粗蛋白测定方法
粗蛋白测定方法
粗蛋白测定方法一凯式定氮法粗蛋白crude protein ；crude matter (DM)食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。
不仅包括蛋白质这一物质，它涵盖的范围更广，包括含氮的全部物质，及真蛋白质和含氮物(氮化物)。
换句话说，粗蛋白是食品、饲料中含氮化合物的总称，食物中以大豆的粗蛋白含量最高，肉类次之。
所以说，粗蛋白是一种既包括真蛋白又包括非蛋白的含氮化合物，后者又可能包括游离氨基酸、尿素、硝酸盐和氨等。
然而，不同蛋白质的氨基酸组成不同，其氮含量不同，总氮量换算成蛋白质的系数也不同。
总之，粗蛋白是食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。
我们可以通过粗蛋白测定仪即凯氏定氮仪来测量粗蛋白的含量，测量步骤如：蛋白质含氮量约为16% (这已通过多次试验得出)，再用凯氏法测出总氮量，再乘以就可求得粗蛋白的含量。
一、实验原理蛋白质是由碳、氢、氧、氮及少量硫元素组成。
这些元素在蛋白质中含量都有一定比例关系，其中含碳50〜55%、氢6〜8%、氧20〜23%、氮15〜17% 和硫〜％。
此外在某些蛋白质中还含有微量的磷、铁、锌、铜和钼等元素。
由于氮元素是蛋白质区别于糖和脂肪的特征，而且绝大多数蛋白质的氮元素含量相当接近，一般恒定在15〜17%，平均值为16%左右，因此在蛋白质的定量分析中，每测得1克氮就相当于克蛋白质。
所以只要测定出生物样品中的含氮量，再乘以，就可以计算出样品中的蛋白质含量。
含氮有机物与浓硫酸共热，被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，氮进一步与硫酸作用生成硫酸铵。
由大分子分解成小分子的过程通常称为”肖化”为了加速消化，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高消化液的沸点(290C-400C )，加入硫酸铜作为催化剂，过氧化氢作为氧化剂，以促进反应的进行。
反应(1)(2)在凯氏烧瓶内完成，反应(3) 在凯氏蒸馏装置中进行，其特点是将蒸汽发生器、蒸馏器及冷凝器三个部分融为一体。
由于蒸汽发生器体积小，节省能源，本仪器使用方便，效果良好。
粗蛋白测定方法
粗蛋白测定方法什么是粗蛋白，粗蛋白跟蛋白质又有什么区别，如何测量饲料中粗蛋白的含量，粗蛋白的含量高是不是一定代表着蛋白质的含量高。
我想，当你看到这个题目时，肯定会联想到这一连串的问题中的其中几个。
那么接下来，我就来详细介绍下粗蛋白的概念、粗蛋白测量和其他关于饲料中粗蛋白含量的问题。
粗蛋白概念：粗蛋白不仅包括蛋白质这一物质，它涵盖的范围更广，包括含氮的全部物质。
包括真蛋白质和含氮物(氨化物)。
食物中粗蛋白含量以大豆最高,肉类次之。
粗蛋白英文为crude protein。
粗蛋白是食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。
由于一般蛋白质中含氮量约为16%，故在概略分析中，常用凯氏(Kjeldahl)法测出总氮量，再乘以系数6.25来求得。
实际上，它是食品、饲料中含氮化合物的总称，既包括真蛋白又包括非蛋白含氮化合物，后者又可能包括游离氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸盐和氨等。
此外，不同蛋白质的氨基酸组成不同，其氮含量不同，总氮量换算成蛋白质的系数也不同，如小麦和多数谷物的换算系数为5.80，水稻5.95，大豆5.7，多数食用豆和坚果5.3，牛奶6.38等。
粗蛋白只是一个粗略的概念。
粗蛋白含量：下面我介绍几种常见物质的粗蛋白含量，仅供大家参考。
薏苡仁粗蛋白含量：13%-14%棉粕粗蛋白含量：可达40%以上农大白早糯玉米粗蛋白含量：3.41%蠡玉168 粗蛋白含量：9.63％台湾大青枣粗蛋白含量：0.86%上文介绍了几种农产品或水果的粗蛋白含量情况，如果需要更多的资料，大家可自己查阅。
粗蛋白测定：方法一：最简便也是最快键的方法，就是用蛋白质测定仪来测量。
本标准参照采用ISO 5983—1979 《动物饲料──氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。
1 主题内容与适用范围本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。
2 引用标准GB 601 化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备3 原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
粗蛋白测定
1.2.4 粗蛋白含量的测定—凯氏定氮法(1)原理样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为铵态氮。
碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，结果乘以蛋白质换算系数6.25，即为粗蛋白质含量。
