鲤鱼氨态氮急性毒性试验
鱼类急性毒性实验
实验前24 h停止喂饲，每天清除粪便及食物残渣。驯养期间 死亡率不得超过10％，如果超过10％，则该批鱼不得用作实 验。
实验鱼应无明显的疾病和肉眼可见的畸形。
实验前两周内不应对其做疾病处理。
八、讨论与思考
1. 干扰鱼类LC50正常测定的因素有哪些？
2. 对一化学性质稳定的物质而言，试推测用
静态法、半静态法或动态法测定其对鱼类
(3) pH：6.0～8.0。
(4) 为避免对实验鱼不必要的扰动，实验液中溶解氧 > 4 mg/L。 (5) 水量：每克鱼0.5 L水以上。
2. 选自同一驯养池中规格大小一致的幼鱼。
实验前该鱼群应在与实验时相同的环境条件下，在连续曝气
的水中至少驯养两周。驯养期间每天投饵1次，每天换水1～
2次。
(2) 至少取6个容器，均加入标准稀释水。
其中一个为空白实验即对照实验， 以得到所要求的浓度范围。
表1 实验设计
浓度对数 1.00 0.80 0.60 0.40 0.20
其余容器中加入不同量的储备溶液， 浓度系列(mg/L) (3) 向每个容器中放入10尾或更多的实 验鱼。每个容器设3个平行样。
害的危险性；
阐明受试化合物急性毒性的剂量－反应关 系与中毒特征。
二、实验内容
根据静态测定法，用鲤鱼为试验生物测定
毒物在48 h后引起受试鲤鱼群体中50％鱼致
死的浓度。
在24 h，48 h记录试验鱼的死亡率，确定鱼 类死亡50%的受试物浓度，用LC50表示。
三、实验原理
急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24 h内多次)接触 外来化合物之后所引起的中毒效应，甚至引起死亡。
氨氮对草鱼幼鱼的急性毒性试验
表１ 氨 氮对 草鱼 幼鱼 的急性 毒性 试验 （ 平均 数 ±标 准 差 ，重 复数 ＝３ ） 非 离子 氨 总氨氨 浓度（ 毫 浓度 （ 毫 克／ 升） 克／ 升） ２ ４ 小 时 死 亡率 （ ％ ）
４ ８ 小 时 ７ ２ 小 时 ９ ６ 小时
式 ，非 离子氨 的毒性 是离子铵 毒性 的 ３ ０ ０ 倍 。Ｎ Ｈ 不
度组 的草鱼行为变化不 明显 ，而试验鱼接触高浓度氨 氮后，鱼苗开始急躁不安 ，随 即行动减缓 、侧游 、侧 翻 ，且体色变淡 ，出现 陆续死亡现象 ，死亡后 ， 口和
鳃盖张开 。
能渗过 生物表面 ，因此它对生物无 明显 的毒害 。以前 关于氨 的毒性 ，常 以总氨 （ Ｎ Ｈ 。 ＋Ｎ Ｈ ） 的浓度 表示 ，然 而在 ｐ Ｈ 值等 水质条件 不 同时 ，即使总氨 量一样 ，毒 性也 可能相差很惊人 ，而非离子氨浓度表示毒性 ，就
通过 ｐ ｒ ｏ ｂ ｉ ｔ 法 分析 得 出半致死 浓度 和 安全浓 度
结果见表 ２ 。草鱼 幼鱼在 ２ ４ 、４ ８ 、７ ２ 、９ ６ 小 时非离子 氨 半致 死浓 度 分别 为 ： １ ． １ ５ 、０ ． ８ ５ 、０ ． ６ ８ 、０ ． ４ ７ 毫
供准确 的基础数据 。
一
、
材 料 与方 法 省水产科学研 究所 同
批孵 化的鱼苗 ，在室外水 泥池暂养 ２ 周 ，日投喂饲料
两次 （ ８ ： ０ ０ 、１ ６ ： ０ ０ ） ，基本饱 食 ，暂 养期 问为 自然光 照 ，正式试验前饥饿 ２ ４ 小时 。 整 个 试 验 期 间温 度 为 （ ３ ３± １ ） ℃ ，ｐ Ｈ （ ７ ． ２ ±
安全浓度计算公式：
（ Ｓ ｃ ） ＝９ ６ Ｌ Ｃ 。 ×０ ． １
几种常用药物对锦鲤的急性中毒试验
１ １ 试 验 鱼 锦 鲤 （ ｒｃｒ ｄｃｒ） ． Ｂｏａｄ ａ 由安徽 省 农 科 院 水 产研 究 所 ｅ ｐ 品种 资 源研 究室 提 供 ， ． １５～２ Ｏ ｍ ．ｃ
１２ 试 验 药物
硫 酸铜 （ ｕ ０ ・ Ｈ Ｏ 为分 析纯 Ｃ Ｓ ４５ ＇ ） 产 地 ： 肥 医药 站化 玻部 合
４ ３ ．８ｍ／ｔ 安 全 浓 度 为 ９ ５ ｅ Ｌ 硫 酸 铜 ２１仰 ０ ３ ｇ ｔ４ ｎｍ 、０Ⅱ Ｉ 安 全 浓 度 为 ０ ０６ｉ Ｌ 孔 雀 石 绿 ２１ ８＇ ２５ ｃ ， Ｉ 【 、９ｍ ／ ； ４１ ．５ｍ ／ ．８ Ｏ ３ Ｊ ｇ， 、６ ｒ ｌ ； ４ ０．３ ｇ Ｌ ４１皿 ０ ｌｍｇｔ 安 全 浓 度 为 ０ ０８ｍ 、 ； 锰 酸 钾 ２１埘 ３ ５ ｍ ／ ，８１ ２ ７ｍ ／ ， 全 浓 度 为 ０． ｇＬ １ ｍ ／ ．８１ Ｏ ／ ． － 、１ ｇＬ 高 ４１ ．５ ｇＬ ４１埘 、５ ｇ Ｌ 安 － ５ ｍ ／ 。根 据 ０
报 道 较少 。
先 按适 当的 比例 从 低 浓 度到 高 浓 度 进行 ４ ｈ预试 验 ， ８ 根据 试验 结果 确 定试 验 浓 度 范 围 。按 等 对 数 间 距 设 置 ５个 浓 度组
