粗蛋白测定仪的蒸馏操作及技术参数
饲料中粗蛋白测定方法
饲料中粗蛋白测定方法1、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数 6.25，计算出粗蛋白含量。
2、试剂2.1 硫酸（GB 625）：化学纯，含量为98％，无氮。
2.2 混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB 665），6g硫酸钾（HG 3—920）或硫酸钠（HG 3—908），均为化学纯，磨碎混匀。
2.3 氢氧化钠（GB 629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。
2.4 硼酸（GB 628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。
2.5 混合指示剂：甲基红（HG 3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
2.6 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB 601制备。
2.6.1 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。
8.3mL盐酸（GB 622，分析纯），注入 1 000mL蒸馏水中。
2.6.2 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。
1.67mL盐酸（GB 622，分析纯），注入1 000mL蒸馏水中。
2.7 蔗糖（HG 3—1001）：分析纯。
2.8 硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。
2.9 硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1 000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。
3、仪器设备3.1 实验室用样品粉碎机或研钵。
3.2 分样筛：孔径0.45mm（40目）。
3.3 分析天平：感量0.0001g。
3.4 消煮炉或电炉。
3.5 滴定管：酸式，10、25mL。
3.6 凯氏烧瓶：250mL。
3.7 凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。
3.8 锥形瓶：150、250mL。
3.9 容量瓶：100mL。
饲料中粗蛋白测定方法
饲料中粗蛋白测定方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】饲料中粗蛋白测定方法1、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
2、试剂2.1硫酸（GB625）：化学纯，含量为98％，无氮。
2.2混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB665），6g硫酸钾（HG3—920）或硫酸钠（HG3—908），均为化学纯，磨碎混匀。
2.3氢氧化钠（GB629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。
2.4硼酸（GB628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。
2.5混合指示剂：甲基红（HG3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
2.6盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。
2.6.1盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。
8.3mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。
2.6.2盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。
1.67mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。
2.7蔗糖（HG3—1001）：分析纯。
2.8硫酸铵（GB1396）：分析纯，干燥。
2.9硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。