(2)仪器设备研钵、分析天平(感量为0.0001g)、消煮炉、半自动定氮蒸馏装置、酸式滴定管、锥形瓶(容积150ml）、量筒(量程10mL）、移液管(10mL）(3)试剂配制10mol·L-1NaOH溶液：NaOH420g+1L H2O；甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100mL乙醇中；20g·L-1 H2BO3指示剂：20g H2BO3(化学纯）溶于1L水中；混合加速剂：K2SO4:CuSO4:Se=100:10:1即100g K2SO4(化学纯）、10g CuSO4 ·5H2O(化学纯）、和1gSe粉混合研磨，充分混匀(注意戴口罩），贮于具塞瓶中；0.01mol·L-1(1/2 H2SO4）标准液：量取H2SO4(化学纯、无氮、ρ=1.84g·mL-1）0.3mL，加水稀释至1000mL。
(4)操作步骤样品消煮：将样品0.4g置于干燥的消煮管底部，加3g混合加速剂和浓硫酸10mL，消煮30分钟左右。
同时，做一份空白测定，除不加样品外，其他操作皆与测定样品相同。
蒸馏：消煮管内10 mol·L-1NaOH溶液10mL于半自动定氮仪上蒸馏。
用装有30mL 20g·L-1 H2BO3－指示剂的锥形瓶收集蒸馏液，自溶液变为蓝色计时4min 后停止蒸馏。
滴定：用0.01 mol·L-1(1/2 H2SO4）标准液滴定馏出液，馏出液由蓝色至刚变为红色，记录所用酸标准溶液的体积(mL）。
计算：式中:X-样品中粗蛋白质的含量，%V1-样品消耗盐酸标准溶液的体积，mLV2-试剂空白消耗盐酸标准溶液的体积，mLN-盐酸标准溶液的当量浓度0.014-1N盐酸标准溶液Im L相当于氮的克数m-样品的质量(或体积)，g(或mL)F-蛋白质换算系数，6.25。
粗蛋白国标测定方法
粗蛋白国标测定方法
粗蛋白国标测定方法是指按照国家标准规定的方法来测定食品、饲料、生物、饮料等样品中的粗蛋白含量。
以下是其中一种常用的粗蛋白测定方法：
1. 原理：利用蛋白质与碱性染料结合形成染色复合物，通过比色测定复合物的吸光度来确定粗蛋白含量。
2. 实验步骤：
a. 准备样品：将待测样品取适量，如食品样品需要先将其分
解提取出蛋白质。
b. 加试剂：将试样加入含有碱性染料和溶液的比色管中，混匀。
c. 反应：在适当的温度下，让样品与试剂充分反应一段时间。
d. 比色：将比色管放入分光光度计中，通过测量其吸光度值
来确定反应产物的含量。
e. 计算：根据国家标准中的计算公式，将吸光度值转化为粗
蛋白含量。
3. 注意事项：
a. 操作过程中要注意避免样品受到污染，以保证准确性。
b. 使用标准品进行校准，以确保测定结果的准确性。
c. 样品的测定要根据国家标准规定的条件和步骤进行，以保
证可比性。
需要注意的是，粗蛋白国标测定方法可能因国家标准的不同而
有所不同，具体的操作步骤和计算方式可能有所差异。
因此，在具体实验中需要参考并遵循国家标准的要求。
饲料中粗蛋白的测定(精)
饲料中粗蛋白的测定一、实验目的通过饲料样品中粗蛋白的测定，掌握饲料粗蛋白质含量的测定方法。
二、适用范围本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。
三、实验原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数，计算出粗蛋白含量。
四、试剂（1）硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。
（2）混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水；6g硫酸钾或硫酸钠，均为化学纯，磨碎混匀。
（3）氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（m/V）。
（4）硼酸：化学纯，2%水溶液（m/V）。
（5）混合指标剂：甲基红%乙醇溶液，溴甲酚绿%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为3个月。
（6）盐酸标准溶液：基准无水碳酸钠法标定；① L盐酸标准溶液：盐酸注入1000ml蒸馏水中。
② L盐酸标准溶液：盐酸注入1000ml蒸馏水中。
（7）蔗糖：分析纯。
（8）硫酸铵：分析纯，干燥。
（9）硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000mL，加入%溴甲酚绿乙醇溶液10mL，%甲基红乙醇溶液7mL，4%氢氧化钠水溶液，混合，置阴凉处保存期为1个月（全自动程序用）。
五、仪器设备（1）实验室用样品粉碎机或研钵。
（2）分样筛：孔径0.45mm（40目）。
（3）分析天平：感量0.0001g。
（4）消煮炉或电炉。
（5）滴定管：酸式，10、25mL。
（6）凯氏烧瓶：250mL。
（7）凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏式。
（8）锥形瓶：150、250mL。
（9）容量瓶：100mL。
（10）消煮管：250mL。
（11）定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白质测定仪。
六、分析步骤试样的选取和制备: 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。
（1）仲裁法①试样的消煮称取试样～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。
实验三 饲料中粗蛋白的测定
实验三 饲料中粗蛋白的测定一、适用范围本标准适用于配合饲料，浓缩饲料和单一饲料。
二、原理凯氏法测定试样中的含N 量，即在催化剂作用下，用H 2SO 4破坏有机物，使含N 物转化成（NH4）2SO 4，加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出N 含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出CP 含量。
