑ酶 （ 国 Ｐｏ ｇ 公 司 ） Ｖ ｓｉ ａ 美 ｒｍｅａ ， ａｐｎ和 Ｂ ａｔ －ｃ ｎ引物 ｉ 由大连宝 生物有 限公 司合成 。 １２ 细胞培 养及诱 导分化 ． 将 ３ ３ Ｌ 细 胞接种 于 Ｔ ．１ 培养 瓶 中 ， 用含 １ ％胎 牛血 清及 １０ｕ ｍｌ ０ ０ ／ 双抗 的高 糖 Ｄ Ｍ 培养液 （ ＭＥ 完全 培养液 ） ３ ￣ ５ Ｃ 的 在 ７Ｃ，％ Ｏ
文 献标 识 码 Ａ 文 章 编 号 １０ ００—１９ （ ０９ ０ —０２ ０ ４ ２ ２ ０ ） １ ０６— ６
条件 下培 养 ， 天更换 培养 液 ， 隔 当细胞 融合 至 ８％ ， ０
Ｖ ｓｉ ａｐｎ是 ２０ ０ ５年 Ｈ ｄ ｔ ｌ 新 识别 出来 的一 ｉａｅ ａ 种脂 肪细胞 因子 ， 于 由 内脏 脂 肪 组织 产 生 的 丝不是 Ｉ－ 表 ａｐｎ基 Ｌ６致胰 岛素抵抗 的位
点 。罗 格 列 酮 能 上 调 Ｖ ｓｉ Ｒ Ａ 的 表 达 ， 明 Ｖ ｓｉ ａｐｎｍ Ｎ 说 ａｐｎ可
格列 酮 （ 苏豪 森 药 业 ） 重组 小 鼠 Ｉ－ Ｐｐｏｅｈ 江 ， Ｌ６（ ｅｒｔ ｃ
Ａ ｉ 公 司 ） Ｔ Ｉｏ（ｎ ｉｏ ｅ ｓ ａ ， Ｒ Ｚ ｌ Ｉｖ ｒｇｎ公 司 ） Ｒ ｔ ， Ｔ试 剂 盒 及
酸蛋 白酶抑 制物家 族 ， 可 能是 某 一 种我 们 目前未 很
知 的蛋 白酶 的抑制 物 ， 过抑 制 该 蛋 白的活 性参 与 通 胰岛 素敏感性 的调节 。白细胞 介 素 （Ｌ６ 作 为一 Ｉ－） 种炎 症 因子 ， 与 了胰 岛 素 抵 抗 的发 生 和 发 展 ， 参 而噻 唑烷二 酮 （ Ｚ 类 药物 罗格列酮 是过 氧化 物 酶 Ｔ Ｄ）
１ 材料 与方法
１ １ 试 剂和材 料 ．
１ １１ ３ ３ ． ． ． Ｔ Ｌ １脂肪 细胞 １ １２ 试 剂 ． ．
本科 室 留存 。
Ｄ Ｅ 高糖 培 养 基 （ ｉ ｏ公 司 ） Ｍ Ｍ Ｇｂ ｃ ，
特级胎 牛 血 清 （ 州 四 季 青 生 物 工 程 材 料 有 限公 杭
能上调 Ｖ ｓｉ ｍＲ Ａ的表达 ， Ｉ一 罗格列 酮共 同作用 ａｐｎ Ｎ 用 Ｌ６和 于细胞 ， 罗格列 酮对 Ｖ ｓｉ ｍ Ｎ 则 ａｐｎ Ｒ Ａ表 达 的上调 作用 未受
能是噻唑烷二酮 （ Ｚ ） Ｔ Ｄ 类药物改善胰 岛素敏感性 的靶基 因。 主题词 噻唑烷二酮类／ 药理学 ； 白细胞 介素 ６ 胰 岛素抗药 ；
Ｒ ３９ ２ ；Ｒ ３ １ ４ ． ２ ９ ．２ ２ ．４ ４ ；Ｒ ３ ２ ２ ；Ｒ ３２ １ ；Ｒ 性 ； 细胞 脂 中图分 类 号
可用 于实验 。
１ ３ 实验设计 与分 组 ．
体增 殖 物 激 活 受 体一 Ｐ Ａ 一 （ Ｐ Ｒ ）的 配 体 ， 过 与 通