3、仪器设备3.1实验室用样品粉碎机或研钵。
3.2分样筛：孔径0.45mm（40目）。
3.3分析天平：感量0.0001g。
3.4消煮炉或电炉。
3.5滴定管：酸式，10、25mL。
3.6凯氏烧瓶：250mL。
3.7凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。
粗蛋白的测定方法原理及操作探讨
(8) 硫酸铵：分析纯，干燥；
(9) 硼酸吸收液。
3 仪器
• 实验用样品粉碎机或研钵；
• 40目（0.45 mm）分析筛；
• 分析天平； • 消化装置；
• 酸式滴定管；
• 凯氏定氮蒸馏装置。
4 操作步骤:
①磨样 ④消化 ②称样 ⑤蒸馏 ③加入催化剂和浓硫酸 ⑥滴定
4.1 磨样
确保样品均匀，颗粒细度（<1 mm）。
首先将含氮有机物与浓硫酸共热，经一系列的分解、碳 化和氧化还原反应等复杂过程，最后有机氮转变为无机氮硫 酸铵，这一过程称为有机物的消化。
消化：蛋白质 + H2SO4 →（NH4）2SO4+ SO2↑+ CO2↑+ H2O
•
1、消化 样品中的有机物和含N有机化合物，经浓H2SO4加热消化，H2SO4使有机物脱 水，炭化为碳；碳将H2SO4还原为SO2，而本身则变为CO2；SO2使N还原为NH3， 而本身则氧化为SO3，而消化过程中所生成的新生态氢，又加速了氨的形成。在 反应中生成物CO2、H2O和SO2、SO3逸去，而NH3与H2SO4结合生成（NH4） 2SO4留在消化液中。 蛋白质+H2SO4 ——→ C C+H2SO4 ——→ SO2+CO2↑ SO2+[N] ——→ NH3+SO3↑ NH3+H2SO4 ——→（NH4）2SO4 2CH3－CH－COOH+13H2SO4=（NH4）2SO4+6CO2↑+12SO2↑+16H2O↑ ∣ NH2 浓硫酸具有脱水性，使有机物脱水并炭化为碳、氢、氮。浓硫酸又有氧化性， 使炭化后的碳氧化为二氧化碳，硫酸则被还原成二氧化硫： 二氧化硫使氮还原为氨，本身则被氧化为三氧化硫，氨随之与硫酸作用生成 硫酸铵留在酸性溶液：NH3+H2SO4——→（NH4）2SO4
饲料中粗蛋白测定方法
1、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数，计算出粗蛋白含量。
2、试剂硫酸（GB 625）：化学纯，含量为98％，无氮。
混合催化剂：硫酸铜，5个结晶水（GB 665），6g硫酸钾（HG 3—920）或硫酸钠（HG 3—908），均为化学纯，磨碎混匀。
氢氧化钠（GB 629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。
硼酸（GB 628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。
混合指示剂：甲基红（HG 3—958）％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220）％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB 601制备。
2.6.1 盐酸标准溶液：c（HCl）=L。
盐酸（GB 622，分析纯），注入 1 000mL蒸馏水中。
盐酸标准溶液：c（HCl）=L。
盐酸（GB 622，分析纯），注入1 000mL蒸馏水中。
蔗糖（HG 3—1001）：分析纯。
硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。
硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1 000mL，加入％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。
3、仪器设备实验室用样品粉碎机或研钵。
分样筛：孔径（40目）。
分析天平：感量。
消煮炉或电炉。
滴定管：酸式，10、25mL。
凯氏烧瓶：250mL。
凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。
锥形瓶：150、250mL。
容量瓶：100mL。
消煮管：250mL。
定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动。
4、试样的选取和制备选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。