及 １ 对 照组 ． 个 另外 每个 组设 两 个重 复 。
试验 液采 取 先配 制母 液 ， 按 要 求 采取 逐 步稀 释 的 方 法配 再 制成所 需 浓 度 药 液 。 试验 药 液 现 配 现 用 ， 验 鱼 放 人 各 组 药 试
ＳＣ。
经 长 期选 育 而产 生 的 突 变 种 。其 色 彩 斑 纹 美 丽 ． 型硕 长 ． 体 姿 态 矫健 。人 们称 其 为 “ 的宝石 ” “ 游泳 的艺 术 品 ” 活 ，会 。有 仅 风
危险化学品鱼类急性毒性分级试验方法
危险化学品鱼类急性毒性分级试验方法
一、试验方法
1.试验操作和准备
（1）实施鱼类急性毒性试验的测试物质为有害物质的样品或模拟物经过配制而成的试验悬浮液或其他溶液，应符合相关标准的要求。
（2）取试验鱼。
实施鱼类急性毒性分级试验时应使用健康的蓝腮青鱼，试验鱼的年龄应为3立方雷兹，体重应为2~3克，以头部节段截取，材料均匀性，当批次取用时应从不同缸中各取一样本数，每缸最多可取用50条试验鱼。
（3）测试液的配制：根据给定的浓度，称取适量的有毒物质，加入溶剂调成相应的浓度（如：30mg/L，1000mg/L，4500mg/L），悬浮液，再进行超声破碎处理，使悬浮液均匀稳定。
2.试验过程
（1）建立浓度梯度：根据试验设计，建立不同浓度的悬浮液（一般建立一个浓度梯度，以范围较大的高浓度为起点，以范围较小低浓度为终点）。
（2）将试验鱼放入测定浓度的悬浮液中，每一组10条，放入的体积为2.5升，其中放入的测定浓度的毒性物质为1.0克，分别测定各组死亡率、死亡时间、活捉率等指标。
（3）记录每组鱼反应后的死活情况，计算死亡率。
（4）毒性分级：根据试验结果，利用百分比死亡率法计算得到的各浓度的死亡率，计算试验物质的百分比死亡率，以此确定其分级。
三、结论
根据鱼类急性毒性分级试验结果，可得出有害物质的毒性类别。
例如：当百分比死亡率小于等于50%时，毒性类别为“低”；当百分比死亡率大于50%且小于等于90%时，毒性类别为“中”；当百分比死亡率大于90%时，毒性类别为“高”。
;。
氨氮对青海湖裸鲤水花鱼苗的急性毒性试验
《水产养殖》2019年第2期doi:10.3969/j.issn.1004-2091.2019.02.001青海湖裸鲤俗称“湟鱼”，属鲤形目，鲤科，裂腹鱼亚科。
是青海湖中唯一的水生经济动物。
具有耐寒冷、耐盐碱的特性。
养殖水体中氨氮通常是制约鱼类正常生长的重要因子之一。
在养殖过程中，尤其是高密度养殖模式下，当含量达到一定值时能够影响鱼类的行为、代谢、免疫等，对养殖个体产生毒害作用，诱发多种疾病，甚至导致大量死亡，造成巨大损失。
该试验研究氨氮对青海湖裸鲤水花鱼苗的毒性，对水体中氨氮对青海湖裸鲤的安全浓度和半致死浓度进行确定，为健康养殖青海湖裸鲤提供理论依据。
1材料与方法1.1材料该次试验采用的试验鱼为青海湖裸鲤“水花”鱼苗，来自青海湖裸鲤救护中心，全长为0.9~1.7 cm，试验中所用的鱼体表没有任何损伤，总生命特征正常。
试验过程中水温保持在16.5~17.0℃。
试验药品：分析纯氯化铵、分析纯氢氧化钠。
试验用水：经过曝气48h的自来水，水温16.5~ 17.0℃，pH值7.9。
使用容积为45L的玻璃鱼缸作为毒性试验容器，每个容器装20L试验液。
1.2试验方法遵照96h静水式急性试验规范进行，用干燥的氯化铵及氢氧化钠分析纯配置不同氨氮浓度。
氨氮浓度分别为0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50mg/L,根据青海湖裸鲤鱼苗养殖过程中池塘水中的实际pH 值，设置pH值为8.5且氨氮浓度梯度相同的试验组，并设置对照组。
测定水中pH值和温度，将试验用的青海湖裸鲤“水花”鱼苗随机在每个箱中放入20尾。
持续观察96h，及时打捞死亡个体。
试验中在24、48、72、96h分别记录试验箱中试验鱼的中毒症状及病死率。
1.3数据处理试验数据处理采用SPSS19软件分析引入概率单位归回算法，安全质量浓度（SC）采用下列公式求得：杂悦=0.1×96hLC50。
2结果2.1氨氮对青海湖裸鲤水花鱼苗的急性中毒试验试验开始时，低氨氮试验组青海湖裸鲤水花鱼苗活动正常与对照组相同，但高浓度对照组的青海湖裸鲤水花鱼苗游动剧烈，随着试验时间延长6h 后，出现游动迟缓、时上浮时下沉、身体侧卧和痉挛的症状，最终沉底死亡。
毒理学实验 鱼的急性毒性试验
毒理学实验一鱼的急性毒性实验背景知识急性毒性实验的主要目的是确定化学物质的毒性程度、剂量―反应关系，根据待测化学物质与其它已知毒性化学物质的相对毒性,推定具体的理化性质，测定其急性毒作用,以及提供毒作用模型方面的资料。
