Galectin-3和Glypican-3在良、恶性甲状腺滤泡型肿瘤的表达及其鉴别诊断意义

Galectin-3和Glypican-3在良、恶性甲状腺滤泡型肿瘤的
表达及其鉴别诊断意义
李瑞平;曾铮;李岭;施中元;沈旭东;赵敏
【摘要】Objective To investigate the expression and differential significance of galectin-3 and glypican-3 protein in benign and malignant follicular thyroid tumors.Methods The expression of galectin-3 and glyp-ican-3 protein in 11 cases FTC,18 cases PV-PTC and 20 cases FTA were detected by EnVision immuno-histochemical method.Results Galectin-3 expression in FTC,FV-PTC and FTA were:64% (7/11), 100% (18/18),30%
(6/20)respectively;Glypican 3 expression in FTC,FV-PTC and FTA
were:64%(7/11),89% (16/18),25% (5/20)respectively.Both were statistically significant in FV-C and FTA.Ga-lectin-3 is more sensitive than glypican-3 in differentiating diagnose between thyroid carcinoma and adeno-
ma,however glypican-3 was more specific than galectin-3.Conclusion Combined measurement of galectin-3 and glypican-3 can improve the diagnosis of follicular thyroid cancer.%目的：探讨 Galectin-3和 Glypican-3
对良、恶性甲状腺滤泡型肿瘤鉴别诊断的意义。

方法选取2010年1月－2015年12月在江苏省中西医结合医院病理科确诊的甲状腺癌患者的病理切片49例，其
中滤泡性癌11例，滤泡型乳头状癌18例，滤泡性腺瘤20例，采用免疫组化方
法检测 Galectin-3和 Glypican-3在甲状腺滤泡型肿瘤中的表达。

结果 Galectin-3在滤泡癌、滤泡型乳头状癌和滤泡性腺瘤中的表达分别为64％（7／11）、100％（18／18）、30％（6／20）；Glypican-3在滤泡癌、滤泡型乳头状癌和滤泡性腺瘤中的表达分别为64％（7／11）、89％（16／18）、25％（5／20）。

Galectin-3和 Glypican-3在滤泡结构的癌和腺瘤中的表达差异均有统计学意义（P ＜0．05）。

在甲状腺滤泡型肿瘤的鉴别诊断中，Galectin-3的敏感性高，而Glypican-3的特异性高。

结论联合应用 Galectin-3和 Glypican-3并结合组织学特点可提高甲状腺滤泡癌的诊断率。

【期刊名称】《新疆医科大学学报》
【年(卷),期】2017(040)001
【总页数】4页(P55-58)
【关键词】甲状腺滤泡癌;甲状腺滤泡性腺瘤;免疫组织化学;Galectin-3;Glypican-3
【作者】李瑞平;曾铮;李岭;施中元;沈旭东;赵敏
【作者单位】江苏省中西医结合医院病理科; 江苏省中医药研究院，南京 210028;江苏省中西医结合医院病理科; 江苏省中医药研究院，南京 210028;东南大学附属中大医院超声诊断科，南京 210009;江苏省中西医结合医院病理科; 江苏省中医药研究院，南京 210028;江苏省中西医结合医院病理科; 江苏省中医药研究院，南京210028;江苏省中西医结合医院病理科; 江苏省中医药研究院，南京 210028
【正文语种】中文
【中图分类】R736.1
甲状腺癌是常见的内分泌系统恶性肿瘤，其中95%以上是甲状腺滤泡上皮起源的癌[1]。

目前B超引导下甲状腺细针穿刺细胞学涂片检查是评估甲状腺肿瘤良、恶性的常用诊断方法，但是对于甲状腺滤泡型肿瘤的鉴别诊断，细胞学检查尚无明确的方法。

组织学上滤泡型肿瘤的良、恶性判断，主要依靠是否有肿瘤的包膜或血管
侵犯以及远处器官转移，但病理切片中对包膜或血管侵犯的判断一直是临床病理医生的诊断难点[2,3]。

因此，寻找辅助性的检测方法以提高甲状腺滤泡癌的诊断率
成为当前学者关注的焦点。

目前常用的检测方法仍然是采用免疫组化染色技术来寻求有效的特异分子标记物[4],但很少有关于Glypican-3在甲状腺滤泡型肿瘤中表
达的研究。

本研究通过检测Galectin-3和Glypican-3抗体在甲状腺滤泡型肿瘤
中的表达情况，以期筛选出比较特异的分子标记物，有助于良、恶性滤泡型肿瘤的鉴别诊断，现报道如下。