5 分析步骤试样的消煮称取试样～1g（含氮量5～80mg）准确至，放入凯氏烧瓶中，加入混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。
饲料中粗蛋白的测定方法
饲料中粗蛋白的测定方法原理：凯氏定氮法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
测定方法：1、试样的消煮称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360-410℃）直呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。
2、半微量蒸馏法将试样消煮液冷却，加入20mL蒸馏水，转入100mL容量瓶中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，作为试样分解液。
将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有20mL硼酸吸收液和2滴混合指示剂锥形瓶内。
蒸汽发生器的水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需补加硫酸。
准确移取试样分解液10～20mL注入蒸馏装置的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好人口玻璃塞，再加10mL氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在人口处加水密封，防止漏气。
蒸馏4min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1mi，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。
3、滴定用上述蒸馏法蒸馏后的吸收液立即用0.1mol/L或0.02mol/L盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。
4、分析结果的表述计算见下式：（V2-V1）·c×0.0140×6.25粗白质（%）= ×100V′M×V式中：V1——滴定试样时所需标准酸溶液体积，mLV2——滴定空白时所需标准酸溶液体积，mLC ——盐酸标准溶液浓度，mol/LM ——试样质量，gV ——试样分解液总体积，mLV′——试样分解液蒸馏用体积，mL0.0140——与1.00mL盐酸标准[c（HCl）=1.000 mol/L]相当的以克表示的氮的质量6.25——氮换算成蛋白质的平均系数。
实验三 饲料中粗蛋白的测定
实验三 饲料中粗蛋白的测定一、适用范围本标准适用于配合饲料，浓缩饲料和单一饲料。
二、原理凯氏法测定试样中的含N 量，即在催化剂作用下，用H 2SO 4破坏有机物，使含N 物转化成（NH4）2SO 4，加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出N 含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出CP 含量。
三、试剂1、H 2SO 42、混合催化剂3、NaOH4、硼酸5、混合指示剂6、HCl 标准液7、蔗糖8、硫酸铵9、硼酸吸收液四、仪器设备1、粉碎机2、分样筛3、分析天平4、消煮炉5、滴定管6、凯式定N 仪7、锥形瓶 9、容量瓶 10、消煮管五、分析步骤1、试样的消煮，称取试样0.5g ，准确至0.0202g ，放入消煮管中加入6.4g 混合催化剂与试样混合均匀，再加入12ml H 2SO 4将消煮瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化、泡沫消失后，再加强火力（360-410℃）直至吴透明的蓝绿色，然后再继续加热至少2h 。
2、NH 3的蒸馏将装有硼酸吸收液和指示剂的锥形东半球，放在冷凝管末端，装好消煮管，打开碱并关，至消煮管中变为黑色，并闭碱开关，打开气天关，至锥形瓶内液体由粉红色变为橙黄色，到流出液体体积为150ml 时停止，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。
3、滴定蒸馏后的吸收液用HCl 标准溶液滴定，溶液由橙黄色变为粉红色为终点。
3、空白测定称取蔗糖0.5g 代替试样进行空白测定七、计算 CP=%100M25.60140.0C )V V (12⨯⨯⨯⨯-V 2：滴定试样时所需标准溶液体积mlV 1：滴定空白时，所需标准溶液体积mlC ：盐酸标准溶液浓度mol/lM ：试样质量 g0.0140：与1mol HCl 标准溶液相当的以g 表示的N 的质量。
