大肠杆菌培养

大肠杆菌培养
引言
大肠杆菌（Escherichia coli）是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性细菌。

它是一种常见的微生物实验室模型生物，在分子生物学研究、基因工程、生物技术等领域发挥着重要作用。

本文将介绍大肠杆菌的培养方法，包括培养基的配制、接种方法、培养条件的控制等。

培养基配制
大肠杆菌培养基的配制是培养大肠杆菌的重要前提，不同
的菌株和研究目的需要使用不同的培养基。

下面介绍两种常用的培养基配方：
Luria-Bertani（LB）培养基
LB培养基是最常用的大肠杆菌培养基之一，它是一种富含营养物质的培养基，适用于一般的大肠杆菌培养。

配方：
•水：800 ml
•Bacto-tryptone：10 g
•Yeast extract：5 g
•NaCl：10 g
•琼脂：15 g
将上述成分加入水中，搅拌均匀，然后加热至溶解，最后
将pH调节至7.0 ± 0.2。

M9盐基培养基
M9盐基培养基是一种缺乏有机碳源和氮源的无营养培养基，适用于研究大肠杆菌的生理特性或用于表达外源蛋白。

配方：
•水：700 ml
•Na2HPO4：12.8 g
•KH2PO4：3 g
•NH4Cl：1 g
•NaCl：0.5 g
•CaCl2：0.1 g
•MgSO4：0.2 g
•葡萄糖：2 g
•琼脂：15 g
将上述成分加入水中，搅拌均匀，然后加热至溶解，最后将pH调节至7.0 ± 0.2。

接种方法
大肠杆菌的接种方法有多种，常见的有无菌接种环和无菌注射器接种法。

下面分别介绍这两种接种方法：
无菌接种环接种法
步骤：
1.用火焰将无菌接种环烧红，冷却至适宜温度。

2.打开培养基瓶盖，用无菌接种环蘸取待接种的大肠
杆菌菌株。

3.快速将无菌接种环插入含有培养基的琼脂平板（或
试管）中，并迅速转动接种环1-2圈，使菌体均匀分布在
琼脂平板（或液体培养基）表面。

4.关闭琼脂平板（或试管）盖子，使琼脂凝固后，将
琼脂平板（或试管）置于适宜的培养条件下。

无菌注射器接种法
步骤：
1.用火焰将无菌注射器的针头烧红，冷却至适宜温度。

2.打开培养基瓶盖，用无菌注射器吸取待接种的大肠
杆菌菌株。

3.将无菌注射器的针头插入含有培养基的琼脂平板（或试管）中，向琼脂平板（或液体培养基）中注入适量
的大肠杆菌菌液。

4.关闭琼脂平板（或试管）盖子，使琼脂凝固后，将
琼脂平板（或试管）置于适宜的培养条件下。

培养条件控制
大肠杆菌的培养条件对其生长和繁殖有着重要的影响，下
面介绍一些常用的培养条件控制方法：
温度控制
大肠杆菌的适宜生长温度为37°C，因此在培养大肠杆菌时，需要将培养基置于恒温培养箱中，并严格控制温度。

氧气供应
大肠杆菌是一种好氧生物，对氧气的需求量较大。

因此，
在培养大肠杆菌时，需要在恒温培养箱中提供足够的氧气供应，可以通过轻轻晃动培养瓶或使用培养箱中的通气塞来增加氧气供应。

pH值控制
大肠杆菌的适宜生长pH范围为6.5-7.5，因此在培养大肠
杆菌时，需要控制培养基的pH值。

结论
通过本文介绍的培养基配制、接种方法和培养条件控制，
可以成功进行大肠杆菌的培养。

大肠杆菌的培养在生物学研究中具有重要的作用，对于基因工程和生物技术的开展有着积极的推动作用。

希望本文能为大肠杆菌培养提供一些参考和指导，帮助读者在实验中取得良好的结果。