1.1 一般材料选取2010年1月-2015年12月在江苏省中西医结合医院病理科确诊的甲状腺癌患者病理切片49例，其中11例为甲状腺滤泡癌，18例为滤泡型甲状腺乳头状癌，20例为甲状腺滤泡性腺瘤，所有患者均为首次确诊并且首次做切
除手术，无其他恶性肿瘤病史，术前均未行内分泌治疗及放、化疗。

1.2 试剂 Galectin-3即用型(迈新公司，批号：140512572A)，Glypican-3即用
型(西雅金桥，批号：1327402B)，EnVision二步法试剂盒(丹麦 Dako公司，批号：20035615)。

1.3 免疫组化方法所选组织经4%中性福尔马林固定、石蜡包埋。

免疫组织化学染色采用EnVision二步法，具体操作步骤如下：(1)石蜡切片3 μm，常规脱蜡至水洗；(2)pH=6.0的柠檬酸盐高压修复，冷却后，PBS冲洗；(3)加一抗，4℃过夜，PBS冲洗；(4)加EnVision二抗，37℃ 30 mi n，PBS冲洗；(5)DAB显色，水洗；
(6)苏木素对比染色，脱水，透明，中性树胶封片。

用PBS代替一抗作阴性对照。

1.4 评价方法根据半定量评分方法[5]，按照阳性细胞所占的百分比和着色强度分级：(1)染色强度计分：0分为(-)；1分为弱阳性(1+)；2分为中等强度的阳性(2+)；3分为强阳性(3+)。

(2)阳性细胞计分：<10%为0分；10%～25%为1分；26%～50%为2分；51%～75%为3分，>75%为4分。

(1)×(2)0～3分为(-)，4～12分为(+)。

1.5 统计学处理采用SPSS16.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，鉴于实际结果存在小于1的数值，故使用Fisher精确概率法计算χ2值，检验水
准α=0.05。

2.1 镜检结果 11例滤泡癌患者组织切片镜下观察发现，分化好的肿瘤由结构较完
整的滤泡构成，肿瘤细胞无明显异型性，与滤泡性腺瘤不易区分，仔细寻找可见包膜和/或血管侵犯。

18例滤泡型乳头状癌患者组织切片镜下观察发现，均为具有滤泡结构，细胞核具有乳头状癌的特点。

20例滤泡性腺瘤患者组织切片镜下观察发现，均包膜完整并且滤泡结构完整，肿瘤细胞相对一致，无明显异型性，是甲状腺腺瘤的常见亚型，见图1。

2.2 免疫组化结果选择49例标本中有代表性的蜡块行免疫组化染色，Galcetin-3的阳性部位是细胞浆，部分细胞核也有阳性，在甲状腺滤泡癌和滤泡型乳头状癌中的表达大多是中等阳性强度，在甲状腺滤泡性腺瘤中大部分为阴性表达，见图2。

Glypican-3的阳性部位是细胞浆，在甲状腺滤泡癌和滤泡型乳头状癌中的表达大
多是中等或较强阳性强度，在甲状腺滤泡性腺瘤中大部分为阴性表达，见图3。

2.3 Galectin-3和Glypican-3在甲状腺滤泡型肿瘤中的表达 Galectin-3在滤泡癌(FTC)、滤泡型乳头状癌(FV-PTC)和滤泡性腺瘤(FA)中的表达分别为：64%(7/11)、100%(18/18)、30%(6/20)，三者中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。

Galectin-3在滤泡癌和滤泡型乳头状癌中的表达差异有统计学意义(P<0.05)，滤
泡型乳头状癌中乳头状癌的核的特征不是很明显，通过标记Galectin-3可以鉴别
诊断滤泡性乳头状癌。

Glypican-3在滤泡癌、滤泡型乳头状癌和滤泡性腺瘤中的
表达分别为64%(7/11)、89%(16/18)、25%(5/20)，三者中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。