6.25：N 换算成Br 的平均系数。
饲料粗蛋白检测方法
饲料粗蛋白的检测方法（凯氏半微量定氮法）1 原理凯氏法测定试样含氮量，即在催化剂存在下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵，加入强碱（NaOH）并蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，用标准盐酸溶液滴定测出含氮量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白质含量。
2 仪器设备2.1实验室用样品粉碎机或研钵2.2分样筛：孔径0.45mm（40目）2.3分析天平：感量0.0001g2.4消煮炉或电炉2.5滴定管：酸式25mL2.6凯氏烧瓶：100mL2.7凯氏蒸馏装置：半微量水蒸汽蒸馏式2.8锥形瓶：150mL2.9容量瓶：100mL3 试剂3.1硫酸：分析纯3.2硫酸铜：分析纯3.3硫酸鉀：分析纯3.4硒粉：分析纯3.5氢氧化钠：分析纯40g溶于100mL蒸馏水配成40%水溶液。
3.6硼酸：分析纯2g溶于100mL蒸馏水配成2%水溶液。
3.7混合指示剂：甲基红分析纯0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿分析纯0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，阴凉处保存期三个月以内。
3.8 0.02N盐酸标准溶液：1.67mL盐酸分析纯溶于1000mL 蒸馏水中。
3.8.1 0.02N盐酸标准溶液的标定（碳酸钠法）精确称取0.04g于270—300°C灼烧至恒重的基准级无水碳酸钠，准确至蒸馏水(新做蒸馏水或蒸0.0001g，无损失地转入100 mL三角瓶中，加入无CO2馏水煮沸数分钟放凉后使用)50mL溶解，并加入混合指示剂10滴，用盐酸标准溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2分钟，冷却后继续滴定至溶液呈暗红色，同时做空白试验。
3.8.2盐酸标准溶液当量浓度的计算GN =(V1-V2)×0.05299式中：G——无水碳酸钠的重量，g；V1——盐酸标准溶液消耗的体积，mL；V2——空白试验所消耗盐酸标准溶液的体积，mL；0．05299——每毫克当量碳酸钠的克数；注：标定各浓度间的相对偏差不大于0.2%。
3.9蔗糖：分析纯3.10硫酸铵：分析纯，干燥。
蛋白质测定仪测定食品蛋白质含量的注意事项
蛋白质测定仪测定食品蛋白质含量的注意事项一、蛋白质测定仪/粗蛋白测定仪/氮磷钙测定仪注意事项：蛋白质含量的测定是评价食品质量的重要指标。
由于食品中含氮化合物以蛋白质占优势,所以测定食品中蛋白质含量时往往是先测定总氮量,然后乘以蛋白质换算系数即得到蛋白质含量。
在我国现行的国家标准中,蛋白质的测定采用蛋白质测定仪,它是由样品消化成按盐、蒸馏、用硼酸液吸收,再由标准酸液滴定来测定的.此法准确、简明、灵活,是法定的仲裁测定法,但它技巧性强,主、客观影响因素多,要想获得准确的测定结果,也是较困难的。
蛋白质测定仪对蛋白质含量进行测定的过程中，对称样较困难的半固体(如冰淇淋、豆腐乳)可置于已记重的纸片上称重(样品重~总重一纸片重),样品称好后,卷起置于凯氏烧瓶底部。
为减少系统误差,空白凯氏烧瓶同时投入相同规格的纸片一张。
不同的食品含氮量不同,为保证终点滴定消耗酸的体积数在有效范围(5一Zoml)内,称量应视样品含氮的高低而定。
一般含量在5%一20%的应精确称取1.。
一2.09,如蛋糕、奶粉,对含量在。
.1写一1.0%的应加大称样量,以5.0一10.馆为宜,如淀粉、葡萄糖;对高含量(蛋白质大于30%)的应减少称样量,一般精密称取0.2一L09为宜,如酪蛋白、大豆粉。
利用蛋白质测定仪的过程中，还须注意所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
蒸汽发生瓶中水呈酸性,以防在碱性时水中游离氨被蒸出而使结果偏高。
总之，蛋白质测定仪测定蛋白质,其结果受多方面因素的影响,为使测定结果准确,在测定时应引起高度重视。
因托普云农蛋白质测定仪蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法，故被称为凯氏定氮仪，又名蛋白质测定仪、粗蛋白测定仪、氮磷钙测定仪。