Ｐ Ａ ． 直 接结 合并 激 活其 活 性 ， 控 多种 基 因 的 Ｐ Ｒ＾ ｙ 调
转录， 显著增 强胰 岛 素 的敏 感性 Ｊ 。该研 究 旨在 通
用 ０２ ％的胰 蛋 白酶 消化 、 代 或冻存 。待 细胞 接 ．５ 传
触 抑制 ２ｄ后 ， 换用 含有 １ ｇ Ｌ胰 岛素 、． ｍ ｌ ０ｍ ／ １ ０Ｉ ｏ ｘ ／ Ｌ地 塞 米 松 、 ． ｍ ＬＬ 一 丁 基一一 基 黄 嘌 呤 ０ ５ ｍ ｏ／３异 １甲 （Ｂ Ｉ ＭＸ） 的完 全培养 液培养 ４ ， 去 ＩＭＸ和地 塞 ８ｈ 撤 Ｂ
米松， 使用 含有 １ ／ ０ｍｇＬ胰 岛素 的完 全 培养 液 继续
培养 ４ 后 ， 去 胰 岛素 ， 用 不 含 有 任何 诱 导 剂 ８ｈ 撤 使 的完全 培养液 培养 ， ２ｄ换液 一 次 ， 诱导 分化 第 每 至 ８～１ ，０ 以上细 胞 分 化成 脂 肪 细胞 表 型 （ 胞 ０ ｄ９ ％ 细 由梭形 变 圆 、 大 ， 质丰 富 ， 变 胞 含有 大量 的脂 滴 ， 滴 脂 富集 于核周 ， 形成 “ 环 样 ” 构 ） 油 红染 色 证 实 ， 戒 结 ，
孙
摘要 目的
莉 ， 长江 ， 王 代
芳， 张德 园
观察罗格列酮和白细胞介素＿（Ｌ６ 对 ３ ３ 一 ６ Ｉ一） Ｔ Ｌ
１ 肪 细胞 Ｖ ｓｉ Ｎ 脂 ａｐｎｍＲ Ａ表 达 的影 响 。方 法 体外 培 养 ３ ３ 一 前体 脂肪细 胞并诱导 其分化 成熟 ， Ｔ Ｌ１ 分别 以不 同浓 度
到显 著 影 响 。结 论 Ｉ一 Ｌ６对 Ｖ ｓｉ Ｎ 表 达 无 明 显 的 调 ａｐｎｍＲ Ａ
司 ）３异丁 基 一一 ，． １甲基 黄 嘌 呤 （ ｉ Ｓｇ ｍａ公 司 ） 胰 岛 素 ，
（ 江苏 万邦生 化 医 药 股份 有 限 公 司 ） 地 塞米 松 （ ， 浙 江仙琚 制药有 限公 司 ） 油红 Ｏ （ ｒ ｇ 司） 罗 ， Ｐｏ ａ公 ｍｅ ，
的罗 格 列 酮 和 （ ）Ｌ６干 预 ， 不 同 时 间 段 提 取 细 胞 总 或 Ｉ－ 在 Ｒ Ａ， 用 Ｒ —Ｃ Ｎ 采 ＴＰ Ｒ技 术 检 测细 胞 中 Ｖ ｓｉ ｍ Ｎ 的 表 达 水 ａｐｎ Ｒ Ａ 平 。结 果 Ｉ－ 罗 格 列 酮 分 别 作 用 于 分 化 成 熟 的 ３ ３ 一 Ｌ６和 Ｔ Ｌ１ 脂肪细胞 ， － Ｉ ６对 Ｖ ｓｉ ｍ Ｎ 的表 达 无 影 响 ， 罗 格 列 酮 Ｌ ａｐｎ Ｒ Ａ 而
・
２ ・ ６
安徽 医科 大 学 学报
Ａ ｔ Ｕ ｉ ｒｔｔ ｄ ｉ ｌ ｎ ｕ ２ ０ ｅ ；４ １ ｃ ｎｖ ｓａｉＭｅｉｎ ｉＡ ｈ ｉ ０９Ｆ ｂ４ （ ） ａ ｅｉ ｓ ｃ ａｓ
白细 胞 介 素 ． 和 罗格 列 酮对 ３ ３Ｌ 脂 肪 细 胞 ６ Ｔ －１ Ｖ ｓｉ Ｎ ａｐｎｍＲ Ａ表 达 的影 响