三、试剂1、H 2SO 42、混合催化剂3、NaOH4、硼酸5、混合指示剂6、HCl 标准液7、蔗糖8、硫酸铵9、硼酸吸收液四、仪器设备1、粉碎机2、分样筛3、分析天平4、消煮炉5、滴定管6、凯式定N 仪7、锥形瓶 9、容量瓶 10、消煮管五、分析步骤1、试样的消煮，称取试样0.5g ，准确至0.0202g ，放入消煮管中加入6.4g 混合催化剂与试样混合均匀，再加入12ml H 2SO 4将消煮瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化、泡沫消失后，再加强火力（360-410℃）直至吴透明的蓝绿色，然后再继续加热至少2h 。
2、NH 3的蒸馏将装有硼酸吸收液和指示剂的锥形东半球，放在冷凝管末端，装好消煮管，打开碱并关，至消煮管中变为黑色，并闭碱开关，打开气天关，至锥形瓶内液体由粉红色变为橙黄色，到流出液体体积为150ml 时停止，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。
3、滴定蒸馏后的吸收液用HCl 标准溶液滴定，溶液由橙黄色变为粉红色为终点。
3、空白测定称取蔗糖0.5g 代替试样进行空白测定七、计算 CP=%100M25.60140.0C )V V (12⨯⨯⨯⨯-V 2：滴定试样时所需标准溶液体积mlV 1：滴定空白时，所需标准溶液体积mlC ：盐酸标准溶液浓度mol/lM ：试样质量 g0.0140：与1mol HCl 标准溶液相当的以g 表示的N 的质量。
6.25：N 换算成Br 的平均系数。
粗蛋白的测定方法
粗蛋白的测定方法
粗蛋白的测定可以使用以下几种方法：
1. Kjeldahl法：将样品中的蛋白质分解为氨基酸，然后用酸溶液将氨基酸转化为氨，再用碱滴定氨生成的酸，通过计算氨的含量来测定粗蛋白含量。
2. 比色法：利用蛋白质与某些特定试剂反应产生色素，通过测量产生的色素的吸光度来测定粗蛋白含量。
常用的试剂有布鲁斯试剂、费氏试剂等。
3. 紫外吸收法：通过测量蛋白质在特定波长下的紫外吸光度来测定粗蛋白含量。
蛋白质在280 nm处有吸光峰，可以利用这个波长进行测定。
4. 生物传感器法：利用特殊的生物传感器，如免疫传感器或酶传感器，通过与蛋白质特异性结合或酶催化反应来测定粗蛋白含量。
这种方法具有高灵敏度和高选择性。
需要注意的是，不同的测定方法适用于不同类型的样品和需要测定的蛋白质组分，选择合适的方法根据实际情况进行。
粗蛋白测定国标
粗蛋白测定国标（最新版）目录1.粗蛋白测定的概述2.粗蛋白测定的国标方法3.粗蛋白测定的重要性4.粗蛋白测定的实际应用正文1.粗蛋白测定的概述粗蛋白测定是一种常用的蛋白质检测方法，主要通过测量样品中蛋白质的总含量，从而得出粗蛋白的含量。
在农业、食品和饲料行业中，粗蛋白含量是衡量产品营养价值的重要指标，因此在这些领域中，粗蛋白测定具有重要的应用价值。
2.粗蛋白测定的国标方法在我国，粗蛋白测定的国标方法主要采用凯式定氮法。
该方法的原理是将样品中的蛋白质通过酸消化，转化为含氮物质，然后通过测定含氮物质的含量，最终计算出样品中的粗蛋白含量。
凯式定氮法具有操作简便、结果准确等优点，因此在我国的粗蛋白测定中得到了广泛应用。
3.粗蛋白测定的重要性粗蛋白测定在农业、食品和饲料行业中具有重要的意义。
首先，在农业生产中，通过测定作物的粗蛋白含量，可以评估作物的营养价值，从而指导农业生产和肥料施用。
其次，在食品工业中，粗蛋白含量是衡量食品营养价值的重要指标，对于保障食品安全和营养价值具有重要作用。
最后，在饲料行业中，粗蛋白含量是衡量饲料营养价值的重要指标，对于保证动物的生长发育和健康具有重要意义。
4.粗蛋白测定的实际应用粗蛋白测定在实际应用中具有广泛的应用价值。
在农业生产中，通过测定作物的粗蛋白含量，可以指导农民科学施肥，提高作物产量和品质。
在食品工业中，通过对食品的粗蛋白测定，可以评估食品的营养价值，为消费者提供健康、安全的食品。
在饲料行业中，通过测定饲料的粗蛋白含量，可以保证动物的生长发育和健康，提高饲料的利用率。
总之，粗蛋白测定在农业、食品和饲料行业中具有重要的应用价值。
粗蛋白测定
粗蛋白测定：
原理：饲草中的有机物质在催化剂的帮助下，用浓硫酸进行硝化作用，使蛋白质和氨态氮都转变成氨，并被浓硫酸吸收变为硫酸铵；而非含氮物质，则以二氧化碳、水、二氧化硫的气体状态逸出。
消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，释放出的氨，随汽水顺着冷凝管流入硼酸吸收液中，并与其结合成硼酸铵，然后以甲基红-溴甲酚绿作混合指示剂，用盐酸标准滴定溶液滴定，求出氮的含量，再乘以一定的换算系数，即得出试样中粗蛋白质的含量。
方法：
（1）试样的消化：称取0.5~1 g试样，无损地放入消化管中，加入硫酸铜0.4g，无水硫酸钾（或硫酸钠）6 g，与试样混合均匀，再加浓硫
酸10 mL。
于420℃下在消煮炉上消化1 h。
取出放凉后加入30 mL
水。
（2）氨的蒸馏：采用全自动定氮分析仪，按仪器本身测量程序进行测定。
（3）滴定：用0.1 mol/L盐酸标准滴定溶液滴定，溶液有蓝绿色变为灰红色为终点。
粗蛋白测定国标
粗蛋白测定国标
粗蛋白是指食品、饲料等样品中含有的蛋白质总量，不考虑其中各种不同蛋白质的含量和比例。
在中国，粗蛋白的测定主要依据的是GB/T 5009.5-2010《食品安全国家标准食品中粗蛋白质的测定》。
该标准规定了采用凯氏定氮法测定食品、饲料等样品中的粗蛋白含量。