该仪器也是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证中的必备检验设备。
二、蛋白质测定仪/粗蛋白测定仪/氮磷钙测定仪工作原理：托普云农蛋白质测定仪（俗称定氮仪）以国际凯氏定氮法为依据，进行设计制造的，此仪器主机采用蒸气自动控制发生器，在液位稳压器的配合下，使蒸气在数十秒时间内平稳输出供蒸馏器使用。
粗蛋白测定注意事项
粗蛋白质测定中注意事项陈彬一、试样的粉碎测定要求样品粉碎并全部过40目筛，目的在于使其具备均质性，便于溶样，更易于消化。
但也须掌握以下四点：（1）由于粉碎或过筛过程中，样品容易产生自动分级，如玉米，其硬质部分常聚集在上面，软质部分聚在下面。
所以粉碎过筛后要重新混合均匀，以减少测量误差；（2）粉碎完后，粉碎机中总会遗留少部分，这部分不能随便丢弃，否则将影响样品的均质性；（3）粉碎过程要快，以避免样品的成分变化；（4）对于全价料(即使是颗粒全价料)和浓缩料，无须再粉碎，当然这是基于混合机的良好混合均度的；如果拿去粉碎，会丢失部分粉末物质，且粉碎后产生分级，反而降低了样品的均质性。
二、试样的用量试样的用量可根据情况而定，标准法中规定为0．5～1g，这个用量对于浓缩料、鱼粉、豆粕等高蛋白的样品尚可，对于诸如稻谷、玉米等低蛋白的样品则相对较少，可适当增加到2～3g，否则，滴定时盐酸的消耗量只有1～2mL，会增加读数和测定的误差。
三、样品的消化1、要根据样品的用量来确定硫酸的用量:取0.5～1g样, 需12mL硫酸；如果取2～3g样，则需25mL硫酸；对于含盐量高的样品，如某些劣质鱼粉、肉骨粉之类，须相应增加硫酸用量2～5mL。
2、有的饲料检测书上有快速测定蛋白质的方法，如过氧化氢催化法，按照这些方法测定的蛋白质含量常常偏低0.3％～1.0％，如无特殊情况，特别是测定的结果作为饲料配方的数据时，不要用快速测定法。
消化时间对粗蛋白测定的影响消化时间(变澄清后)/h 0.5 1 2 3 4 5粗蛋白含量/% 42.2435 45.6686 45. 8747 45.9295 46.1413 46.2052结论：样品澄清后消化0.5h蛋白含量偏低,随着消化时间的增大,蛋白含量逐渐的增加,从2h开始,蛋白含量增加缓慢,2h的和5h的蛋白含量在允许的1%误差范围之内,可见样品消化时间最好控制在样品澄清后2h以上,对一般样品,3～4h的消化时间(不包括冷却时间)已经足够,过长的消化时间对蛋白含量的提高没有显著的影响,反而会造成时间和资源的浪费。
粗蛋白测定方法
粗蛋白测定方法什么是粗蛋白， 粗蛋白跟蛋白质又有什么区别，如何测量饲料中粗蛋白的含量，粗蛋白的 含量高是不是一定代表着蛋白质的含量高。
我想，当你看到这个题目时，肯定会联想到这 一连串的问题中的其中几个。
那么接下来，我就来详细介绍下粗蛋白的概念、粗蛋白测量和其他关于饲料中粗蛋白含量的问题。
…粗蛋白概念：一 粗蛋白不仅包括蛋白质这一物质，它涵盖的范围更广，包括含氮的全部物质。
包括真蛋白质和含氮物（氨化物）。
食物中粗蛋白含量以大豆最高 ，肉类次之。
粗蛋白英文为 crudeprotein 。
粗蛋白是食品、 饲料中一种蛋白质含量的度量。
由于一般蛋白质中含氮量约为16%， 故在概略分析中，常用凯氏 （Kjeldahl ） 法测出总氮量，再乘以系数 6.25 来求得。
实际上， 它是食品、饲料中含氮化合物的总称，既包括真蛋白又包括非蛋白含氮化合物，后者又可 能包括游离氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸盐和氨等。
此外，不同蛋白质的氨基酸组成 不同，其氮含量不同，总氮量换算成蛋白质的系数也不同，如小麦和多数谷物的换算系数 为 5.80 ，水稻 5.95 ，大豆 5.7 ，多数食用豆和坚果 5.3 ，牛奶 6.38 等。
粗蛋白只是一个粗 略的概念。
粗蛋白含量：面我介绍几种常见物质的粗蛋白含量，仅供大家参考。
粗蛋白含量： 13%-14% 粗蛋白含量：可达 40%以上 粗蛋白含量： 3.41%粗蛋白含量： 9.63 ％粗蛋白含量： 0.86%+ n$ l- Y: p6 J上文介绍了几种农产品或水果的粗蛋白含量情况，如果需要更多的资料，大家可自己查阅。
.....粗蛋白测定： ...方法一：最简便也是最快键的方法，就是用 蛋白质测定仪 来测量。
. g- y: \$ H- J;本标准参照采用ISO 5983—1979《动物饲料——氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。
， X1 O& n5 q: o- M! Q3 g1 主题内容与适用范围本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。