Ｔ ｑ酶 （ 国 Ｐｏ ｇ 公 司 ） Ｖ ｓｉ ａ 美 ｒｍｅａ ， ａｐｎ和 Ｂ ａｔ －ｃ ｎ引物 ｉ 由大连宝 生物有 限公 司合成 。 １２ 细胞培 养及诱 导分化 ． 将 ３ ３ Ｌ 细 胞接种 于 Ｔ ．１ 培养 瓶 中 ， 用含 １ ％胎 牛血 清及 １０ｕ ｍｌ ０ ０ ／ 双抗 的高 糖 Ｄ Ｍ 培养液 （ ＭＥ 完全 培养液 ） ３ ￣ ５ Ｃ 的 在 ７Ｃ，％ Ｏ
文 献标 识 码 Ａ 文 章 编 号 １０ ００—１９ （ ０９ ０ —０２ ０ ４ ２ ２ ０ ） １ ０６— ６
条件 下培 养 ， 天更换 培养 液 ， 隔 当细胞 融合 至 ８％ ， ０
Ｖ ｓｉ ａｐｎ是 ２０ ０ ５年 Ｈ ｄ ｔ ｌ 新 识别 出来 的一 ｉａｅ ａ 种脂 肪细胞 因子 ， 于 由 内脏 脂 肪 组织 产 生 的 丝不是 Ｉ－ 表 ａｐｎ基 Ｌ６致胰 岛素抵抗 的位
点 。罗 格 列 酮 能 上 调 Ｖ ｓｉ Ｒ Ａ 的 表 达 ， 明 Ｖ ｓｉ ａｐｎｍ Ｎ 说 ａｐｎ可
格列 酮 （ 苏豪 森 药 业 ） 重组 小 鼠 Ｉ－ Ｐｐｏｅｈ 江 ， Ｌ６（ ｅｒｔ ｃ
Ａ ｉ 公 司 ） Ｔ Ｉｏ（ｎ ｉｏ ｅ ｓ ａ ， Ｒ Ｚ ｌ Ｉｖ ｒｇｎ公 司 ） Ｒ ｔ ， Ｔ试 剂 盒 及
酸蛋 白酶抑 制物家 族 ， 可 能是 某 一 种我 们 目前未 很
知 的蛋 白酶 的抑制 物 ， 过抑 制 该 蛋 白的活 性参 与 通 胰岛 素敏感性 的调节 。白细胞 介 素 （Ｌ６ 作 为一 Ｉ－） 种炎 症 因子 ， 与 了胰 岛 素 抵 抗 的发 生 和 发 展 ， 参 而噻 唑烷二 酮 （ Ｚ 类 药物 罗格列酮 是过 氧化 物 酶 Ｔ Ｄ）
１ 材料 与方法
１ １ 试 剂和材 料 ．
１ １１ ３ ３ ． ． ． Ｔ Ｌ １脂肪 细胞 １ １２ 试 剂 ． ．
本科 室 留存 。
Ｄ Ｅ 高糖 培 养 基 （ ｉ ｏ公 司 ） Ｍ Ｍ Ｇｂ ｃ ，
特级胎 牛 血 清 （ 州 四 季 青 生 物 工 程 材 料 有 限公 杭
能上调 Ｖ ｓｉ ｍＲ Ａ的表达 ， Ｉ一 罗格列 酮共 同作用 ａｐｎ Ｎ 用 Ｌ６和 于细胞 ， 罗格列 酮对 Ｖ ｓｉ ｍ Ｎ 则 ａｐｎ Ｒ Ａ表 达 的上调 作用 未受
能是噻唑烷二酮 （ Ｚ ） Ｔ Ｄ 类药物改善胰 岛素敏感性 的靶基 因。 主题词 噻唑烷二酮类／ 药理学 ； 白细胞 介素 ６ 胰 岛素抗药 ；
Ｒ ３９ ２ ；Ｒ ３ １ ４ ． ２ ９ ．２ ２ ．４ ４ ；Ｒ ３ ２ ２ ；Ｒ ３２ １ ；Ｒ 性 ； 细胞 脂 中图分 类 号
可用 于实验 。
１ ３ 实验设计 与分 组 ．
体增 殖 物 激 活 受 体一 Ｐ Ａ 一 （ Ｐ Ｒ ）的 配 体 ， 过 与 通