具体步骤如下：
1. 取样：从不同位置和时间采集样品，并在室温下稍加搅拌混合均匀。
2. 提取：将样品加入适量的水或其他溶剂中，进行加热煮沸、冷却、过滤等处理，得到样品提取液。
3. 凯氏定氮：将样品提取液放入凯氏定氮仪中，进行反应和蒸馏，得到蒸馏液。
4. 测定：将蒸馏液中的氨气吸收在硫酸钠溶液中，然后用氢氧化钠溶液滴定过量的硫酸钠，根据消耗的氢氧化钠溶液的体积计算出粗蛋白含量。
需要注意的是，该标准仅适用于食品、饲料等样品中的粗蛋白含量测定，不适用于其他领域的粗蛋白测定。
同时，在实际操作过程中，需要严格按照标准要求进行样品采集、提取、凯氏定氮等步骤，以保证测定结果的准确性和可靠性。
GB 6432 饲料粗蛋白
主腼内容与适用范围
本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。
引用标准
ＧＢ６ ０１ 化学试剂 滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备
原理
凯 氏法 测 定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸钱。加入 强碱进行蒸馏使氨逸出，用砚酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数 ６．２５ ，计算出粗
７．，．３ 滴定
Ｇｓ／＇ｒ ６４３２一 ９４
用 ７．１．２．１或 ７．１．２．２法蒸馏后的吸收液立即用 。．１ｍ ｏｌ／Ｌ（４．６．１ ）或 ０．０２ ｍ ｏｌ／ｌ．（４．６． ２ ）盐酸标 准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。
７．２ 推 荐法 ７．２．１ 试样 的消煮
称取 。 ．５ － ｌｇ 试样（含氮量 ５＾８０ｍ ｇ）准确至。．００ ０２ｇ ，放入消化管中，加２片消化片（仪器自备） 或 ６．４ ｇ 混合催化剂（４．２），１２ｍ ｌ硫酸（４．１），于４２０℃下在消煮炉上消化１ｈ。取出放凉后加入３０ｍ ｌ
蛋 白含量 。
４ 试剂
４．１ 硫酸（ＧＢ ６２５）：化学纯 ，含量为 ９８％ ，无氮。
４．２ 混合催化剂：０．４ ｇ 硫酸铜，５个结晶水（ＧＢ６ ６５），６ｇ 硫酸钾（ＨＧ３－９２０）或硫酸钠（ＨＧ３－９０８），
均为化学纯 ，磨碎混匀。 ４．３ 氢氧化钠（ＧＢ６ ２９）：化学纯，４０％水溶液（Ｍ／Ｖ）ｏ ４．４ 硼酸（ＧＢ６ ２８）：化学纯，２％水溶液（ＭＹ ）． ４．５ 混合指示剂：甲基红（ＨＧ３－９５８）０．１ ％乙醇溶液，澳甲酚绿（ＨＧ ３－１２２０）０．５％ 乙醉溶液，两溶液 等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。 ４．６ 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按 ＧＢ ６０１制备。 ４．６． １ ０．１ ｍ ｏｌ／Ｌ盐酸（ＨＣｌ）标准溶液：８．３ｍ Ｌ盐酸（ＧＢ６ ２２），分析纯，注入 １Ｏ ＯＯＭＩ蒸馏水中。 ４．６．２ ０．０２ｍ ｏｌ／Ｌ盐酸（ＨＣｌ）标准溶液：１．６７ｍ ｌ，盐酸（ＧＢ６ ２２），分析纯，注入 １Ｏ ＯＯｍｌ蒸馏水中。
粗蛋白测定国标
粗蛋白测定国标摘要：一、引言二、粗蛋白测定国标的方法1.样品处理2.测定原理3.测定步骤4.结果计算与表示三、国标中粗蛋白测定的注意事项四、总结与展望正文：【一、引言】在饲料、食品、农业等领域，粗蛋白测定是一项重要的工作。
为了保证测定结果的准确性和可靠性，我国制定了一系列国家标准。
本文将详细介绍粗蛋白测定的国标方法，以期为相关领域的工作者提供参考。
【二、粗蛋白测定国标的方法】1.样品处理样品处理是粗蛋白测定过程中的关键环节。
首先，对样品进行粉碎，使其达到一定的细度。
然后，将粉碎后的样品在规定的温度和时间内进行干燥，以去除样品中的水分。
最后，将干燥后的样品进行研磨，使其均匀。
2.测定原理粗蛋白测定主要采用凯氏定氮法。
该方法基于氮元素与蛋白质的定量关系，通过测定样品中的氮含量来推算蛋白质含量。
3.测定步骤（1）将处理好的样品放入消化管中，加入适量的硫酸铜和硫酸钾混合液，进行消化。
（2）将消化后的样品溶液过滤，去除杂质。
（3）将过滤后的溶液加入碱性溶液中，使其中的氨气挥发。
（4）收集挥发的氨气，通过滴定法测定氨气的体积。
（5）根据氮元素与蛋白质的换算系数，计算出样品中的蛋白质含量。
4.结果计算与表示粗蛋白含量计算公式为：蛋白质含量（%）=（氮含量（mg/kg）×6.25）/样品质量（kg）×100%。
结果保留两位小数。
【三、国标中粗蛋白测定的注意事项】1.样品处理过程中，要确保干燥温度和时间的准确性，以免影响测定结果。
2.消化过程中，要控制硫酸铜和硫酸钾的用量，避免过量导致环境污染。
3.测定过程中，要注意氨气的收集与测定，确保数据的准确性。
4.结果计算时，要准确使用氮元素与蛋白质的换算系数。
【四、总结与展望】粗蛋白测定国标方法为相关领域的工作者提供了一种准确、可靠的手段。
在实际应用中，我们要严格按照国标要求进行操作，以确保测定结果的准确性。
饲料中粗蛋白的测定(精)
一、实验目的通过饲料样品中粗蛋白的测定，掌握饲料粗蛋白质含量的测定方法。
二、适用范围本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。
三、实验原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。