此外,这种研究也能指出化学物质可能的靶器官及其特异性毒作用,并对亚慢性毒性试验研究中所用剂量提供指南。
外源化合物的毒作用往往通过某一染毒持续时间的半致死量/浓度 (LD50/LC50), 或化学物质在空气中某一染毒浓度的半致死时间(LT50)，或用半数效应量 (ED50或 (EC50) 来估计表示（注：化学物质在水中浓度对水生生物如无脊椎动物、鱼虾的死亡不易鉴别时使用）。
水生生物的急性毒性试验广泛应用于水域环境污染监测工作中, 对控制工业废水的排放，保护水域环境，制定水质标准，发展水产品的生产，具有重大意义。
受试生物的急性实验有下列四种方式进行暴露试验即静态、循环、更新、动态, 但最常用的方法是静态与动态方法。
可提供下列的观测指标：①估计产生毒性作用的上限浓度，②估计不同种的水生生物对受试物的相对敏感性，③估计大量受试物的相对毒性，④估计水质对受试物毒性的影响(pH、溶解氧、盐度、硬度、悬浮物)。
⑤得出浓度―反应关系曲线及暴露时间的意义,动态实验可提高保持令人满意的实验条件的能力, 而且没有时间的限制。
因此它能给出暴露时间―反应关系比较完美的估计。
水生生物的急性毒性的实验应当设计成为能得到计数标准的反应(有或无,生与死)，受试污染物浓度与暴露生物中受影响生物的百分比之间的关系，可画出浓度―死亡率曲线。
急性实验结果可表示每一实验浓度中死亡或不动生物的百分比; 从观察内插法或计算中得出 LC50，或 EC50及相应的 95% 的置信区间。
实验目的本实验通过观察在不同受试物浓度处理下，鱼的急性中毒表现和经过，了解和基本掌握测定毒物的半数致死剂量/浓度（LD50/LC50）的方法，了解受试物剂量和生物反应的关系及计算表示方法。
3种水产药物对鲈鲤和白甲鱼的急性毒性试验
摘 要 ：在水温(22±1) °C 、溶解氧(6. 7±0. 5) mg/L 、 pH 7. 9±0. 2 条件下，采用静态水生生物急性毒 性试验方法研究了聚维酮碘、敌百虫和氯胺T 3 种水产药物对鲤幼鱼[体质量(36. 71±4. 91) g]和白 甲鱼幼鱼[体质量(21. 55±4. 68) g]的急性毒性。试验结果显示，聚维酮碘、敌百虫和氯胺T 对鲈鲤幼 鱼 96 h 半致死质量浓度分别为65. 13、2. 89 mg/L 和 10. 79 mg/L ;安全质量浓度分别为19. 76、0. 89 mg/L 和 2. 96 mg/L 。聚维酮碘、敌百虫和氯胺T 对白甲鱼幼鱼96 h 半致死质量浓度分别为79. 95、 1. 49 mg/L 和 13. 62 mg/L ;安全质量浓度分别为24. 92、0. 26 mg/L 和 3. 48 mg/L 。3 种药物对鲈鲤幼
鱼和白甲鱼幼鱼的毒性大小均为敌百虫> 氯胺丁>聚维酮碘。根据有毒物质对鱼类毒性的评价标准，
敌百虫对納鲤和白甲鱼幼鱼是中毒药物，氯 胺 T 和聚维酮碘对其是低毒药物。
关键词:納鲤;白甲鱼;水产药物;急性毒性;半致死质量浓度;安全质量浓度
中 图 分 类 号 ：S965. 1
文 献 标 识 码 ：A
文 章 编 号 ：1003-1111(2018)05-0628-06
根据预试验得出的结果，在 试 验 鱼 24 h 全致死 质 量 浓 度 和 96 h 无死亡质量浓度间按等对数间距 设 置 5 个质量浓度组(表2〜 表 3)，每个质量浓度组 设 2 个平行，另 设 1 个空白对照Байду номын сангаас，每个试验组放幼
高碱区氨氮对养殖鱼类急性毒性试验
表１ 不 同浓度 氨 氮急性 毒 性试验 结果
种类 非离 子氨 浓度 总氨 氮浓度 （ 毫 克／ 升） （ 毫 克／ 升）
鲤鱼 草鱼 ３ ． ２ ８ ２ ． ４ １ ７ ． １ ４ ５ ． ７ ４
水 温 等水 质 条 件 不 同时 ，即 使 总 氨 浓 度 一 样 ，其
＿ Ｉ 囫旦 ｛ 旦 塑塞 堑 堑
的摩 尔 百分 比值 。 二 、试 验结 果
１ ． 氨 氮对鱼 类行 为 的影响
草 鱼 、鲤 鱼 从 鱼 池 水 转 入氨 氮 水 体 后 ，低 氨 氨 氮 是 水 产 养 殖 过 程 中一 项 重 要 的 水 质 因 子 ，需定期检 测 ，而检测 的结果均 是总氨 浓度 ，
因条 件 所 限未 设 置 重 复 组 ， 结果 可 能存 在 一 定偏 差 ，但 结果对 实 际生产 仍 具有 一定 的指 导意 义 。
（ １ ） 氨氮 浓 度 设计 ：根据 相 关 资料报 道 ，在 非 离子氨 １ ． ５ 毫 克／ 升 以上 设 计 浓 度 梯 度 ４ 个 ，分 别
为１ ＿ ５ 、２ ． ０ 、２ ． ５ 、３ ． ０ 毫 克／ 升。
（ ２ ） 急性 毒性 试 验 设计 ：从捞 取 的草 鱼 、鲤 鱼 中随机选 取 １ ４２ 尾 放 入 调 好 氨 氮 浓 度 的 塑 料 桶 中 ，观察 记录 鱼 的反 应变 化 。