Glypican-3在滤泡癌和滤泡型乳头状癌中的表达差异无统计学意
义(P=0.103)，见表1。

2.4 Galectin-3和Glypican-3在滤泡结构的癌(FV-C)和滤泡性腺瘤中的表达差异
Galectin-3在滤泡结构的癌(滤泡癌和滤泡型乳头状癌)与滤泡性腺瘤中的表达分别为86%(25/29)、30%(6/20)，表达差异有统计学意义(P<0.05)。

Glypican-3在
滤泡结构的癌与滤泡性腺瘤中的表达分别为79%(23/29)、25%(5/25)，表达差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

2.5 Galectin-3和Glypican-3在滤泡结构的癌和滤泡性腺瘤诊断中的敏感性和特
异性 Galectin-3和Glypican-3在鉴别滤泡结构的癌和甲状腺滤泡性腺瘤时，敏
感性分别为86%和79%；特异性分别为70%和75%。

在鉴别滤泡结构的癌和甲
状腺滤泡性腺瘤时，Galectin-3的敏感性高，而Glypican-3的特异性高，见表3。

甲状腺滤泡癌是较常见的甲状腺恶性肿瘤，其主要通过血道转移，恶性程度较甲状腺乳头状癌高。

但是，诊断甲状腺滤泡癌的诊断不能通过组织结构及细胞形态来判断，主要是看有无包膜或血管侵犯，细针穿刺细胞学检查及冰冻切片中无法明确诊断，经常诊断为“甲状腺滤泡性肿物”，而滤泡癌微小浸润型和滤泡性腺瘤的鉴别更难[2]。

微小浸润型癌的诊断需要完全依靠确切的包膜或血管侵犯，因此要求肿
瘤包膜要全部取材，以防漏诊。

但即使全部取材，并不能代表能看到标本的全部切面，因此误诊或漏诊仍然是存在的。

随着免疫组织化学染色技术的应用和发展，确定能鉴别甲状腺滤泡癌和腺瘤，建立可靠、可行的检测手段，对甲状腺滤泡型肿瘤患者的诊断具有重要临床意义。

本研究对Galectin-3和Glypican-3蛋白进行了
研究。

Galectin-3是一种β-半乳糖苷结合蛋白，也是半乳糖凝集素(Galectins)家
族的一员，在细胞与细胞、细胞与间质之间起特异性黏附分子作用。

在甲状腺，几乎都表达于甲状腺恶性肿瘤，Galectin-3检测通过免疫组化已被用于改善在术前
诊断的准确性甲状腺结节的评价[6-7]。

现已公认Galectin-3可以作为诊断甲状腺乳头状癌的一个特异的分子标记物[8]，因此Galectin-3在甲状腺滤泡型肿瘤中的表达及其意义就显得更为可能[9]。

有研究表明，Galectin-3可以作为诊断微小浸
润性滤泡癌可靠的分子标记物[10]。

本研究结果表明，Galectin-3在甲状腺正常滤
泡结构无表达，在甲状腺滤泡癌中的阳性表达率明显高于腺瘤(P<0.05)，因而Galectin-3可作为鉴别良、恶性甲状腺滤泡型肿瘤的标志。

同时，Galectin-3在滤泡癌和滤泡型乳头状癌中的表达差异也具有统计学意义(P<0.05)，这种差异可能是由于系列滤泡状癌的样本量小。

Glypican-3，乙酰肝素硫酸蛋白聚糖的酰肌醇蛋白聚糖家族(聚糖)的成员，在胎盘和胚胎肝、肺和肾中都有表达，在成人正常的脑、肝、脾、胃、肠等组织中均不表达[11-12]，Glypican-3蛋白表达可有效提高原发性肝癌诊断的特异性和敏感性，是肝细胞肝癌的一个重要且有效的肿瘤标记物[13-15]。

Glypican-3在甲状腺中表达的研究报道很少，有研究报道在正常的甲状腺中很少表达，但它是在某些类型的甲状腺癌的高表达，比如滤泡癌和乳头状癌[16-17]。

本研究中，Glypican-3在滤泡结构的癌和滤泡性腺瘤中的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。

Galectin-3和Glypican-3在甲状腺滤泡性腺瘤和滤泡结构的癌中，Galectin-3的敏感性高，而Glypican-3的特异性高。

联合应用Galectin-3和Glypican-3并结合组织学特点可提高甲状腺滤泡癌的诊断率。

由于本研究中的样本量较小，以后可以加大样本，研究甲状腺滤泡型恶性肿瘤的生物学和分子机制。

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