四、试剂（1）硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。
（2）混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水；6g硫酸钾或硫酸钠，均为化学纯，磨碎混匀。
（3）氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（m/V）。
（4）硼酸：化学纯，2%水溶液（m/V）。
（5）混合指标剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为3个月。
（6）盐酸标准溶液：基准无水碳酸钠法标定；①0.1mol/L盐酸标准溶液：8.3mL盐酸注入1000ml蒸馏水中。
②0.02mol/L盐酸标准溶液：1.67mL盐酸注入1000ml蒸馏水中。
（7）蔗糖：分析纯。
（8）硫酸铵：分析纯，干燥。
（9）硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000mL，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1%甲基红乙醇溶液7mL，4%氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为1个月（全自动程序用）。
五、仪器设备(1)实验室用样品粉碎机或研钵。
(2)分样筛：孔径0.45mm(40目)。
(3)分析天平：感量0.0001g。
(4)消煮炉或电炉。
(5)滴定管：酸式，10、25mL。
(6)凯氏烧瓶：250mL。
(7)凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏式。
(8)锥形瓶：150、250mL。
(9)容量瓶：100mL。
(10)消煮管:250mL。
(11)定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白质测定仪。
六、分析步骤试样的选取和制备：选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。
3 粗蛋白测定
三饲料中粗蛋白的测定1 适用范围本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中粗蛋白含量的测定。
2 原理凯氏定氮法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
3 试剂3.1 硫酸：化学纯，含量为98%，无氮；3.2 混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水，6g硫酸钾或硫酸钠，均为化学纯，磨碎混匀；3.3 氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（m/V）；3.4 硼酸：化学纯，2%水溶液（m/V）；3.5 混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月；3.6 盐酸标准溶液：基准无水碳酸钠法标定；3.6.1盐酸标准溶液0.1mol/L：8.3mL盐酸注入1000mL蒸馏水中。
3.6.2盐酸标准溶液0.02mol/L：1.67mL盐酸注入1000mL蒸馏水中。
3.7 蔗糖：分析纯；3.8 硫酸铵：分析纯，干燥；3.9 硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。
4 仪器设备4.1 实验室用样品粉碎机或研钵；4.2 分样筛：孔径0.45 mm(40目)；4.3 分析天平：感量0.0001 g；4.4 消煮炉或电炉；4.5 滴定管：酸式，10、25 mL；4.6 凯氏烧瓶：250 mL；4.7 凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式；4.8 锥形瓶：150、250 mL；4.9 容量瓶：100 mL；4.10 消煮管：250 mL；4.11 定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动，全自动蛋白质测定仪。
5 分析步骤5.1半微量法5.1.1试样的消煮称取试样0.2～0.5g（玉米、小麦称0.5g；豆粕称0.3g；鱼粉羽毛粉称0.2g；精确至0.0002g），放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热40min，消化全过程至少2h。
杜马斯燃烧法测定粗蛋白
杜马斯燃烧法测定粗蛋白
杜马斯燃烧法是一种测定样品中粗蛋白的方法，其原理是通过燃烧样品来释放其中的氮，然后测定氮的含量，从而计算出粗蛋白的含量。
这种方法具有较高的准确性和快速性，因此在许多领域得到了广泛应用。
在测定过程中，首先需要称取一定量的样品，并将其置于燃烧管中。
然后，在高纯氧气的环境下，将样品进行燃烧，使样品中的氮元素转化为氮氧化物。
接着，通过还原管将氮氧化物还原为氮气，并使用热导检测器测定氮气的含量。
最后，根据氮的含量和样品的质量，可以计算出样品中粗蛋白的含量。
杜马斯燃烧法具有许多优点，如测定速度快、准确度高、操作简便等。
此外，该方法还可以测定其他元素，如碳、氢、硫等，因此具有广泛的应用范围。
该方法已经被美国、德国、英国、日本等发达国家采用，作为饲料粗蛋白含量的官方测定方法。
在测定过程中，需要注意一些细节，如样品的处理、燃烧条件的控制等，以确保测定结果的准确性和可靠性。