３ ． 数 据 分析
通 过 试 验 ， 草 鱼 对 非 离 子 氨 的 安 全 浓 度 为 １ ． ０ ６ 毫 克／ 升 ，在 非 离 子 氨 浓 度 为 １ ． ５ ７毫 克／ 升 时 ，草 鱼 出现 了慢 性 中毒 症 状 ，但 未 死 亡 ，在 非 离子 氨 浓度 为 ２ ． Ｏ ６ 毫 克／ 升 以上 时 ，试 验 草 鱼 、鲤 鱼 会 在极 短时 间 内死 亡 。 在 实 际成 鱼 养 殖 生产 过 程 中 ，非 离 子氨 浓 度 宜低于 １ ． ０ 毫 克／ 升 以下 。养 殖 过 程 中 应注 意 氨 氮 浓 度 调 控 ，及 时 更换 新 水 ，降低 水 体 ｐ Ｈ值 ，减 小 氨 氮对 养殖 鱼类 的毒 害 ，将 有 利于鱼 类健 康 生长 。
氨氮对锦鲤的毒性影响研究
＿ ５ ｌ ２０
蹇ｏ ２ ０
避 １０ ５
５ Ｏ ０ Ｏ０ ． ０５ ． Ｊ０ ． １５ ． ２０ ． ２５ ．
要 的保护作用 。 如 图 ５ 示 ， 当水 中氨氮 浓度 在 １ ０ 克／ 以 所 ．毫 升 下 时，对锦鲤体 内超氧化物歧化酶 活性影 响不大 。但 当氨氮浓 度大 于等于 １ ０ 克／ ．毫 升时 ，超氧化 物歧化 活性 明显 降低 。
克／ 升时 ，蛋 白酶活性则明显 降低 。 （） ３ 氨氮对 锦鲤脂肪 酶活性 的影 响 （ ） 图３
３０ ５ ３０ ０
—
●超氧化物歧化酶
００
０５ ．
１０ ．
１５ ．
２０ ．
２５ ．
氧氮浓度 （ 毫克／ 升）
图 ５ 氨 氮对 锦 鲤 体 内超 氧 化 物 歧 化 酶 活 性 的影 响
一氯氮 过 化晦
淀粉酶 、蛋 白酶、脂肪 酶、过氧化氢 酶、超氧化物 歧 化酶 的活性都有显著影响 。
氨 氮 对 锦 鲤 有 一 定 的 毒 害 作 用 ，但 浓 度 小 于
００ ０５ ． １０ ． １５ ． ２０ ． ２５ ．
氯氮浓度 （ 毫克／ 升）
１０ 克／ ．毫 升时 ，毒性 较 小 。在 养殖 水体 中 ，氨氮 一
具有 同样 的规律 。由图３ 以看 出，水 中氨氮浓度越 啪 咖 螂啪 猢 啪 ０ 可
高 ，锦鲤体 内脂肪酶 的活性越低 。但 当水 中氨氮浓度 在 １ ０ 克／ 以下 时 ，对锦 鲤体 内脂肪 酶活性 的影 ．毫 升
响较小 。但氨氮浓 度大 于 １ ０ ． 毫克／ 时 ，对脂 肪酶 升
影 响较大 ，其活性 明显降低。 （） ４ 氨氮对锦鲤过氧化氢酶活性 的影响 （ ） 图４
养殖水体氨氮含量对鲤鱼养殖的影响
2018年第7期养殖水域生态环境的良好状态是保证鱼类生长、生存的重要条件，当养殖水域水质状况较差时，会影响鱼类正常生长发育，甚至还会引起死亡。
养殖水体中氨氮主要是由水中残饵、有机废物经细菌分解所产生，是养殖水环境中重要的污染胁迫因子，它能直接对水生动物的鳃组织造成损害，甚至影响养殖动物的免疫、呼吸等生理代谢功能，从而抑制其生长和存活。
本研究以松浦镜鲤为研究对象，研究了松浦镜鲤在室内人工养殖过程中，养殖水域（水族箱）氨氮变化情况，同时探讨了氨氮变化对松浦镜鲤的影响，以期为养殖水域氨氮毒性效应评价技术提供一定的理论依据。
1材料与方法试验所用松浦镜鲤来自肇州渔业养殖场，平均体重(55.45±5.56)g/尾，体长(14.51±0.73)cm/尾。
试验前将松浦镜鲤置于水族箱(规格：145cm ×49cm ×80cm)中暂养2周。
试验用水为曝气后自来水，水温为18±0.5℃，光制为12L:12D 。
从暂养2周的鱼中挑选身体健康、体重接近的松浦镜鲤60尾作为试验对象。
将选出的松浦镜鲤随机分为2组（试验组1，试验组2），每组三个重复，分别置于水族箱(规格：145cm ×49cm ×80cm)中，开始正式试验。
水质氨氮检测试剂盒购自北京桑普生物化学技术有限公司。
水质调节微生态制剂购自哈尔滨南岗区盛泽实验用品经销部。
试验期间，使用充气泵24h 不间断充气，保证供氧充足。
控制水族箱水温为18±0.5℃。
每日上午10:00定时投喂颗粒饵料，投喂量为鱼体重的5%，投喂后0.5h 进行摄食状况评估，全部吃完为摄食正常，有残饵则判定为摄食异常。
试验期限为20d 。
每天上午10:00测定水质氨态氮，观察鱼活动和摄食情况。
分别使用水质氨氮检测试剂盒测定各试验组水环境中的氨态氮值。
使用水质调节微生态制剂对试验组1水域进行合理调控，使水域中氨态氮含量控制在合理范围内。
鱼的急性毒性实验设计
鱼类急性毒性实验设计一实验目的及意义本实验通过观察在不同受试物浓度处理下，鱼的急性中毒表现和经过，了解和基本掌握测定毒物的半数致死剂量/浓度（LD50/LC50）的方法，了解受试物剂量和生物反应的关系及计算表示方法。
