HPLC法测定烟酸片的溶出度

色 谱 条 件 色 谱 柱： 赛 默 飞 Hypersil Gold C18 柱 11.0356、11.0438、11.0445、11.0550， 平 均 峰 面 积 为
（4.6 mm×250 mm，5 μm）； 流 动 相：0.1% 三 乙 胺 11.0420，RSD=0.07%（n=6），结果表明该方法精密度良好。
2.20 ～ 39.93 mg•L-1 浓度范围内显良好的线性关系（r=1）, 置 100 mL 容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为对照
平均回收率为 99.51%（n=9），RSD 为 0.79%。结论 : 该 品溶液。
方法准确、可靠，可用于烟酸片的溶出度测定。
溶出度供试品溶液的制备 取本品按照溶出度测定法
差异均不大，峰型均保持良好，本文流动相系统耐用性较好。
拓展测定比较 按处方比例自制三批样品，采用高效
液相法和紫外分光光度法对更多批次烟酸片溶出度进行拓
展测定比较，并采用统计学分析方法对测定结果差异进行
了分析评价，结果，高效液相法与紫外分光光度法测定结
果基本一致。
参考文献 [1] 孙丹杰 . 托伐他汀与烟酸缓释片联合治疗高脂血症 的疗效分析 [J]. 母婴世界 ,2019,（18）:104-104. [2] 韩奕奕 , 王霞 , 马颖清 , 等 . 乳粉中烟酸和烟酰胺 含量测定能力验证结果与分析 [J]. 食品安全质量检测学 报 ,2020,(17):93-99. [3] 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：二部 [S]. 北京：中国医药科技出版社，2020:1410-1411. [4] 韩 素 超， 张 红 中， 祖 振 涛， 等 .JJF（ 浙）10962014《药物溶出度仪校准规范》问题探讨 [J]. 计量与测试 技术，2020,（10）:104-105. [5] 刘晓雨，胡洋，王卓，等 . 烟酸在水中的溶解度及 介稳性质的研究 [J]. 化学工程，2019, 47(7)：35-40. [6] 纪 世 彬 . 高 效 液 相 色 谱 - 二 极 管 阵 列 检 测 器 法 测 定 复 合 维 生 素 B 片 中 5 种 组 分 的 溶 出 度 [J]. 安 徽 医 药 ,2020,24(8):1512-1514. [7] 蔡迪鸣 .HPLC 法同时测定党参中烟酸及党参炔苷 含量的方法探究 [J]. 医药前沿，2018, 8(18)：398-398. [8] 黄 丹， 丁 家 昱， 刘 秀 秀， 等 . HPLC 测 定 盐 酸 烟 酰美金刚胺中的烟酸及其他有关物质 [J]. 华西药学杂志， 2017, 32(4)：421-423. [9]Cellar Nicholas A.,McClure Sean C.,Reddy Todime M.,et al.A new sample preparation and separation combination for precise, accurate, rapid, and simultaneous determination of vitamins B-1, B-2, B-3, B-5, B-6, B-7, and B-9 in infant formula and related nutritionals by LC-MS/MS[J].Analytica Chimica Acta,2016，934：180-185. 作者简介：梁晓云，女，主管药师，主要从事食品药
（4.6 mm×250 mm，5 μm）， 流 动 相 为 0.1% 三 乙 胺 理论塔板数按烟酸计算不低于 2000。
（用醋酸调节 pH 值至 3.5）- 甲醇（90:10），流速为 1.0
对照品溶液的制备 精密称取烟酸对照品约 10 mg，
mL•min-1，检测波长 263 nm，柱温 30 ℃。结果 : 烟酸在 置 50 mL 容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度；精取 10 mL
用性进行了考
重现性试验 取样品（批号：42190701），加水 900 察，对流动相中甲醇的比例在 7%-13% 范围进行了考察；
mL，超声 20 min，滤过（0.45 μm 微孔滤膜），取 6 份 pH 值 在 3.0-4.0 范 围 进 行 了 考 察； 流 速 在 0.8、1.0、1.2
·78· 食品安全导刊 2021年6月
分析检测
稳定性试验 按对照品溶液配制方法制备对照品溶液，
流动相的选择 参阅相关资料 , [7-9] 对多套流动相系统进
按 2.1 色谱条件，分别在 0，1，2，4，8，12 h 进样，测 行了考察，采用本文流动相系统，峰型好，重现性高，保
得平均峰面积 9.4533，RSD=0.57%（n=6），结果表明供 留时间适度，系统稳定无干扰。
样 品 溶 出 度 测 定 取 3 批 样 品（ 批 号：42190701； 093170601；093171101）， 按 上 述 溶 出 度 供 试 品 溶 液 的 制备方法制备样品溶出液。用紫外分光光度法测定 3 批样 品的溶出度；同时用 HPLC 法，按 2.1 色谱条件测定 3 批 样品的溶出度。结果表明紫外分光光度法与 HPLC 法一致。
方法与结果
