双孢蘑菇栽培不同生育期土壤与培养基质酶活性研究
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2 结果与分析
2.1 不同生育期双孢蘑菇基质和土壤过氧化氢酶活性变 化 双孢蘑菇覆土后3个不同时期栽培料基质和土壤过氧 化氢酶活性的变化情况如图2所示。由图2可知，基质内过 氧化氢酶活性均小于土壤过氧化氢酶活性。在基质内过氧 化氢酶活性随着栽培时间的延长，过氧化氢酶活性呈现“降 低-回升”的趋势，与发菌期相比，出菇初期基质过氧化氢酶 活性降低51.1%；采收期基质过氧化氢酶活性增加58.0%，各 处理间差异均达到显著水平；覆土的土壤过氧化氢酶活性 随着发菌期、出菇初期及采收期呈现递增的趋势。与发菌期 相比，出菇期和采收期土壤的过氧化氢酶的活性分别增加 25.3%、73.9%。
图 1 双孢蘑菇不同生育期采集样品照片 注：图中 I、II、III 分别代表采收期，出菇初期和发菌期，J 代表基质，T 代表土壤，下同。 基金项目：内蒙古自治区科技创新引导项目（20200821）；黑龙江省大学生创新创业项目（201610223049）。 作者简介：陈潇潇（1998—），女，在读硕士，从事微生物生物技术研究工作。 *通讯作者 收稿日期：2021-04-06
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1.3 酶活性的测定 土壤酶活性采用关松荫［15］方法，过 氧化氢酶采用KMnO4滴定法，转化酶、脲酶和磷酸酶采用 3，5-二硝基水杨酸、靛酚蓝比色法和磷酸苯二钠比色法。 双孢蘑菇基质的酶活性测定按土壤酶方法进行，同时设 有对照组，基质代替土壤进行测定相应原基质酶活性。 1.4 数据分析 数据分析采用Excel软件和SPSS20.0软 件处理。
E" "G# (0.1N KMnO4 mL g-1)
3.00
2.50
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1.00 a
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c
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)
图 2 不同生育期双孢蘑菇的基质料和土壤中过氧化氢酶活性
2.2 不同生育期双孢蘑菇的基质和土壤脲酶活性变化
双孢蘑菇覆土后3个不同时期栽培基质和土壤脲酶活性
1 材料与方法
1.1 供试材料 双孢蘑菇配方：粉碎玉米秸秆2t、干牛粪 1.5t、石膏2%、石灰2%、过磷酸钙复合肥1.5%、双孢蘑菇 品 种 为 AS2796，播 种 时 采 用 麦 粒 菌 ，覆 土 材 料 选 择 草 碳土。 1.2 试验设计 堆制原料，经连续发酵35d时堆肥腐熟， 腐熟料上菇床进行二次发酵，5d后进行播种。设不同时 间覆土，连续3次覆土，分别相差4d，层播双孢蘑菇麦粒种 播种量为7%，取样时3个处理分别处于采收期、出菇初期 和发菌期。取样时分别测定土壤和基质样品（见图1），取 样的处理3次重复，分别测定基质和土壤中参与物质代谢 的相关酶活性。
物质代谢过程中酶的活性是研究营养输送途径的重 要指示指标。王义祥等［14］研究发现，双孢蘑菇栽培时铺 料厚度对双孢蘑菇羧甲基纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶 活性存在着显著差异，表明铺料厚度将影响双孢蘑菇的
碳物质的转化。据文献查阅，关于双孢蘑菇在不同生育 阶段针对碳、氮和磷代谢酶活性变化的研究还鲜有报道。 为此，本研究采用不同覆土时间，采集覆土后双孢蘑菇发 菌期、出菇初期、采收期的基质和土壤样品，测定其过氧 化氢酶、转化酶、脲酶及磷酸酶活性，初步了解双孢蘑菇 在不同时期基质和土壤中对不同物质的需求，为深入研 究高产优质生产双孢蘑菇提供科学依据。
摘 要：双孢蘑菇是一类草腐类食用菌，种植面积较为广泛。覆土对生产双孢蘑菇至关重要，但关于双孢蘑
菇覆土后土壤酶活性和基质酶活性的研究仍相对较少。该研究采集覆土后发菌期、出菇初期、采收期 3 个时
期的双孢蘑菇的基质和土样，检测土壤和基质的过氧化氢酶、转化酶、脲酶和磷酸酶活性。结果表明，双孢蘑
菇覆土后发菌期，土壤和基质的转化酶活性最高，磷酸酶活性最低，脲酶活性适中，土壤过氧化氢酶活性最