通过鱼类急性毒性试验可以评价受试物对水生生物可能产生的影响，以短期暴露效应表明受试物的毒害性。
鱼类急性毒性试验不仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效程度，也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。
二实验原理鱼类对水环境的变化反应十分灵敏，鱼类毒性试验在研究水污染及水环境质量中占重要地位。
当水体中的污染物达到一定程度时，就会引起一系列中毒反应，例如行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变、直至死亡。
在规定的条件下，使鱼接触含不同浓度受试物的水溶液，实验至少进行24h，最好以96h为一个实验周期，在24 h、48 h．72h、96 h时记录实验鱼的死亡率，确定鱼类死亡50％时的受试物浓度，半数致死浓度用24h LC50、48h LC50、72h LC50和96h LC50表示，并记录无死亡的最大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度。
本实验将经过曝气驯化的鱼（保证其初始状态一致），放入不同浓度的重铬酸钾溶液中进行96hr的观察，记录不同浓度组6、24、48、72和96hr的鱼的死亡率，得出剂量-死亡率曲线，求出不同时间的LC50。
三实验材料1）待测化学物：使用实验室剂---重铬酸钾溶液K2Cr2O7（Cr6+, 2000mg/L）溶液、曝气自来水）以及助溶剂（丙酮）。
2) 实验动物：斑马鱼（从鱼市购买）：用曝气后的自来水驯养3天，补充氧气以保证溶解氧的浓度。
3）实验常用仪器设备：温度控制仪分光光度计玻璃水槽抄网（尼龙制，对照和实验容器分用）气相色谱-质谱联用 pH计(PHS-3B) 溶解氧测定仪(JYD-1A) 水硬度计温度计电子分析天平烧杯（25，50ml）移液管（1，10ml）量筒等。
鱼类的急性毒性实验
C实o验m用pa水ny的L水og质o1条m件一g般/是L指、水的0温.度1、mpHg、溶/L解氧。、硬每度、个水中浓的有度机物放和水入量等五。 条鱼，可用静态
方式进行，不设平行组，试验持续48～96h。每日至 3．实验用水（稀释水）及水质条件
选用的试验鱼在试验前必须在实验室内经过驯养，使之适应实验室条件的生活环境和进行健康选择。
鱼类的急性毒性实验
1
目的与要求
2
实验原理
3
实验材料
4
实验步骤
5
实验报告
6
注意事项
1
通过本实验，熟悉和掌握鱼类急性毒性试验的设 计、条件、操作步骤，以及试验结果的计算、分析 和报告等全过程。
2
鱼类对水环境的变化反应十分灵敏，当水体中的污 染物达到一定程度时，就会引起一系列中毒反应，例如 行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变、直至死亡。 在规定的条件下，使鱼接触含不同浓度受试物的水溶液， 实验至少进行24h，最好以96 h为一个实验周期，在24h、 48h、72h、96h时记录实验鱼的死亡率，确定鱼类死亡 50％时的受试物浓度。鱼类毒性试验在研究水污染及水 环境质量中占重要地位。通过鱼类急性毒性试验可以评 价受试物对水生生物可能产生的影响，以短期暴露效应 表明受试物的毒害性。鱼类急性毒性试验不仅用于测定 化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理 的有效程度，也为制定水质标准、评价环境质量和管理 废水排放提供环境依据。
试验前必须挑选健康的鱼，即选择体色光泽、鱼鳍完 整舒展、行动活泼、逆水性强、大小无太大悬殊、无任何 疾病的鱼作为试验鱼。任何畸形鱼、外观上反常态的鱼都 不得作试验鱼。
3
2．实验仪器设备 （1）实验容器
实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成的水族 箱或水槽。容器体积可根据试验鱼的体重确定，通常以每 升水中鱼的负荷不得超过2g（最好为1g）。一些小型鱼类 幼鱼可选择500mL或 1000mL烧杯为实验容器。容器的深 度必须超过16cm，水体表面积越大越好。同一实验应采用 相同规格和质量的容器。为防止鱼类跳出容器，可在容器 上加上网罩。实验容器使用后，必须彻底洗净，以除去所 有毒性残留物。 （2）其他
危险化学品鱼类急性毒性分级试验方法(标准状态：现行)
发布
犌犅／犜２１２８１—２００７
前 言
本标准修改采用联合国《全球化学品分类和标签协调手 册》（ＧＨＳ），其有 关 技术 内容 与上 述规 章一 致，在标准文本格式上按 ＧＢ／Ｔ１．１—２０００做了编辑性修改。
