实验名称实验一 油脂酸败的测定 ——过氧化值的测定方法

2020/4பைடு நூலகம்9
江南大学《食品化学》课程小组
三、原理
酪蛋白 蛋白酶
(水解肽键)
氨基酸（AA)
肽 蛋白质
三氯乙酸
沉淀 溶液(小肽和AA)
2020/4/9
正比于酶的量和反应时间 评价酶活
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四、实验步骤
5％的TCA溶液、1％酪蛋白→37℃水浴保温 取4支15ml具塞试管，编号A0、A1、B0、B1
实验3 蛋白酶活力的测定
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一、目的
了解碱性蛋白酶活力测定的原理 掌握碱性蛋白酶活力测定的方法
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二、仪器及材料
1. 微生物蛋白酶萃取液（0.01 g/mL） 2. 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.5） 3. 1%酪蛋白溶液 4. 5%三氯醋酸（TCA）溶液
201452江南大学食品化学课程小组江南大学食品化学课程小组201452江南大学食品化学课程小组了解碱性蛋白酶活力测定的原理掌握碱性蛋白酶活力测定的方法201452江南大学食品化学课程小组微生物蛋白酶萃取液001gml02moll磷酸盐缓冲液ph755三氯醋酸tca溶液201452江南大学食品化学课程小组蛋白酶水解肽键氨基酸aa蛋白质三氯乙酸沉淀溶液小肽和aa正比于酶的量和反应时间评价酶活酪蛋白201452江南大学食品化学课程小组5的tca溶液1酪蛋白37水浴保温取4支15ml具塞试管编号a0a1b0b1试管振荡后37水浴保温5min分别加入200ml酪蛋白37保温10min准确计时分别在a1与b1试管中加入600ml5tca室温下静置40min过滤滤液280nm波od值0b0为空白号数a0a1b0b1酶液ml020020040040磷酸盐缓冲液ml1801801601605tcaml600201452江南大学食品化学课程小组
号数
A0
A1
B0
B1
酶液（ml）
0.20
0.20
0.40
0.40
磷酸盐缓冲液（ml）
1.80
1.80
1.60
1.60
5％TCA（ml）
6.00
-
6.00
-
试管振荡后37 ℃水浴保温5min→分别加入2.00ml酪蛋白→ 37 ℃保温10min （准确计时） →分别在A1与B1试管中加入6.00ml 5%TCA →室温下静置 40min →过滤→滤液→280nm波OD值（0、B0为空白）
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五、思考题
1. 蛋白酶有哪几类？ 2. 影响酶活力的因素有哪些？ 3. 使用紫外分光光度计时应注意哪些问题？
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