噻唑膦对南方根结线虫的作用方式_邹雅新

河北农业大学学报
J OU RN A L O F A G RICU LTU RA L U N IV ER SITY O F H EBEI
Vol. 34 No. 5 Sep . 2 0 1 1
文章编号 : 1000 - 1573( 2011) 05 -0078 - 05
噻唑膦对南方根结线虫的作用方式
邹雅新1, 2 ,
① 收稿日期 :
2011 - 05 - 20
基金项目 : 行业科研专项资助 ( 201103018) . 作者简介 : 邹雅新 ( 1983 -) , 男 , 河北省雄县人 , 硕士生 , 主要从事线虫研究工作 . 通讯作者 : 陈书龙 ( 1963 -) , 男 , 河北省阜城县人 , 博士 , 研究员 , 主要从事线虫学研究工作 . E - mail: chen- shulong @ tom. co m.
第5期
邹雅新等: 噻唑膦对南方根结线虫的作用方式
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Key words: M el oi dogy ne i ncongnit a ; fo st hiazat e; hat ch; infectivit y; mo tilit y 根结线虫病 ( M el oidogy ne i ncongnit a ) 是蔬菜 生产上的重要病害, 它不仅影响根的正常功能直接危 害植物, 同时还可加剧其它病害的发生 。尽管人们 对根结线虫的生物学以及防治技术进行了大量的研 究, 但线虫的有效防治仍是人们面对的一个难题。 根结线虫以 2 龄幼虫或卵在土壤中度过不利的 环境 , 一旦食物和环境条件适宜, 线虫能够侵入寄主 并建立寄生关系 [ 2] 。整个过程包括: 卵孵化、 线虫搜 寻寄主、 线虫侵入并建立有效的寄生关系。利用化 学药剂破坏线虫与植物建立寄生关系中的任何一环 节均可有效地控制根结线虫的危害。研究药剂在不 同阶段对线虫的影响, 对于确定药剂适宜的施用技 术, 提高其防效具有重要的意义。目前我国登记用 于蔬菜根结线虫防治的非熏蒸 性药剂仅有阿 维菌 素、 克 线 丹、 噻 唑膦 等 数 种 药 剂。其 中 噻 唑 膦 是 2005 年在我国注册登记用于防治黄瓜与番 茄上根 结线虫的新药剂。对噻唑膦的研究多集中于田间防 治试验[ 3- 7] , 尚无噻唑膦对根结线虫作用方式的系统 研究。本研究通过室内测定噻唑膦对南方根结线虫 卵孵化的抑制作用、 对 2 龄幼虫的致死作用及其对 线虫活动能力和侵入能力的影响 , 旨在为探索高效 的根结线虫病防治技术提供理论基础。
Abstract: Nemat icidal eff ect of f ost hiazat e on eggs and second st age juv eniles ( J2) of Meloi do gy ne i ncognit a w ere t est ed i n vi tr o . It s ef f ect s o n J2 mo tilit y and infect ivit y were evaluated w ith a sand co lumn and t he st aining m et hod respectively. T he result s show ed t hat J2 m ort alit y w as significant ly incr eased while t he egg hat ching, J2 m ot ilit y and infectivit y w ere sig nif icant ly reduced w it h the increasing co ncent ration and t ime aft er t reat m ent of fo st hiazat e. T he egg hat ching in individual and in egg masses w ere reduced by 72 51% and 77 75% , r espect ively af ter t reat ment w ith 200 g/ m L f ost hiazat e f or 24 h. T he J2 mo rt alit y w as 80 13% af t er t reat ment w it h 200 g/ mL f osthiazat e fo r 24 h. T he J2 mig rated 0 1 cm in 7 d in sand column mix ed w it h 25 g/ mL fost hiazat e w hile it did 1 04 cm in t he contr ol. T he infect ivit y of J2 af t er t reat ment w it h 100 g/ mL fo st hiazat e fo r 48 h w as 0 51% w hile it w as 21 85% in the cont rol. It pr oved t hat f ost hiazat e have gr eat po tential on t he inhibit io n o f egg hatching, J2 m ot ility and inf ect ivity o f Mel oidogy ne incogni t a.