本 标 准 由 全 国 危 险 化 学 品 管 理 标 准 化 技 术 委 员 会 （ＳＡＣ／ＴＣ２５１）提 出 并 归 口 。 本 标 准 负 责 起 草 单 位 ：国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 危 险 品 中 心 实 验 室 。 本 标 准 参 加 起 草 单 位 ：天 津 出 入 境 检 验 检 疫 局 ，中 化 化 工 标 准 化 研 究 所 。 本标准主要起草人：张园 、闫靖、赵青、郑群 、杜宇、李晶。 本标准为首次制定。
犐犆犛１３．３００ 犌 ０９
中华人民共和国国家标准
犌犅／犜 ２１２８１—２００７
危险化学品鱼类急性毒性分级试验方法
犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犳犻狊犺犪犮狌狋犲狋狅狓犻犮犻狋狔犳狅狉犱犪狀犵犲狉狅狌狊犮犺犲犿犻犮犪犾狆狉狅犱狌犮狋狊
２００７１２１３发布
２００８０７０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会
４ 试 验 器 材 静水式或流水式实验装置、吸管（０．１ ｍＬ、０．２ ｍＬ、０．５ ｍＬ、１ ｍＬ、２ ｍＬ、１０ ｍＬ）、容 量 瓶（１０ ｍＬ、
水中添加Vc对氨氮致死浓度下鲤鱼幼鱼的影响
水中添加Vc对氨氮致死浓度下鲤鱼幼鱼的影响李勇男;刘海英【期刊名称】《科学养鱼》【年(卷),期】2016(000)002【总页数】2页(P50-51)【作者】李勇男;刘海英【作者单位】江南大学食品学院,江苏无锡214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122【正文语种】中文维生素C又称为抗坏血酸，是一种水溶性维生素，是鱼体生长和维持正常生理机能所必需的营养素。
多数鱼类体内缺乏合成维生素C的L-古洛糖酸内酯氧化酶（L-gulonolactone oxidase，GLO），必须从食物中获取Vc。
Vc作为一种重要的生理和免疫调节因子，在提高鱼体免疫力、抗病力和缓解应激方面具有重要作用。
鲤鱼分布广泛，是我国主要的淡水经济鱼类，因其对环境的耐受力强，经常被作为评估水生环境污染的试验模型。
目前，关于维生素C对氨氮胁迫下鱼类缓解作用的研究大多是通过饲料添加，鱼体采食摄入后，在体内发挥作用。
而对通过水体添加Vc缓解氨氮胁迫的研究还未曾有过报道。
本试验通过不同氨氮浓度对鲤鱼幼鱼的毒性研究，得到最低全致死浓度、半数致死浓度和安全浓度。
并在最低全致死浓度下，向水体中添加不同浓度的Vc，探讨Vc对鲤鱼幼鱼抗氨氮胁迫能力的影响，为水体添加Vc调控鲤鱼抵抗环境应激能力的研究提供理论基础。
1.试验用鱼福瑞鲤，体重（100±10）克，体长（9.5±1.30）厘米，购于中国水产科学研究院淡水渔业研究中心宜兴试验基地，随后转入圆柱形水族箱（1.13米2× 0.65米）暂养一周。
暂养期间，水温（21±1）℃，溶解氧（6.70±0.24）毫克/升，pH7.7±0.20，氨氮低于0.2毫克/升。
每天投饲基础日粮饲料3次，分别在8:00、13:00和18:00进行，自由采食，日投饲量为每箱鱼体总重的3%。
试验开始前，鱼禁食24小时。
维生素C，水产用Vc，维生素C含量不低于10%，NH4Cl为分析纯。
氨态氮在低温下对鱼的急性毒性研究
氨态氮在低温下对鱼的急性毒性研究
沈成钢;鲍文奎
【期刊名称】《大连水产学院学报》
【年(卷),期】1995(010)003
【摘要】利用北方池塘养殖的几种主要鱼类杂交鲤、鲢、鳙、草鱼等，在水温为２￣１０℃的条件下进行氨态氮的急性毒性试验。
结果表明：氨态氮对鱼的急性毒性是水温高毒性大；对氨毒的耐受能力是鲢〈镜鲤〈丰鲤〈草鱼〈鳙；在假定非离子氨与离子氨（铵）对鱼均有毒，并且毒性符合加和性的前提下提出，非离子氨的毒性大约是离子氨（铵）毒性的７０￣８０倍。
【总页数】7页(P58-64)
【作者】沈成钢;鲍文奎
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S963.92
【相关文献】
1.苯酚和铬对麦穗鱼的急性毒性及苯酚麦穗鱼的遗传毒性研究 [J], 张海艳;李霞;骆美蓉
2.总氨态氮对太平洋鳕仔稚鱼的急性毒性研究 [J], 傅泽;王华;刘萱;冷金慧;耿聪;何亚;曹冰;姜志强
3.总氨态氮对太平洋鳕仔稚鱼的急性毒性研究 [J], 傅泽;王华;刘萱;冷金慧;耿聪;何亚;曹冰;姜志强;;;;;;;;;;
4.氨态氮对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性研究 [J], 彭灵芝;王聪;陈雪梅;蔡江燕;杨松;胡思玉