双孢蘑菇是一种粪草腐生性食用菌，其子实体具有 较高的营养价值，具有很多活性成分，如多糖、麦角甾醇、 亚油酸、亚麻酸、酚类化合物芸香苷、没食子酸、咖啡酸 等［1］，具有降血压、降低胆固醇、改善心脑血管与肾功能 以及增强免疫力的作用［2-5］，是欧美地区主要种植的食用 菌种类［6］。在接种双孢蘑菇菌种，菌丝长满培养料后须 覆土才能形成子实体原基。因此，覆土对于双孢蘑菇栽 培具有至关重要的作用。覆土材料［7］、覆土含水量［8］、覆 土搅拌时间［9］、覆土材料中细菌数量［7］、真菌多样性［10］、 覆土中菌丝量［11］及有益微生物数量［12］均与双孢蘑菇的 产量和品质相关。不同栽培料也影响着双孢蘑菇子实 体的营养成分［13］，这些营养成分都与培养基质和覆土中 的营养有关。明确双孢蘑菇在不同生育期与物质相关 酶活性的大小规律，可以为指导双孢蘑菇高产优质生产 提供理论支持。
低，基质中过氧化氢酶活性适中；出菇初期，土壤和基质的转化酶活性最低，磷酸酶活性适中，土壤中脲酶活
性最高，过氧化氢酶适中，基质中脲酶和过氧化氢酶活性最低；采收期，土壤和基质中磷酸酶、脲酶和过氧化
氢酶的活性最高，转化酶活性适中。Leabharlann 关键词：双孢蘑菇；酶活性；覆土
中图分类号 S646.1+1；S158.4
文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）13-0047-03
安徽农学通报，Anhui Agri，Sci，Bull，2021，27（13）
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双孢蘑菇栽培不同生育期土壤与培养基质酶活性研究
陈潇潇 1 梁兆超 1 王丽艳 1 王洪波 2 荆瑞勇 1*
（1 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，黑龙江大庆 163319；2 呼伦贝尔盛坤泰食用菌种植专业合作社，内蒙古阿荣旗 162750）
的变化如图3所示。由图3可知，基质脲酶的活性在发菌
期和出菇初期无明显变化，而到采收期脲酶的活性显著
变大，与初期相比，脲酶活性增加46.6%；而覆土中脲酶活
性与基质中脲酶活性正好相反，发菌期和出菇初期土壤
脲酶活性增大，而采收期土壤脲酶活性显著降低，与发菌
期相比，土壤脲酶活性降低76.9%。
7G# (μg NH3 -N gh-1)
2.1 不同生育期双孢蘑菇基质和土壤过氧化氢酶活性变 化 双孢蘑菇覆土后3个不同时期栽培料基质和土壤过氧 化氢酶活性的变化情况如图2所示。由图2可知，基质内过 氧化氢酶活性均小于土壤过氧化氢酶活性。在基质内过氧 化氢酶活性随着栽培时间的延长，过氧化氢酶活性呈现“降 低-回升”的趋势，与发菌期相比，出菇初期基质过氧化氢酶 活性降低51.1%；采收期基质过氧化氢酶活性增加58.0%，各 处理间差异均达到显著水平；覆土的土壤过氧化氢酶活性 随着发菌期、出菇初期及采收期呈现递增的趋势。与发菌期 相比，出菇期和采收期土壤的过氧化氢酶的活性分别增加 25.3%、73.9%。
图 1 双孢蘑菇不同生育期采集样品照片 注：图中 I、II、III 分别代表采收期，出菇初期和发菌期，J 代表基质，T 代表土壤，下同。 基金项目：内蒙古自治区科技创新引导项目（20200821）；黑龙江省大学生创新创业项目（201610223049）。 作者简介：陈潇潇（1998—），女，在读硕士，从事微生物生物技术研究工作。 *通讯作者 收稿日期：2021-04-06
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1.3 酶活性的测定 土壤酶活性采用关松荫［15］方法，过 氧化氢酶采用KMnO4滴定法，转化酶、脲酶和磷酸酶采用 3，5-二硝基水杨酸、靛酚蓝比色法和磷酸苯二钠比色法。 双孢蘑菇基质的酶活性测定按土壤酶方法进行，同时设 有对照组，基质代替土壤进行测定相应原基质酶活性。 1.4 数据分析 数据分析采用Excel软件和SPSS20.0软 件处理。
E" "G# (0.1N KMnO4 mL g-1)
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1.00 a
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图 2 不同生育期双孢蘑菇的基质料和土壤中过氧化氢酶活性
2.2 不同生育期双孢蘑菇的基质和土壤脲酶活性变化
