HBV—DNA乙肝患者的检测结果观察与分析

HBV—DNA乙肝患者的检测结果观察与分析
目的：观察并分析乙肝患者的乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）的检测结果。

方法：随机选取我院门诊及住院部在2012年2月-2013年4月收治的1000例慢性乙肝患者为研究对象，应用荧光定量-核酸扩增（PCR）检测法以及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测所有患者血清标本的HBV-DNA含量。

结果：所有乙肝病毒血清两对半检测组合（HBVm）模式中所占比例最高的是小三阳模式449例（44.9%）和大三阳模式358例（35.8%），两种检测组合模式中HBV-DNA 陽性检出率对比具有明显差异，其中大三阳模式的HBV-DNA阳性检出率（62.3%）明显高于小三阳模式（33.4%），差异对比具有统计学意义（P＜0.05），经乙肝患者的HBV-DNA含量检测结果分析，提示HBeAg阳性的病毒复制旺盛，具有较强的传染性。

结论：HBV-DNA的定量检测可直接反映乙肝病毒的复制及传染性，是诊断乙肝以及临床病情变化的重要指标。

标签：乙肝；HBV-DNA；PCR检测；检测结果；观察分析
乙型肝炎是我国较为流行的一种传染性疾病，分布范围较广，该病主要是由于乙型肝炎病毒（HBV）感染所致，经体液和血液均可传播，具有HBV乙肝病毒慢性携带状态[1]。

乙型肝炎是我国发病率和感染率最高的传染性疾病，据相关数据统计[2]，乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）含量可直接反映HBV的传染性以及复制程度，为进一步提高临床诊断水平，为临床治疗提供重要的科学依据，本文对我院1000例HBV-DNA慢性乙肝患者检测结果进行深入分析，具体报道如下。

1资料与方法
1.1 研究对象及方法
随机选取我院门诊及住院部在2012年2月-2013年4月收治的1000例慢性乙肝患者为研究对象，所有患者均符合全国第6次病毒性肝炎会议关于慢性乙型肝炎的诊断标准[3]。

1000例患者中男700例，女300例；病程均超过6个月；年龄7-65岁，平均（27.2±4.1）岁。

抽取所有患者清晨空腹静脉血5mL作为血清标本，放置30min待检。

1.2检测方法
1.2.1荧光定量PCR检测方法。

应用核酸扩增（PCR）荧光定量检测法检测HBV-DNA含量，仪器采用5700 自动荧光定量PCR仪（由中山大学达安基因股份有限公司生产，型号：ABI5700PCR），相配套的试剂盒也由中山大学达安基因股份有限公司生产，所有的操作步骤严格按照试剂说明书操作。

1.2.2 HBVm检测法。

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测HBV血清标志物，检测仪器采用KHB-ST-360酶标仪（又上海科华公司生产），试剂由乙厦
门新创公司生产，主要检测项目包括：乙肝 e 抗体（HBeAb）、乙肝 e 抗原（HBeAg）、乙肝核心抗体（HBcAb）、乙型肝炎表面抗体（HBsAb）以及乙型肝炎表面抗体原（HBsAb）等。

1.3统计学处理
选用软件SPSS16.0对数据进行统计学处理，所有计量数据均用（X±s）表示，使用t对两组间的差异对比进行检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2结果
3讨论
传统PCR检测可直接判断病毒的复制程度，但其操作较复杂，无法对基因进行准确定量，加上极易受到扩增产物污染，导致假阳性较高，也使其应用受到一定限制。

近年来随着聚合酶链式反应（PCR）技术以及分子生物学技术的不断创新与发展，荧光定量-核酸扩增（PCR）检测法被广泛应用于HBV-DNA定量检测中，该种先进的荧光定量PCR检测法可有效避免污染，具有较高的特异性和灵敏性，可准确反映HBV的复制活动以及传染性程度，可作为判断疾病治疗情况的重要指标[3]。

本组的HBV-DNA定量测定结果表明，大三阳中（HBeAg阳性）的HBV-DNA 阳性检出率（62.2%）明显高于小三阳（HBeAb阴性）的阳性检出率（33.4%），且在HBeAb阴性HBVm模式下，检出HBV-DNA的阳性率均较低，证明HBeAg 阳性说明HBV病毒复制水平较高，且传染性较强，与国内外大多数文献报道相符。

因此HBV-DNA以及HBeAg指标都可以代表HBV的存在形态及其复制水平，但在大三阳中仍然存在HBV-DNA检测阴性，在小三阳组以及其他模式中也可检出HBV-DNA阳性，这种情况也说明，若HBeAg 阳性患者的肝细胞内，HBV 病毒复制水平较低也会检出HBV-DNA阴性，若患者HBeAg消失也不能代表HBV病毒复制活动停止。

值得一提的是，若患者在HBV病毒感染前，可能已经存在HBVC区突变，在变异后并不会检测到HBeAg。

综上所述，HBV-DNA是反映HBV病毒复制及传染性程度最直接，也是最可信的指标，若检测出HBV-DNA阳性也说明是乙肝患者或者是HBV感染乙肝携带者，定量检测HBV-DNA含量水平可通过乙肝的感染量来判断病情的稳定性及严重程度，因此也是判断临床治疗效果的重要指标。

参考文献
[1]朱美玲，陈灿锋.e抗原阴性乙型肝炎患者病毒前C区l896点突变的检测[J].中华医学检验杂志，2011，21（6）：382.
[2]张悦，王惠萱，朱玉琨，等.HBV—DNA—Pre—C区（nt1 896）变异的临床调查与分析[J].现代检验医学杂志，2011，19（2）：45～46.
[3]张玲，朱江华，马韵，等.乙肝病毒定量检测与临床的关系[J].中华肝病杂志，2011，10：4951.。