5.氨态氮、亚硝态氮、硝态氮对麦穗鱼的急性毒性研究 [J], 潘坤;王卫民;祝东梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
实验二 鱼类急性毒性实验
实验二鱼类急性毒性实验一、实验目的（1）掌握鱼类急性毒性实验的原理和操作（2）掌握半致死浓度的计算方法二、实验原理鱼类对水环境的变化十分灵敏，运用毒理实验方法，观察鱼类在含有化学污染物的水环境中的反应，可以比较不同化学物质的毒性高低。
鱼类毒性实验方法可分为静态方法和动态方法两大类。
静态实验方法操作简单，不需要特殊设备，适宜于受试化学物在水中相对稳定，在实验过程中耗氧量较低的短期实验。
动态实验方法要求具备一定的设备，对于在水中不稳定、耗氧量较高的化学物需要进行较长时间的实验观察时，可采用动态实验方法。
本实验介绍静态实验方法。
三、实验器材玻璃缸或搪瓷桶、重金属盐、金鱼四、实验步骤（1）预备实验：预备实验的方法，可参考有关资料初步估计3～4个浓度，每个浓度用3～4尾鱼，观察24～48h。
进行预备实验的目的是确定实验浓度的范围（找出引起实验鱼全部死亡和不引起实验鱼死亡的浓度）；观察鱼中毒的表现和出现中毒的时间，为正式实验选择观察指标提供依据。
同时还要做一些化学测定，以了解实验液的稳定性、pH值、溶解氧的变化情况，以便在正式实验时采取措施。
（2）正式实验：1、根据在预备实验中得到的浓度范围，其间距按等比级数插入3～5个中间浓度实验中至少选择5个不同浓度，一般以7个浓度较常用，但所选择的浓度应包括有使实验鱼在24h内死亡的浓度，以及96h内不发生中毒的浓度。
表中第1纵行包括的浓度最常用。
实验中无论采用何种分组方法，都必须同时设对照组。
配制实验液时应先配制少量高浓度的储备液，实验时临时稀释所需浓度的实验液。
先把药液与水均匀混合后，再放入实验鱼，禁止先放入实验鱼后往实验缸中加受试药液，以免实验鱼接触到不均匀的高浓度的药液而提前死亡。
2、结果的观察：实验开始后8h进行连续观察并做好记录，8h后可做24h、48h和96h的详细观察记录。
实验过程中发现有特殊变化应随时记录。
观察指标包括理化指标和生物指标。
理化指标是水的溶解氧、pH值、水温、硬度等，用以检查实验条件的稳定性，排除由于实验条件的变化可能带来对实验鱼的影响。
池鱼氨氮中毒的解救--
池鱼氨氮中毒的解救
用颗粒饲料喂养吞食性鱼类鲤鱼、草鱼、鳊鱼、白鲳、鲫鱼等，因投食量大，排泄物及残食增多，蛋白质经分解生成的含氮物质随之增多。
过多的氮元素在鱼池中，常有60％以总铵形式存在，相当部分以非离子态氨存在。
非离子氨具有较强的毒性，稍有不慎，吞食性鱼类就会发生氨氮中毒，轻则影响正常生长，重则经济严重受损。
现将池塘鱼类氨氮中毒的识别及解救措施介绍如下：
一、中毒的识别
1、中毒时间氨氮中毒，没有季节、昼夜和天气好坏之分，多见于成鱼池、高产池、密养池及能灌不能排的鱼池。
2、中毒症状鱼群浮头不显，呼吸急促，乱游乱窜。
时而浮起，时而下沉，时而跳跃挣扎。
游动迟缓，麻痹乏力。
体暗、鳃乌、口腔发紫，粘液增多。
最后活力丧失，慢慢沉入水底而死亡。
3、中毒鱼类氨氮中毒轻者多见先死底层的鱼类，尤其是鲤鱼。
如池鱼混养鳙、鲢、鲤、草鱼时，先大批中毒死亡的是鲤鱼和鲢鱼。
4、增氧无效氨氮中毒，开启增氧机，池鱼则四散回避，不敢靠近。
泼洒增氧剂，浮游鱼群仍然毫无反应，症状如故。
二、解救措施
1、及时加注新水，稀释原池氨氮浓度，防止中毒加深。
2、泼洒食盐，阻止氨氮及硝酸态氮继续入侵鱼体血液。
水深1米，每亩用食盐17公斤。
3、撒沸石粉与麦饭石粉，吸附池底部分有害气体及有毒物质。
4、中毒得以缓解后，应对水体加施消杀剂进行杀菌，以防止病菌感染。
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养 殖水体 中 含适 量 的 氮 对养 鱼是 有 利 的 （ 国
外 鱼类 水质标 准 铵 氮 规 定 不能 超 过 １ ５ｍｇ Ｌ ， ． ／ 国内非 离 子 氨不 超 过 ０ ０ ／ １ ， ． ２ｍｇ Ｌ ｌ ） 但其 含 量 ］
一
】 ４ —
《 河北 渔业） ０ ２年 第 １ （ ） １ ２ 期 总第 ２ ７期 ） １
配。
氮等含 氮有 害 物 质 。在 养 殖 水 体 中 ， 以分子 态 氮
氮 （ ） 无机 态氮 （ Ｎ： 、 ＮＨ。 ＮＨ ）及 有机 物 （ 、 、 如尿 素 、 基酸 、 白质） 氨 蛋 等形 式存在 。在 生物 、 生物 非 及人 为 因素 的影 响 下 ， 们 在 水 体 中 ， 断地 转 他 不 化 、 移 ， 断地进 行着 动态循 环 。水体 中氨 氮可 迁 不 以通 过硝化 及硝 化作用 转化 为 ＮＨ。 一Ｎ， 以 Ｎ 或 ：