取续滤液 10 mL 置 25 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，作 为溶出度供试品溶液。
阴性对照溶液的制备 按烟酸片处方比例配成不含烟 酸的片剂，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
干扰试验 按 1 色谱条件，分别取对照品溶液、供试 品溶液、阴性对照溶液 20 μl 注入色谱仪。结果表明，样 品与对照品色谱图保留时间相同，阴性对照溶液在烟酸对 照品溶液保留时间处均无干扰。
方法学考察 线性关系考察 精密称取烟酸对照品适量，加水溶解 配成相应的质量浓度：2.20,5.18,10.12,14.98,20.06,25.03,3 0.00,39.93 mg·L-1，按 1 色谱条件，分别注入液相色谱仪， 记录色谱图 , 峰面积分别为：0.9549，2.3734，4.7284， 7.0481，9.4693，11.8369，14.2047，18.9383。 以 质 量 浓 度（C）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标进行线性回归， 回 归 方 程：A=0.4767C-0.0946，r=1， 结 果 表 明， 烟 酸 在 2.20 ～ 39.93 mg•L-1 范围内质量浓度与峰面积的线性关系 良好。 精密度试验 取上述对照品溶液，按 2.1 色谱条件， 精 密 连 续 进 样 6 次， 测 得 峰 面 积 为 11.0400、11.0331、
烟酸片属于维生素类药，烟酸也称维生素 B3，分子 式 :C6H5NO2，化学名称 3- 吡啶甲酸，耐热、能升华。烟 酸在体内转化为烟酰胺，再与核糖腺嘌呤等组成烟酰胺腺
（《中华人民共和国药典》2020 年版二部，通则 0931 第 一法），以水 900 mL 为溶出介质，转速 100 r·min-1，依 法操作，经 20 min 时取样滤过（0.45 μm 微孔滤膜），精
Technology 科技 分析检测
HPLC 法测定烟酸片的溶出度
本文 目 的 为 建 立 烟 酸 片 溶 出 度 的 高 效 液 相 测 定 方 法。 方 法 : 色 谱 柱 为 Hypersil Gold C18 柱
（用醋酸调节 pH 值至 3.5）- 甲醇（90:10），流速为 1.0 mL·min-1，检测波长 263 nm，柱温 30℃，进样量 20 μl，
品质量分析及质量标准研究。张静，女，主任药师，主要
从事食品药品质量分析及质量标准研究。
长 262 nm 的色谱图面积，故高效液相检测波长选择 263
□□梁晓云 张 静
nm。
安徽省阜阳市食品药品检验检测中心
·79· Jun. 2021 China Food Safety
嘌呤二核苷酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，为脂质氨基 酸、蛋白、嘌呤代谢，是组织呼吸的氧化作用和糖原分解 所必需。多用于预防和治疗烟酸缺乏症、糙皮病，也用作 血管扩张药，治疗高脂血症等 [1]，亦可作为食品饮料的添 加剂 [2]，在食品领域应用较广。《中华人民共和国药典》 2020 年版二部，烟酸片溶出度采用紫外分光光度法检测 [3]， 近年来未见 HPLC 法测定烟酸片溶出度的相关报道 [4-6]。本 文研究建立了 HPLC 法测定烟酸片溶出度的方法，获得了 满意的结果。
加样回收率试验 精密称取已知含量的烟酸片（约相 当于烟酸 50 mg），置 1000 mL 容量瓶中，加水超声 20 min，冷却，加水稀释至刻度。精取 5 mL，置 25 mL 容量 瓶中，共取 9 份分三组，每组再分别精密加入浓度为 0.0539 mg·mL-1 的对照品溶液 4，5，6 mL，制成低、中、高三 组浓度的供试品溶液 , 加水稀释至刻度。按 2.1 色谱条件测 定，计算回收率，平均回收率为 99.51%，RSD=0.79%。 结果见表 1。
讨论
检测波长的选择 高效液相 DAD 光谱扫描烟酸对照品 溶液最大吸收波长为 263 nm；采用 UV2600 在 200 ～ 400 nm 扫描烟酸对照品溶液，最大吸收波长 262 nm。经考 察高效液相选择波长 263 nm 的色谱图面积大于选择波
色谱仪配套专用柱及相应的高效液相色谱仪上进行了考察，
材料
仪 器 Thermo UItiMate3000 高 效 液 相 色 谱 仪， DAD3000 检 测 器；UV2600 紫 外 分 光 光 度 计；2015CCE070 溶出仪；梅特勒 XPE205DR 电子天平（0.01 mg）。
试 剂 与 药 品 烟酸对照品（批号：100434-201603， 含量：99.8%，中国食品药品检定研究院）；甲醇为色谱 纯，三乙胺、醋酸为分析纯，水为去离子水，其它试剂为 分析纯；烟酸片（均为上海上药信谊药厂有限公司，批号： 42190701；093170601；093171101 规格：50 mg）。
续滤液，分别加水稀释制成每 1 mL 中约含 20 μg 的溶液， mL•min-1 范围进行了考察；柱温在 25℃、30℃、35℃范
按 2.1 色 谱 条 件 进 样 测 定， 测 得 溶 出 度 为 99.1、99.5、 围进行了考察；色谱柱使用了超高效色谱柱、Waters 高效
99.7、99.2、99.4、99.6，平均溶出度 99.4%，RSD 为 0.23% （n=6）。结果表明该方法样品重现性良好。