生物技术习题集

现代生物技术概论
一、名词解释；
生物技术基因工程细胞工程酶工程发酵工程蛋白质工程限制性内切核酸酶同裂酶同尾酶 DNA重组技术假基因体细胞杂交转化子和重组子花药培养生物信息学
二、填空题：
1、细胞工程就是在（）上研究、开发、利用各类细胞的工程，即人们根据科学设计改变（），并通过（），大量培养（）乃至（）的技术。

2、形成平末端的方法有（），（），（）。

3、DNA含有四种杂环碱基，即（）、（）、（）与（）。

4、根据搅拌的方式不同，好氧发酵设备又可分为（）（）。

5、酶的制备流程一般包括（）（）（）（）（）（）六个步骤。

6、DNA片段重组连接时，如要克隆PCR产物，PCR产物可直接用（）连接，而无须用（）处理。

7、需要部分酶切时可采取的方法有（1）（）、（2）（）、（3）（）
8、在动物细胞组织培养中，专为大量培养哺乳动物细胞设计的方法有：（）、（）和（）。

9、限制酶命名采用Smith和A thens提议的方案，第一个字母大写取自来源细菌的（）；第
二、三个字母取自来源细菌的（）；第四个字母（如果有）取自来源菌的（），如果一个菌株中有几种限制性内切酶，则在代表菌株的字母后用（）表示。

10、限制酶识别序列为n个碱基，则其切割频率的理论值应是（）
11、动物细胞工程是细胞工程的一个重要的分支，它主要从（）和（）的层次，根据人类的需要，探索、改造（）和大量培养细胞和动物本身来收获（）。

12、1975年Kohler和Milstein肿瘤细胞融合，获得（），并由此获得1984年诺贝尔生理学与医学奖。

13、1997年人的干细胞被首次培养成功，从而科学家开始了“定制”器官救助生命的（），即（）。

14、发酵工业生产上常用的微生物主要有（）（）（）（）。

15、重组DNA导入植物细胞常采用农杆菌介导的（）（）（）（）。

导入动物细胞常用的方法有（）介导的（）（）（）等。

16、筛选克隆子常采用克隆子携带的（）（）等方法。

17、评价固定化酶的指标有（）（）（）。

18、酶反应器的基本类型有（）（）（）（）。

19、蛋白质的分子构象又称为（）（）（）（）等。

20、改变蛋白质结构的核心技术是（），目前常用的主要有（）和（）。

21、克隆载体有（）和（）等，供不同实验要求选择使用。

22、影响核酸限制性内切酶活性的因素有：（）、（）、（）。

23、基因工程又称DNA重组技术，其最大特点是（），（）。

三、单选择题
1、现代生物技术是一项高新技术，它具有高新技术的“六高”特征,下面（）不属于“六高”？A高效益 B高风险 C高势能 D高效率
2、生物技术是以下面（）为核心
A基因工程 B细胞工程 C酶工程 D发酵工程
3、现代生物技术则是（）发展起来的
A 70年代初80年代末
B 60年代末70年代初
C 80年代初90年代末
D 70年代末80年代初
4、下面哪个不是生物技术包括的基本内容（）
A基因工程 B细胞工程 C酶工程 D遗传工程
5、用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化（）
A．核酸内切酶 B. 核苷酸激酶 C. 核酸外切酶
D. 末端转移酶
E. 碱性磷酸酶
6、分子克隆中用T载体主要是与下列哪种产物连接（）
A．单酶切产物 B. 双酶切产物 C. 同裂酶产物
D. PCR产物
E. 酶切后形成的平末端产物
7、分离目的基因常采用（）从基因组DNA中扩增含目的具有的DNA片断，或者用分子杂交等方法从构建的（）或（）中获得含目的基因的克隆子。

8、采用BamH I单切载体和目的基因后，进行重组连接前要（）
A． 65℃处理10分钟使BamH I灭活。

B．用碱性磷酸酶处理载体防止其自身环化。

C．电泳检测酶切结果。

D． A、B、C都正确
9、在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（）
A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶
D.核酸内切酶
E. RNAase
10、下列关于限制酶的叙述错误的是( )
A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。

B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。

C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。

D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。

E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。

11、下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（）
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞
C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变
D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
12、下列不属于动物细胞工程应用的是（）
A．大规模生产干扰素，用于抵抗病毒引起的感染
B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C．大规模生产食品添加剂、香料等
D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖
13、采用BamH I单切载体和目的基因后，进行重组连接前要（）
A． 65℃处理10分钟使BamH I灭活。

B．用碱性磷酸酶处理载体防止其自身环化。

C．电泳检测酶切结果。

D． A、B、C都正确。

E．只有A、C 正确。

14、粘末端连接的优点是操作简便且（）
A．可产生新的酶切位点 B. 载体易自身环化 C. 易于回收片段
D．具有方向性 E. 选时更简便
15、关于PCR扩增停滞的原因有很多种，但下列各项中（）项不是主要原因。

A.底物（模板）过剩
B.dNTP的大量消耗
C.产物的聚集
D.非特异性产物的竞争性抑制
16、II类限制酶反应中必须的阳离子是（）
A. Na +
B. Ca2+
C. Mg2+
D. Zn2+
E. Mn2+
17、组织培养出来的植物一般很少有植物病毒危害，其主要原因在于（）
A．在组织培养过程中细胞进行的是快速分裂和分化 B．人工配制的培养基上，植物病毒根本无法生存
C．组织培养出来的植物体内水分太少，无机盐含量高 D．进行组织培养的过程都是在无菌条件下进行的
18、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种培养方式称之为（）
A. 原代培养
B. 传代培养
C. 细胞株
D. 细胞系
19、下列叙述中，与植物体细胞杂交无关的是( )
A．利用离心、振动、电刺激等诱导
B．快速繁殖、培育无病毒植物
C．克服远缘杂交不亲和的障碍
D．使两个亲本的优良性状组合到一起
四、简答题
1、在DNA分子克隆中，Klenow酶的主要用途是什么？
2、简述基因工程的基本路线及关键问题。

3、简述限制性内切核酸酶和DNA连接酶的作用机制。

4、简述固定化发酵的优点
5、为什么要进行酶的固定化？
6、何谓酶工程？包含哪些内容？
7、质粒载体通常具备哪几个基本条件？常用的质粒载体有哪些？
8、什么是同聚尾连接法？具有哪些优缺点？
9、简述PCR技术的原理。

10、简述动物细胞融合的方法。

五、论述题
1、怎样从茎尖培养出一群完整的植株？
2、论述利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体的路线。

3、如何理解生物技术是一把双刃剑？
2、比较分批发酵、连续发酵和补料分批发酵的优缺点。