实际应 用提供 一定依 据 。
１ 研究 目的和意义
众 所周知 ， 、 鱼 虾等水 产动物 都是在 生活在 水 体 中的 ， 那么 ， 如何 管理水 体 的水 质 以便 适合其 生 长、 生存 、 健康 就成 了重要 的问题 。尤其 是现代集
２ 研 究方法
２ １ 研 究 内容 ．
在水族 箱 中研究 试验鲤 幼鱼 的氨 氮半致死 浓
鱼 。观察实验 鱼 的游 泳 动作 ， 外 界 刺 激 的反 射 对 能力 、 吸频率等 ， 记 录情况 。每 日测定 ３次水 呼 并
族箱 内 的 ｐ 值 、 氮 、 Ｈ 氨 温度 等 。氨氮 的浓 度 以每 日实 际测定 的平均值 为准 。 ②不换 水 的情况 下 ， 观察 正 常投 喂 下 水族 箱
《 河北 渔业 ）０ ２年 第 １期 （ ） １ ２ 总第 ２ ７期 ） １
ｏ研 究与 探讨
ｄ ｉ１ ． ９ ９ ｊｉ ｎ １０ —６ ５ ．０ ２ ０ ．０ ｏ ：０ ３ ６ ／． ｓ ． ０ ４ ７ ５ ２ １ ． １０ ４ ｓ
鲤 鱼 氨态 氮 急性 毒性试 验
刘 汉 友 ， 丽 丽 徐
形式逸 散 到大气 中 ， 分 可被 水 生植 物 消 耗 和底 部 泥吸 附 ， 中水 中的氨态 氮 （ 其 ＮＨ。 ＮＨ ） 养殖 、 对
２ ３ 试 验准备 ．
试验前 将 试 验 鱼 放 入 水 族 箱 进 行 适 应 性 暂 养， 以使试 验鱼尽 量适应 实验 条 件 ， 入箱 前 用 ３４ ， ０ 的食 盐水和 ２ ％的小苏打 消毒 减 少 因实 验条 件 不
多 ， 未见鲤 幼 鱼 （ ０ 但 １０ ｇ以上 ） 氮 毒 性 试验 的 氨 报道 。本试 验选 用 体重 为 １ ０ ３ ０ｇ鲤 幼 鱼为 ５ ～ ０
研究 对象 ， 研究 在 非致 死 浓 度 下氨 氮 对鲤 幼 鱼 的 生 理和组 织功 能 的影 响 ， 提 高鲤 幼 鱼 的抗 病力 为
（ 迁安市畜牧水产局 ． 河北 迁安 ０ ４ ０ ） ６４ ０
国内关 于鲤 鱼 的氨 氮急性 毒性 鲤 鱼 的生 长 甚至 生存 。一 则 般而言， 同一 鱼类 的幼鱼 比成 鱼对 氨气耐受 力 弱 ， 不 同鱼类对 氨 氮的耐 受力也 不 同 ［ 。 ２ ］
族箱 水容积 １ ０Ｌ， ８ 水温 （ ３士 １ ， ２ ）℃ 实验用水 为 曝气 ４ ８ ｈ以 上 的 自来 水 ； 备 液 （ 态 氮 ） 配 贮 氨 的 制： 将分 析纯氯 化铵在 ８ － ９ ０ － ０℃ 在烘 箱 中干燥 ２ － ｈ后 ， 称取 ０ ３ １９ｇ， 于少 量 纯水 中 ， 入 ｌ ． ８ 溶 转 Ｌ 容量 瓶并稀 释 到 刻 度 ； 氮 浓度 ０ １ｍｇ ｍＬ， 氨 ． ／ 现
度。 ２ ２ 试 验材 料 ．
约化养殖 长期 积 累 了大 量 养殖 生 物排 泄物 ， 以 所
有机物 的排泄 物 ， 至其 尸体 ， 异养性 细菌 的作 甚 在 用 下 ， 中的蛋 白质 及核 酸会慢 慢分解 ， 其 产生 大量
试验鱼 体长 １ ～１ ｍ， ２ ５ｃ 体重 １０ ０ ； ５ ￣３０ｇ 水
适 应所 引起 的实验误 差 。
２ ４ 试 验 内容 ．
生产 影响最 大 ， ＮＨ。 ＮＨ 都 是 藻类 必需 的 营 与 养盐， 几乎 所有 藻类都 能直 接 、 速而且优 先利用 迅 ＮＨ。 ＮＨ 。但 是 由 于 氨态 氮 的存 在 抑制 藻 与 类对 亚硝 酸态 氮 和尿 素 的利 用 ， 且 氨态 氮 在转 而 化 成硝酸 盐的过 程 中还要 消耗 水 体溶 氧 ， 其 是 尤
内 的氨 氮变化规 律 ， 日投 喂 ３次 ， 喂量 ３ 。 投 ③ 捞 出实验 鱼 ， 观察 水族 箱 内的 氨氮 变化 情
况。
ｏ 研究 与探 讨
中毒程 度加 深 ， 鱼 也逐 渐 增 多 。死亡 顺 序 由高 死 浓度 至 低浓度 ， 随着 实验 进行 ， 每箱 的氨 氮浓度不
本 次试 验 主 要 是 了解 和 确 定 鲤 幼 鱼 （ ５ ～ １０ ３ ０ｇ 的氨氮急性 中毒浓 度和 研究 水体 中不 同氨 ０ ）
氮浓度对 鲤幼 鱼抗 应 激性 的影 响 ， 为池 塘 养 殖 并
提供 理 论 参 考 ， 鲤 鱼 （ ０ 为 １０ ｇ以上 ） 后期 的安 全 养 殖提供 一定 的参考 。
① 急性毒性 试验 开始前 ４ ８ｈ停止 喂食 ， 验 试
开始后 连 续 ８ ｈ观 察 实 验 鱼 的 各 种 反 应 ， 录 记 ２ ４ ９ ４、 ８、 ６ｈ实验鱼 的存 活 情况 并 随时 取 出死 亡
分子态氮（ Ｈ ） Ｎ 。对鱼类及其他水生动物有很强的
毒性， 即使 浓 度很 低 ， 也会 抑 制 鱼类 生 长 ， 坏 鳃 损 组 织 ， 养殖 生产造 成不 利影 响 。 对