粗蛋白检测方法

蛋白质的测定方法

1、原理

蛋白质是含氮有机化合物，与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后在碱性条件下蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量再乘以换算系数，即位蛋白质含量。

2、试剂

2.1、硫酸铜

2.2、硫酸钾

2.3、硫酸

2.4、2%硼酸溶液

2.5、混合指示剂：1份0.1%的甲基红与3份0.1%溴甲酚绿混合。

2.6、30%氢氧化钠溶液。

2.7、0.1M 盐酸标准溶液。

3、操作步骤

3.1、样品处理：称取0.1g-0.15g 固体样品置于消化管内再加入0.2g 硫酸铜，3g 硫酸钾及10ml 硫酸，然后放入消化装置中设定温度430℃，消化3h 。

3.2、打开蒸馏装置的电源，开启作为冷凝水的自来水龙头。

3.3、将消化好的消化管置于蒸馏装置的托盘上，落下安全门。

3.4、仪器开启后，按“设定”键光标显示在“换算系数”栏目中输入需要换算的数值6.25。

3.5、按“↑”键将光标移入“碱量”栏目中，输入需要的碱量体积50ml 。

3.6、按“↑”键将光标移入“吸收液量”栏目中，输入需要的吸收液量的体积30ml 。

3.7、按“↑”键将光标移入“样品量”栏目中，输入需要的样品量质量。

3.8、按“↑”键将光标移入“样品编号”栏目中，输入样品编号。

3.9、按“RUN ”键开始蒸馏工作，同时保存设定的参数。

4.0、滴定至终点时，仪器自动停止蒸馏。

4.1、按“保存”键返回主界面，再按“数据键”进去查看数据，选择要查看的样品编号，按“确定”键查看结果。

4、结果

()00.014 6.25100HCl V V C M

-⨯⨯⨯=⨯粗蛋白含量（%） V －样品消耗盐酸标准溶液的体积，单位ml ；

V 0－试剂空白消耗盐酸标准溶液的体积，单位ml ；

M －样品质量，单位g ；

0.014－盐酸标准溶液1ml 相当于氮克数；

6.25－氮换算成蛋白质的平均系数；