Ｐ Ａ ． 直 接结 合并 激 活其 活 性 ， 控 多种 基 因 的 Ｐ Ｒ＾ ｙ 调
转录， 显著增 强胰 岛 素 的敏 感性 Ｊ 。该研 究 旨在 通
用 ０２ ％的胰 蛋 白酶 消化 、 代 或冻存 。待 细胞 接 ．５ 传
触 抑制 ２ｄ后 ， 换用 含有 １ ｇ Ｌ胰 岛素 、． ｍ ｌ ０ｍ ／ １ ０Ｉ ｏ ｘ ／ Ｌ地 塞 米 松 、 ． ｍ ＬＬ 一 丁 基一一 基 黄 嘌 呤 ０ ５ ｍ ｏ／３异 １甲 （Ｂ Ｉ ＭＸ） 的完 全培养 液培养 ４ ， 去 ＩＭＸ和地 塞 ８ｈ 撤 Ｂ
米松， 使用 含有 １ ／ ０ｍｇＬ胰 岛素 的完 全 培养 液 继续
培养 ４ 后 ， 去 胰 岛素 ， 用 不 含 有 任何 诱 导 剂 ８ｈ 撤 使 的完全 培养液 培养 ， ２ｄ换液 一 次 ， 诱导 分化 第 每 至 ８～１ ，０ 以上细 胞 分 化成 脂 肪 细胞 表 型 （ 胞 ０ ｄ９ ％ 细 由梭形 变 圆 、 大 ， 质丰 富 ， 变 胞 含有 大量 的脂 滴 ， 滴 脂 富集 于核周 ， 形成 “ 环 样 ” 构 ） 油 红染 色 证 实 ， 戒 结 ，
孙
摘要 目的
莉 ， 长江 ， 王 代
芳， 张德 园
观察罗格列酮和白细胞介素＿（Ｌ６ 对 ３ ３ 一 ６ Ｉ一） Ｔ Ｌ
１ 肪 细胞 Ｖ ｓｉ Ｎ 脂 ａｐｎｍＲ Ａ表 达 的影 响 。方 法 体外 培 养 ３ ３ 一 前体 脂肪细 胞并诱导 其分化 成熟 ， Ｔ Ｌ１ 分别 以不 同浓 度
到显 著 影 响 。结 论 Ｉ一 Ｌ６对 Ｖ ｓｉ Ｎ 表 达 无 明 显 的 调 ａｐｎｍＲ Ａ
司 ）３异丁 基 一一 ，． １甲基 黄 嘌 呤 （ ｉ Ｓｇ ｍａ公 司 ） 胰 岛 素 ，
（ 江苏 万邦生 化 医 药 股份 有 限 公 司 ） 地 塞米 松 （ ， 浙 江仙琚 制药有 限公 司 ） 油红 Ｏ （ ｒ ｇ 司） 罗 ， Ｐｏ ａ公 ｍｅ ，
的罗 格 列 酮 和 （ ）Ｌ６干 预 ， 不 同 时 间 段 提 取 细 胞 总 或 Ｉ－ 在 Ｒ Ａ， 用 Ｒ —Ｃ Ｎ 采 ＴＰ Ｒ技 术 检 测细 胞 中 Ｖ ｓｉ ｍ Ｎ 的 表 达 水 ａｐｎ Ｒ Ａ 平 。结 果 Ｉ－ 罗 格 列 酮 分 别 作 用 于 分 化 成 熟 的 ３ ３ 一 Ｌ６和 Ｔ Ｌ１ 脂肪细胞 ， － Ｉ ６对 Ｖ ｓｉ ｍ Ｎ 的表 达 无 影 响 ， 罗 格 列 酮 Ｌ ａｐｎ Ｒ Ａ 而
・
２ ・ ６
安徽 医科 大 学 学报
Ａ ｔ Ｕ ｉ ｒｔｔ ｄ ｉ ｌ ｎ ｕ ２ ０ ｅ ；４ １ ｃ ｎｖ ｓａｉＭｅｉｎ ｉＡ ｈ ｉ ０９Ｆ ｂ４ （ ） ａ ｅｉ ｓ ｃ ａｓ
白细 胞 介 素 ． 和 罗格 列 酮对 ３ ３Ｌ 脂 肪 细 胞 ６ Ｔ －１ Ｖ ｓｉ Ｎ ａｐｎｍＲ Ａ表 达 的影 响