双孢蘑菇覆土后3个不同时期栽培基质和土壤脲酶活性
1 材料与方法
1.1 供试材料 双孢蘑菇配方：粉碎玉米秸秆2t、干牛粪 1.5t、石膏2%、石灰2%、过磷酸钙复合肥1.5%、双孢蘑菇 品 种 为 AS2796，播 种 时 采 用 麦 粒 菌 ，覆 土 材 料 选 择 草 碳土。 1.2 试验设计 堆制原料，经连续发酵35d时堆肥腐熟， 腐熟料上菇床进行二次发酵，5d后进行播种。设不同时 间覆土，连续3次覆土，分别相差4d，层播双孢蘑菇麦粒种 播种量为7%，取样时3个处理分别处于采收期、出菇初期 和发菌期。取样时分别测定土壤和基质样品（见图1），取 样的处理3次重复，分别测定基质和土壤中参与物质代谢 的相关酶活性。
物质代谢过程中酶的活性是研究营养输送途径的重 要指示指标。王义祥等［14］研究发现，双孢蘑菇栽培时铺 料厚度对双孢蘑菇羧甲基纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶 活性存在着显著差异，表明铺料厚度将影响双孢蘑菇的
碳物质的转化。据文献查阅，关于双孢蘑菇在不同生育 阶段针对碳、氮和磷代谢酶活性变化的研究还鲜有报道。 为此，本研究采用不同覆土时间，采集覆土后双孢蘑菇发 菌期、出菇初期、采收期的基质和土壤样品，测定其过氧 化氢酶、转化酶、脲酶及磷酸酶活性，初步了解双孢蘑菇 在不同时期基质和土壤中对不同物质的需求，为深入研 究高产优质生产双孢蘑菇提供科学依据。
摘 要：双孢蘑菇是一类草腐类食用菌，种植面积较为广泛。覆土对生产双孢蘑菇至关重要，但关于双孢蘑
菇覆土后土壤酶活性和基质酶活性的研究仍相对较少。该研究采集覆土后发菌期、出菇初期、采收期 3 个时
期的双孢蘑菇的基质和土样，检测土壤和基质的过氧化氢酶、转化酶、脲酶和磷酸酶活性。结果表明，双孢蘑
菇覆土后发菌期，土壤和基质的转化酶活性最高，磷酸酶活性最低，脲酶活性适中，土壤过氧化氢酶活性最
双孢蘑菇是一种粪草腐生性食用菌，其子实体具有 较高的营养价值，具有很多活性成分，如多糖、麦角甾醇、 亚油酸、亚麻酸、酚类化合物芸香苷、没食子酸、咖啡酸 等［1］，具有降血压、降低胆固醇、改善心脑血管与肾功能 以及增强免疫力的作用［2-5］，是欧美地区主要种植的食用 菌种类［6］。在接种双孢蘑菇菌种，菌丝长满培养料后须 覆土才能形成子实体原基。因此，覆土对于双孢蘑菇栽 培具有至关重要的作用。覆土材料［7］、覆土含水量［8］、覆 土搅拌时间［9］、覆土材料中细菌数量［7］、真菌多样性［10］、 覆土中菌丝量［11］及有益微生物数量［12］均与双孢蘑菇的 产量和品质相关。不同栽培料也影响着双孢蘑菇子实 体的营养成分［13］，这些营养成分都与培养基质和覆土中 的营养有关。明确双孢蘑菇在不同生育期与物质相关 酶活性的大小规律，可以为指导双孢蘑菇高产优质生产 提供理论支持。
低，基质中过氧化氢酶活性适中；出菇初期，土壤和基质的转化酶活性最低，磷酸酶活性适中，土壤中脲酶活
性最高，过氧化氢酶适中，基质中脲酶和过氧化氢酶活性最低；采收期，土壤和基质中磷酸酶、脲酶和过氧化
氢酶的活性最高，转化酶活性适中。Leabharlann 关键词：双孢蘑菇；酶活性；覆土
中图分类号 S646.1+1；S158.4
文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）13-0047-03
安徽农学通报，Anhui Agri，Sci，Bull，2021，27（13）
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双孢蘑菇栽培不同生育期土壤与培养基质酶活性研究
陈潇潇 1 梁兆超 1 王丽艳 1 王洪波 2 荆瑞勇 1*
（1 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，黑龙江大庆 163319；2 呼伦贝尔盛坤泰食用菌种植专业合作社，内蒙古阿荣旗 162750）
的变化如图3所示。由图3可知，基质脲酶的活性在发菌
期和出菇初期无明显变化，而到采收期脲酶的活性显著
变大，与初期相比，脲酶活性增加46.6%；而覆土中脲酶活
性与基质中脲酶活性正好相反，发菌期和出菇初期土壤
脲酶活性增大，而采收期土壤脲酶活性显著降低，与发菌
期相比，土壤脲酶活性降低76.9%。
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