粗蛋白含量测定（凯氏定氮法）
粗蛋白含量测定（凯氏定氮法）粗蛋白含量测定（凯式定氮法）1 原理蛋白质是含氮的有机化合物。
食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。
2 试剂所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
硫酸铜硫酸钾硫酸4或2%硼酸溶液混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合，也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合40%氢氧化钠溶液0.05N盐酸标准溶液3操作方法样品处理：精密称取0.2～2.0g固体样品或2～5g半固体样品或吸取10～20ml液体样品(约相当氮30～40mg)，移入干燥的100ml 或500ml定氮瓶中，加入0.5g硫酸铜，3g硫酸钾及10ml硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。
小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，5至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5h。
取下放冷，小心加20ml 水。
放冷后，移入100ml 容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。
取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
装好定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
向接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室，并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻杯的棒状玻塞。
将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。
夹紧螺旋夹，开始蒸馏。
粗蛋白测定仪的功能特点及应用范围
粗蛋白测定仪的功能特点及应用范围一、粗蛋白测定仪简介概述：粗蛋白测定仪测出的物质有蛋白质，还含有游离氨基酸等其他物质，因此又称粗蛋白测定仪。
粗蛋白测定仪能够自行选择操作模式，根据用户对实验过程的掌握程度和对结果的不同需求，人性化设计。
粗蛋白测定仪常用于食品、粮食、饮料、饲料等行业。
在许多的检测方面，蛋白质的检验常常作为一种不可缺少的参数，如粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤、水、药物、沉淀物和化学品等方面。
综合各方面的评测后，我们可以发现，粗蛋白测定仪作为现今市面上使用最为频繁的蛋白质含量检测仪器。
该设备的优势是可以充分保证检测数据的准确性以及可快速获取检测中所需的数据。
由托普云农自主研发生产的DDN-II型粗蛋白测定仪设置时采用微电脑进行过程控制，该设备支持手动以及自动模式，用户可根据实施需要进行自动切换。
在自动模式下，用户可已通过一次完成加碱、加硼酸、蒸馏，氨气吸收整个过程，加硼酸和加碱的体积以及蒸馏和吸收过程的时间都可以自行设定。
而手动模式下：我们可以通过单独人工操作实现加硼，加碱和蒸馏吸收三个过程，而其中体积，时间自行控制，在很大程度上满足了专业用户需求。
二、粗蛋白测定仪的功能特点：1.大屏幕点阵式液晶显示，全中文菜单，触摸式按钮，操作简捷方便。
2.自动式蒸馏控制、自动加水、自动水位控制、自动停水。
3.各种安全保护：消化管安全门装置，蒸汽发生器缺水报警，水位检测故障报警。
4.可存储操作程序数量：250个。
5.仪器外壳采用特制喷塑钢板，工作区域采用ABS防腐板，防化学试剂腐蚀和机械损坏表面，耐酸耐碱。
6.水位检测、低水位报警，自动断电。
仪器控制系统故障能自动断电7.标配里不含消化炉，消化炉为选配8、ZDDN-II 粗蛋白测定仪，采用微电脑进行过程控制，包括手动模式和自动模式，可根据您的需要自行设定和切换：9、自动模式下：一次完成加碱、加硼酸、蒸馏，氨气吸收整个过程，加硼酸和加碱的体积以及蒸馏和吸收过程的时间都可以自行设定。
粗蛋白的检测
实验步骤⑴消化称取经粉碎通过（40－60）目式样（0.5－1）g(视含氮量而定)无损地置入已洗涤烘干的试管中加催化剂一片和10ml硫酸。