此外，还需要注意该方法可能存在的误差和干扰因素，如样品中其他元素的干扰、燃烧不完全等，需要进行相应的校正和处理。
总之，杜马斯燃烧法是一种准确、快速、简便的测定粗蛋白的方法，在农业、食品、饲料等领域得到了广泛应用。
在实际应用中，需要注意细节和误差的处理，以确保测定结果的准确性和可靠性。
粗蛋白含量测定
粗蛋白含量的测定（凯氏定氮法）I. 试剂1. CuSO45H2O2. K2SO43. H2SO44. 硼酸（20g/L）5. NaOH 溶液（40g/L）6. 标准H2SO4/HCI （0.05mol/L）7. 甲基红指示剂（0.1g甲基红溶于100mL95%乙醇），溴甲酚绿指示剂（0.1g溴甲酚绿溶于100mL95%乙醇），临用前1 : 5（V/V）混合。
II •供试样品的制备称取0.20-2.00g固体试样或2.00 g-5.00半固体试样或吸取10.00m L-25.00m L液体试样（约相当氮30mg-40mg）,移人干燥的100mL或500mL定氮瓶中，加人0.2g 硫酸铜,6g硫酸钾及20mL硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45角斜支于有小孔的石棉网上。
小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5 h-1h。
取下放冷，小心加入20mL水。
放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并人容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。
同时做试剂空白试验。
III •测定按图安装定氮装置1- -电炉；2- -水蒸气发生器（2L平底烧瓶）;3- -螺旋夹；4- 小漏斗及棒状玻塞；5- -反应室；6- -反应室外层；7- -橡皮管及螺旋夹；8- -冷凝管；9- -蒸馏液接收瓶于水蒸气发生瓶内装水至三分之二处， 加人数粒玻璃珠，加甲基红指示液数滴及 数毫升硫酸，以保持水呈酸性，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
IV •向接收瓶内加入10mL 硼酸溶液（20g/L ）及1-2滴混合指示液，并使冷凝管的 下端插入液面下，准确吸取10mL 试样处理液由小漏斗流入反应室，并以 10mL 水洗涤小烧杯使流入反应室内，棒状玻塞塞紧将 10mL 氢氧化钠溶液（400g/L ）倒 入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以 防漏气。
饲料粗蛋白质GBT6432-94
饲料粗蛋白质的测定方法（GB/T6432-94）1 主题内容与适用范围本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。
2 引用范围GB 601 化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备3 原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
假如强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
4 试剂4.1 硫酸（GB 625）：化学纯，含量为98%，无氮。
4.2 混合催化剂：0.4g 硫酸铜，5个结晶水（GB 665），6g硫酸钾（HG 3-920）或硫酸钠（HG 3-908），均为化学纯，磨碎混匀。
4.3 氢氧化钠（GB 629）：化学纯，40%水溶液（M/V）。
4.4 硼酸（GB 628）：化学纯，2%水溶液（M/V）。
4.5 混合指示剂：甲基红（HG 3-958）0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3-1220）0.5乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
4.6 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB 601制备。
4.6.1 0.1mol/L盐酸（HCl）标准溶液：8.3mL盐酸（GB 622），分析纯，注入1000mL蒸馏水中。
4.6.2 0.02mol/L盐酸（HCl）标准溶液：1.67mL盐酸（GB 622），分析纯，注入1000mL 蒸馏水中。
4.7 蔗糖（HG 3-1001）：分析纯。
4.8硫酸铵（GB1396）：分析纯，干燥。
4.9 硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000mL，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1%甲基红乙醇溶液7mL，4%氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置于阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。
5 仪器设备5.1 实验室用样品粉碎机或研钵。
5.2 分样筛：孔径0.45mm（40目）。
5.3 分析天平：感量0.0001g。
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粗蛋白测定方法—凯式定氮法粗蛋白crude protein；crude matter（DM）食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。