将消化管分别放入消化架各个孔内，然后置于消化炉上，然后开启抽吸泵水阀，使抽吸泵处于抽吸状态。
接通电源，在加热初始阶段，须注意观察，防止式样因急沸而飞溅。
（电压调至180V－200V温度不宜太高）。
消化反应过程主要如下：(蛋白质)R·C·H·NH2·COOH+H2SO4→CO2+SO2+NH3+H2O2NH3+H2SO4→(NH4)2SO4⑵蒸馏分别用橡皮管与各进出水连接，出水口，排水口用橡胶管连接后置入水池中。
冷却水接口与自来水龙头连接，H2O、NaOH输入接口与橡胶管连接后分别置入蒸馏水、氢氧化钠盛器桶内，并关闭开关阀门。
打开电源开关，H2O开关，蒸馏水即自动进入发生炉内，达到一定液位高度，受液位控制器控制停止进水，进入电加热状态。
在250ml锥形瓶中加入2％的硼酸，50ml和（2－3）滴混合指示剂1，将该瓶套在接收管上，并让管口浸没在硼酸溶液液面以下。
取消化冷却后的消化试管置入适量的H2O后，扳动蒸馏消化管托盘架，使消化管固定在蒸馏器托盘架上，开启NaOH开关，注入50ml氢氧化钠溶液。
蒸馏器内冷却水经稳压器流入蒸汽发生炉内，炉内因水位上升使电极圈产生电流，炉内蒸馏水经（1－2）min加热后，水被煮沸产生的蒸汽进入消化管内，对以消煮的样品进行蒸馏，将消化过程中产生的硫酸铵转化成氨并与接收瓶里的硼酸溶液反应生成硼酸氢铵，待接收瓶液面高于150ml时，将接收瓶下移，使接收管离开液面，用蒸馏水冲洗出气口，取下接收瓶待滴定。
蒸馏过程的主要反应如下：（NH4）2SO4+2NaOH→Na2SO4+2NH4OH2NH4OH→2NH3+2H2ONH3+4H3BO3→NH4HB4O7+5H2O⑶滴定用0.1mol/l的标准盐酸溶液滴定吸收，溶液有蓝绿色变成紫红色为滴定终点。
实验粗蛋白测定仪对饲料中粗蛋白的测定
实验粗蛋白测定仪对饲料中粗蛋白的测定随着饲料工业的快速发展,饲料产量迅速增长,饲料中蛋白质含量的测定显得日益重要,虽然粗蛋白测定无法鉴别三聚氰胺和尿素等物质,但是在目前条件下,饲料中粗蛋白的测定仍然是评价饲料营养价值的重要指标。
饲料中蛋白质的含量是评价其质量高低的主要指标。
因此,蛋白质的测定一直是我们国家商品检验中十分重要的项目。
几年来,随着经济的发展,一些不法商贩常在食品和饲料中掺假作伪,谋取暴利。
所以,如何准确快速测定其中的成分,已成为各监督行业执法的重要依据。
饲料中粗蛋白的测定大致分为两种:凯氏定氮法和自动定氮仪法。
自动定氮仪法中要用到的粗蛋白测定仪是利用凯氏定氮原理,快速自动地进行蒸馏、滴定和计算。
托普云农粗蛋白测定仪也叫粗蛋白测定仪、氮磷钙测定仪（含消化炉）主要测定种子、粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤及其他农副产品中氮的含量。
粗蛋白测定仪微电脑控制，自动蒸馏控制、自动加水、自动水位控制、自动停水和水压过低报警。
实验用托普云农粗蛋白测定仪对饲料中粗蛋白的测定如下：1、实验原理：凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
2、试剂：硫酸、混合催化剂、氢氧化钠、硼酸、混合指示剂、盐酸标准溶液、蔗糖、硫酸铵、硼酸吸收液。
3、仪器设备：粗蛋白测定仪、样品粉碎机或研钵、分样筛、分析天平、消煮炉或电炉、滴定管、凯氏烧瓶、凯氏蒸馏装置、锥形瓶、容量瓶、消煮管。
4、试样的选取和制备：选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。
5、分析步骤（1）试样的消煮：称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。
粗蛋白检测操作方法
粗蛋白检测操作方法
1. 样品制备
首先，需要根据实验需要选择合适的样品进行制备，可以是动物组织、细胞、血清、尿液等。
样品的含量要足够，一般为0.1~1克的蛋白质。
2. 粗蛋白提取
将样品剁碎后，加入提取缓冲液，放置冰上30min左右，然后离心，收集上清液，即为粗蛋白提取液。
3. BCA或Lowry检测
将粗蛋白提取液分别与BCA或Lowry试剂混合，放置反应30min，利用分光光度计测定其吸光值。
从标准曲线中读取蛋白质含量。
4. SDS-PAGE分析
将粗蛋白提取液进行SDS-PAGE分析，检测其分子量和保真性，评价提取方法的质量。
粗蛋白质测定实训报告
一、实训目的本次实训旨在通过学习粗蛋白质的测定方法，提高学生对蛋白质含量检测技术的理解和操作能力，掌握蛋白质测定实验的基本原理和操作步骤，为后续相关实验和研究打下基础。
二、实训时间2023年10月15日三、实训地点实验室四、实训器材与试剂1. 器材：- 粗蛋白质测定仪- 磷酸缓冲液- 离心机- 容量瓶- 移液器- 试管- 烧杯- 玻璃棒- 滤纸- 酒精灯- 铁架台- 秒表2. 试剂：- 碘液- 氢氧化钠- 硫酸铜- 氢氧化钠溶液- 磷酸氢二钠溶液- 蛋白质标准溶液- 样品溶液五、实训原理粗蛋白质的测定通常采用凯氏定氮法，其原理为：在酸性条件下，蛋白质中的氮与硫酸铜反应生成硫酸铜-蛋白质复合物，再与氢氧化钠反应生成硫酸铜-氨络合物，最后通过滴定法测定氨的量，从而计算出蛋白质的含量。
六、实训步骤1. 样品处理：- 称取一定量的样品，加入适量的氢氧化钠溶液，搅拌均匀，置于100℃的烘箱中烘至恒重。
- 将烘干的样品用蒸馏水溶解，过滤，备用。
2. 标准曲线绘制：- 取一定量的蛋白质标准溶液，分别加入适量的氢氧化钠溶液，制成一系列浓度的蛋白质标准溶液。
- 向标准溶液中加入适量的硫酸铜溶液，混合均匀，放置一段时间。
- 使用粗蛋白质测定仪测定溶液的吸光度，以蛋白质浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：- 将处理好的样品溶液按照标准曲线的测定方法进行测定。
- 记录样品溶液的吸光度，从标准曲线上查得相应的蛋白质浓度。
4. 计算结果：- 根据样品溶液的蛋白质浓度和样品的初始质量，计算样品中蛋白质的含量。
七、实训结果与分析1. 标准曲线的绘制：- 通过绘制标准曲线，可以得出蛋白质浓度与吸光度之间的关系，为后续样品测定提供依据。
2. 样品测定：- 根据样品溶液的吸光度，从标准曲线上查得相应的蛋白质浓度，计算出样品中蛋白质的含量。
3. 结果分析：- 通过对比实验结果和理论值，可以分析实验过程中可能存在的误差，并探讨改进方法。
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粗蛋白测定仪的蒸馏操作及技术参数
粗蛋白主要分为两类，第一类是牛奶、肉类、蛋类、鱼、虾等动物蛋白；第二类是大豆、黄豆、芝麻、瓜子等植物蛋白。
不管哪一类，它们都是人体不可或缺的营养成分。
但我们知道，不同食品中的蛋白质含量是不同的，这就需要食品加工企业、科研单位和检测机构对食品进行检测，粗蛋白质的测定以测总含氮量为定，常见测定仪器是粗蛋白测定仪。
既然仪器能检测出蛋白质含量，肯定是有它的原理所在的。
因为蛋白质是含氮的有机化合物，所以在使用粗蛋白测定仪测定样品蛋白质的过程中，我们只需要将样品，如食品、粮食，饲料等与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。
在检测过程中，除了要注意样品规范处理外，还要重点注意仪器的蒸馏操作。
消化液中的硫酸钱在碱性条件下，释放出氨，所以加入氢氧化钠要足量，一般40%。
氢氧化钠为8-10ml。
加入氢氧化钠是否足量，可借硫酸铜在碱性条件下生成褐色沉淀或深蓝色的铜氨络离子指示，若溶液的颜色不改变，则说明加的碱液不足，应补加。
为防止样液中氨气逸出，要做到蒸馏装置平稳、严密，各连接部分无松漏现象。
蒸汽发生均匀、充足，中途不得停火断气。
只有做到这样，粗蛋白测定仪才能完成精准测量。
粗蛋白测定仪/粗蛋白测定仪/氮磷钙测定仪技术参数：
冷却水消耗：3L/分钟
重复率：相对标准偏差<±1%
供电：AC220V/50Hz
功率：1000w
供水：水温小于20度
外形尺寸：380*320*670mm
重量：20kg
测定品种：粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤、水、药物、沉淀物和化学品等；
工作方式：半自动
进水方式：自来水、蒸馏水两种进水方式，使用区域广泛
样品量：固体0.20g～2.00g；半固定2.00g～5.00 g液体10.00ml～25.00ml 测定范围：0.1mgN～200mgN(毫克氮)
回收率：≥99%（相对误差，包括消化过程）；
蒸馏速度：5～ 15分钟/样品（按样品量而定）
粗蛋白测定仪/粗蛋白测定仪/氮磷钙测定仪功能特点：
1.仪器外壳采用特制喷塑钢板，工作区域采用ABS防腐面板，防化学试剂腐蚀和机械损坏表面，耐酸耐碱。
2.水位检测，低水位报警，仪器控制系统故障能自动断电。
3.采用自来水水源，适应性广，对实验要求低。
4.KDN系列凯氏定氮仪，采用微电脑进行过程控制。
5.自动式蒸馏控制、自动加水、自动水位控制、自动停水。
6.各种安全保护：消化管安全门装置，蒸汽发生器缺水报警，水位检测故障报警。
其他作物品质仪器：凯氏定氮仪、消化炉、脂肪测定仪、粗脂肪测定仪、粗纤维测定仪、精米机、智能百度仪、降落值测定仪。