不仅包括蛋白质这一物质，它涵盖的范围更广，包括含氮的全部物质，及真蛋白质和含氮物（氮化物）。
换句话说，粗蛋白是食品、饲料中含氮化合物的总称，食物中以大豆的粗蛋白含量最高，肉类次之。
所以说，粗蛋白是一种既包括真蛋白又包括非蛋白的含氮化合物，后者又可能包括游离氨基酸、尿素、硝酸盐和氨等。
然而，不同蛋白质的氨基酸组成不同，其氮含量不同，总氮量换算成蛋白质的系数也不同。
总之，粗蛋白是食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。
我们可以通过粗蛋白测定仪即凯氏定氮仪来测量粗蛋白的含量，测量步骤如：蛋白质含氮量约为16%（这已通过多次试验得出），再用凯氏法测出总氮量，再乘以6.25就可求得粗蛋白的含量。
一、实验原理蛋白质是由碳、氢、氧、氮及少量硫元素组成。
这些元素在蛋白质中含量都有一定比例关系，其中含碳50～55%、氢6～8%、氧20～23%、氮15～17%和硫0.3～2.5%。
此外在某些蛋白质中还含有微量的磷、铁、锌、铜和钼等元素。
由于氮元素是蛋白质区别于糖和脂肪的特征，而且绝大多数蛋白质的氮元素含量相当接近，一般恒定在15～17%，平均值为16%左右，因此在蛋白质的定量分析中，每测得1克氮就相当于6.25克蛋白质。
所以只要测定出生物样品中的含氮量，再乘以6.25，就可以计算出样品中的蛋白质含量。
含氮有机物与浓硫酸共热，被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，氮进一步与硫酸作用生成硫酸铵。
由大分子分解成小分子的过程通常称为”消化”。
为了加速消化，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高消化液的沸点(290℃→400℃)，加入硫酸铜作为催化剂，过氧化氢作为氧化剂，以促进反应的进行。
反应(1)(2)在凯氏烧瓶内完成，反应(3)在凯氏蒸馏装置中进行，其特点是将蒸汽发生器、蒸馏器及冷凝器三个部分融为一体。
由于蒸汽发生器体积小，节省能源，本仪器使用方便，效果良好。
硫酸铵与浓碱作用可游离出氨，借水蒸气将产生的氨蒸馏到一定浓度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后使溶液中的H+浓度降低，然后用标准无机酸滴定，直至恢复溶液中原来H+浓度为止，最后根据所用标准酸的量计算出待测物中总氮量。
二、仪器和试剂1、仪器:消化管或凯氏烧瓶、凯氏定氮蒸馏装置、电炉、100mL 锥形瓶、100mL 量筒、表面皿、酸式滴定管、小漏斗、玻璃珠等。
2、试剂:（1）血清或卵清蛋白等其他含蛋白质样品；（2）消化液：30%过氧化氢、硫酸与水的比例为3∶2∶1，临用时配制；（3）催化剂：硫酸铜(CuSO4•5H2O)与硫酸钾(K2SO4)以1：3配比研磨混合；（4）50%氢氧化钠溶液；（5）2%硼酸溶液;(6)标准盐酸溶液(约0.01mol/L);(7)混合指示剂(田氏指示剂)混合指示剂由50mL 0.1%甲烯蓝乙醇溶液与200mL0.1%甲基红乙醇溶液混合配成贮于棕色瓶中配用。
这种指示剂酸性时为紫红色，碱性时为绿色，变色范围很窄且很灵敏。
三、实验步骤(一)安装微量凯氏定氮仪定氮仪由蒸汽发生器、反应室、冷凝管三部分组成。
蒸汽发生器包括一个电炉及一个3～5升容积的烧瓶。
反应室上边有两个小烧杯，一个供加样，一个盛放碱液。
样品和碱液由此可直接到反应室中。
反应室中心有一长玻璃管，其上端通到反应室外层，下端靠近反应室的底部。
反应室下端底部有一开口，上有橡皮管和管夹。
由此放出反应废液。
反应所产生的氮可通过反应室上端细管经冷凝管通入收集瓶中。
反应室与冷凝管之间由橡皮管相连。
安装仪器时，将蒸汽发生器垂直地固定在铁架台上，用橡皮管把蒸汽发生器、反应室、冷凝管连接起来。
橡皮管连接的部位应在同一水平位置。
冷凝管下端与实验台的距离以放得下收集瓶为准。
安装完毕后，不得轻易移动，以免仪器损坏。
要认真检查整个装置是否漏气，以保证所测结果的准确性。
(二)样品的处理(1)固体样品:随机取一定量研磨细的样品放入恒重的称量瓶中，置于105℃的烘箱中干燥4h，用坩埚钳将称量瓶取出放入干燥器内，待降至室温后称重，随后继续干燥样品，每干燥1h，称重一次，恒0重即可。
(2)血清样品: 取人血(或猪血)放入离心管中，与冰箱中放置过夜。
次日离心除去血凝块，上层透明清液，即为血清。
吸出1mL 血清加到50mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，混匀备用。
溶液如果显混浊，加少量氯化钠再混匀。
(3)卵清蛋白: 取2g 卵清蛋白溶于0.9%NaCl 溶液并稀释至100mL。
如有不溶物，离心取上清液备用。
(三)消化取5支消化管并编号，在1、2、3号管中各加入精确称取干燥样品(注意：加样品时应直接送入管底，避免沾到管口和管颈上)，加催化剂0.5g，混和消化液3mL，在4、5号管中各加相同量的催化剂和混合消化液(若样品是液体时，还要加与样品等体积的蒸馏水)作为对照，用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质。
摇匀后，将5支消化管放在通风厨内的远红外消煮炉上消化。
先用小火加热煮沸，不久看到消化管内物质变黑，并产生大量泡沫，此时要特别注意，不能让黑色物质上升到消化管的颈部，否则将严重地影响样品测定结果。
当混合物停止冒泡，蒸汽与二氧化碳也均匀地放出时，适当加强火力。
在消化时，应是全部样品都浸泡在消化液中，如在瓶颈上发现有黑色颗粒，应小心地将消化倾斜振摇，用消化液将它冲洗下来。
通常消化需要1～3h(对于那些赖氨酸含量较高的样品需要更长的时间)。
待消化液变成褐色后，为了加速消化完成，可将消化管取出，稍冷，加30%过氧化氢溶液1～2滴于管底消化液中，再继续加热0.5h。
消化完毕，取出消化管冷却至室温。
(四)蒸馏(1)仪器的洗涤:仪器应先经一般洗涤，再经水蒸气洗涤。
目的在于洗去冷凝管中可能残留的氨。
对于处于使用状态的仪器(正在测定中的仪器)加样前使蒸汽通过1～2min 即可，对于较长时间未使用的仪器，必须用水蒸气洗涤到吸收蒸汽的硼酸—指示剂混合液中指示剂的颜色合格为止。
洗涤方法如下：取2～3个100mL 锥形瓶，加入10mL 2%硼酸、2滴混合指示剂，用表面皿覆盖备用。
现煮沸蒸汽发生器，其中盛有2/3体积的用几滴硫酸酸化过的蒸馏水，样品杯中也加入2/3体积蒸馏水进行水封。
关闭夹子使蒸汽通过反应室中的插管进入反应室，再由冷凝管下端逸出。
在冷凝管下端放一空烧杯以承受凝集水滴。
这样用蒸汽洗涤5min 左右，在冷凝管下口放一个准备好的盛有硼酸—指示剂的锥形瓶，位置倾斜，冷凝管下口应完全浸泡于液体内，继续用蒸汽洗涤1～2min，观察锥形瓶中的溶液是否基本上不变色，若不变色，则证明蒸馏器内部已洗涤干净。
下移锥形瓶，使硼酸液面离开冷凝管口约1cm，继续通蒸汽1min。
最后用蒸馏水冲洗冷凝管外口，排废开始。
用右手轻提样品杯中棒状玻塞，使水流入反应室的同时，立即用左手关闭夹子，盖好玻塞。
由于反应室外层中蒸汽冷缩、压力降低，反应室内废液通过反应室中插管自动抽到反应室外壳中，再在样品杯中加入2/3体积蒸馏水，如此反复三次既可排尽废液及洗涤液。
打开夹子将反应室外壳中积存的废液排出，关闭夹子再使蒸汽通过全套蒸馏仪1~3min，可进行下一次蒸馏。
(2)样品及空白的蒸馏: 取5个100mL 锥形瓶，分别加入2%硼酸10mL，混合指示剂2滴，溶液呈紫红色，用表面皿覆盖备用。
把消化管中的消化液全部转移到样品杯中，用约2mL 蒸馏水冲洗消化管，重复3次，把洗涤液都倒入样品杯中，打开样品杯的棒状玻塞，将样品放入反应室，用少量蒸馏水冲洗样品杯后也使之流入反应室，盖上玻塞，并在样品杯中加约2/3体积的蒸馏水进行水封。
而后将装有硼酸—指示剂的锥形瓶放在冷凝管口下方，打开存放碱液杯下端的夹子，放10mL40%氢氧化钠溶液于反应室后，立即上提锥形瓶，使冷凝管下口浸没在锥形瓶的液面下。
反应液沸腾后，锥形瓶中的硼酸—指示剂混合液由紫红色变为绿色，自变色时开始计时，蒸馏3～5min。
移动锥形瓶，使硼酸液面离开约1cm，并用少量蒸馏水冲洗冷凝管下口外面，继续蒸馏1min，用少量蒸馏水冲洗冷凝管下端尖嘴，将锥形瓶取出，用表面皿覆盖以待滴定。
排液和洗涤等操作与前面相同。
排废洗涤后，可进行下一个样品的蒸馏(每一个样品要同时做三份，以求得准确结果)。
待样品和空白消化液蒸馏完毕后，同时进行滴定。
(五)滴定全部蒸馏完毕后，用0.001mol/L 标准盐酸溶液滴定各锥形瓶中收集的氨量，直至硼酸—指示剂混合液由绿色变回淡葡萄紫色，即为滴定终点，记录所耗HCl 溶液量。
五、计算样品的总氮含量(%)=(A—B)×0.001×14.008×100/1000×C若测定的样品含氮部分只是蛋白质(如血清)，则：样品中的蛋白质含量(%)=(A－B)×0.001×14×6.25×100/1000×CA－滴定样品用去的盐酸体积(mL)； B－滴定空白用去的盐酸体积(mL)；C－称量样品的量(g)；0.001－盐酸的摩尔浓度(mol/L)；14－氮原子量；6.25－系数(1mL0.001mol/L 盐酸相当于0.14mg 氮)。
若样品中除有蛋白质外，尚有其它含氮物质，则样品蛋白质含量的测定要复杂一些。
首先，需向样品中加入三氯乙酸，使其最终浓度为5%，然后测定未加入三氯乙酸的样品及加入三氯乙酸后样品的上清液中的含氮量，得出非蛋白氮量，从而计算出蛋白氮，再进一步折算出蛋白质含量。
蛋白氮=总氮－非蛋白氮粗蛋白质含量(%)=蛋白氮×6.25粗纤维测定方法粗纤维(Crude Fiber,缩写CF，是膳食纤维的旧称，现已不用。
）粗纤维是植物细胞壁的主要组成成分，包括纤维素、半纤维素、木质素及角质等成分。
吃些含粗纤维的食物可以帮助消化，加强肠胃功能，是有益处的，但是吃多了很明显会因无法消化而造成腹胀。
1、原理用浓度准确的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醇除去可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量为粗纤维。
它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下测出的概略成分，其中以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素。
2、仪器和试剂2.1试剂本方法试剂使用分析纯，水为蒸馏水(1）硫酸溶液（0.128±0.005）mol/L；(2) 氢氧化钠溶液（0.313±0.005）mol/L；(3）酸洗石棉，加5% 氢氧化钠浸泡．在水浴上回流8h以上，再用热水充分洗涤．然后用 20%盐酸干燥，在 600--700℃下灼烧后．加水使成混悬物，储存于玻璃瓶中；(4) 95% 乙醇；(5）乙醚；（6）正辛醇（防泡剂）。
（丙酮、十氢奈）2.2仪器设备(1) 实验室用样品粉碎机，分样筛，孔径 1mm(18目 )；(2）分析天平，感量 0.0001g；(3）电力热器（电炉），可调节温度；(4)电热恒温箱（烘箱），可控制温度在130℃，高温炉，可控制温度在500-600℃。