每一药剂浓度重复5培养箱中48后离心3000min冲洗3次去除线虫体表药液的番茄幼苗上每株接种约1500头线虫12数据的统计与分析试验结果采用dps统计软件进行方差分析可以看出噻唑膦各个处理浓度均可有效地抑制南方根结线虫分散卵的孵化并且对卵孵化的抑制作用随着处理剂量与时间的增加而增强
第 34 卷第 5 期 20 1 1 年 9 月
校正死亡率 ( % ) = 处理死亡率 - 对照死亡率 1- 对照死亡率 100%
1
1. 1
材料与方法
南方根结线虫 采自保定市郊重病田 , 用感病寄主番茄 佳源大
1. 5 噻唑膦对 2 龄幼虫活动能力的影响 参照 Daw esv 等使用的沙柱法[ 10] , 将药剂按一 定剂量与细沙 ( 250~ 425 m) 混匀 , 沙柱中噻唑膦 有效成 分分别为 1 562 5、 3 125、 6 25、 12 5、 25 0 g/ mL , 以浓度为 2 5% 丙酮的沙柱作对 照。将药 沙填充于有机玻璃管中 ( 用透明胶带将 7 个直径 20 m m 长 10 mm 的小管组合成 70 m m 长的沙柱) 。沙 柱的最终含水量为 20% , 在沙柱的一端接 2 000 头 2 龄幼虫, 并用 P ar af ilm 将口封好 , 另一端定植 1 棵 20 d 苗龄的番茄幼苗。每处理重复 3 次 , 将沙柱水 平放置于 25 人工气候箱 ( 湿度 > 90% ) , 7 d 后采 用洗涤法, 将每段小管中的线虫洗出 , 计算线虫的平 均移动距离。 平均移动距离 = R 1 0+ R 2 1+ R 3 2+ R 4 3+ R 5 4+ R 6 R 1+ R 2+ R 3+ R 4+ R 5+ R 6 中的线虫数量。 1. 6 噻唑膦对 2 龄幼虫侵入能力的影响 将噻唑 膦 分 别 稀 释 成 12 5、 25、 50、 1张小风1 ,
张金林2 ,
陈书龙1
( 1. 河北省农林科学院植 物保护研究所 / 河北省农业有害生物综合防治工程技 术研究中心 , 河北 保定 071000; 2. 河北农业大学 植物保护 学院 , 河北 保定 071000) 摘要 : 为探讨噻唑膦对南方根结线 虫的作用方式 , 在室内利用浸渍法测定了噻 唑膦对南方 根结线虫 卵孵化的抑 制作用以及对 2 龄幼虫的致死作用 ; 利用沙柱法测定了对 2 龄幼虫迁移能力的抑制作用 ; 利用染色法测定了对 2 龄幼虫侵入番茄能力的影响。结果表明 : 随着 噻唑膦处理浓度的增加与处理时间的延长 , 线虫 卵的孵化 抑制率、 2 龄 幼虫的死亡率显著提高 , 而 2 龄幼虫的迁移能 力和侵入能 力则显著降 低。 200 g / mL 噻唑膦 处理 24 h 后 , 对卵的孵化抑制率为 72 51% ; 200 g / mL 噻唑膦处理 48 h 后 , 2 龄幼虫的死亡率为 80 13% ; 在 25 g / mL 噻唑 膦沙柱中 , 7 d 后 2 龄幼虫的平均移动距离为 0 10 cm, 而对照处理线 虫的平均移 动距离为 1 04 cm; 100 g/ mL 噻唑膦处理 48 h 后 , 2 龄幼虫对番茄根部的侵入 率为 0 51% , 而空白对照处理线虫的侵入率达 21 85% 。 关 键 词 : 南方根结线 虫 ; 噻唑膦 ; 孵化 ; 迁移能力 ; 侵入 文献标志码 : A 中图分类号 : S482. 2+ 93
Action mode of fosthiazate on southern root knot nematode, Meloidogy ne incognita
ZOU Ya - xin , LI Xiu -hua , ZHANG Xiao -feng , ZHANG Jin -lin , CHEN Shu - long
1, 2 1 1 2 1
( 1. Institute of P lant Pr otectio n, Hebei A cademy of A g ricultura l and F orestr y Sciences/ IPM Center of H ebei Pr ov ince, Bao ding 071000, China; 2. Colleg e o f Plant Pro tection, Ag ricultur al U niv ersit y of H ebei, Baoding 071001, China)
粉 在温室内进行根结线虫的扩繁。 1. 1. 1 分散卵悬浮液制备 采集带有大量卵块的 番茄病株, 将病根剪成约 2 cm 小段, 在 1% 的次氯 酸钠溶液中漂洗约 4 min, 利用 200 目与 500 目线虫 筛冲洗并收集线虫卵, 用蒸馏水稀释成 200 个 / mL 卵悬浮液 , 直接用于生测 [ 8] 。 1. 1. 2 卵块的收集 1. 1. 3 将发病的番茄根冲洗干净, 在 将收集线虫卵悬浮 解剖镜下用镊子或拨针将卵块取下 , 收集备用。 2 龄幼虫悬浮液制备 液滴加到铺有 2 层面巾纸的浅盘上 , 室温条件下培 养, 每隔 24 h 收集 1 次 2 龄幼虫, 将收集的幼虫放 置于 4 , 并补充空气 , 将 7 d 之内收集的线虫浓缩 配置成 400 头/ mL 用于生测。 1. 2 供试药剂 噻唑膦 81 7% 原油( 寿光市申达化学工业有限 公司生产 ) , 试验药剂母液的配置方法: 用 90 份丙酮
[ 1]
溶解 2 份原药, 然后加 8 份吐温乳化。 1. 3 噻唑膦对卵孵化的影响 采用浸渍法测定对南方根结线虫孵化的抑制作 用[ 9] , 首先将噻唑膦母液稀释成有效成分浓度分别为 50、 100、 200、 400 g/ mL 的药液, 将 0 5 mL 不同浓度 药剂分别与等体积卵液在 1 mL 离心管内混匀。对照 加入 0 5 mL 2 5% 丙酮溶液, 同时设另一清水对照作 参照( 下同) 。将离心管放置 25 条件下 , 处理 2、 4、 8、 16、 24 h 后离心 ( 3 000 r/ min, 5 min) , 冲洗 3 次去除 卵表面药液 , 然后将卵液 ( 约 200 个/ mL ) 放置于 25 恒温培养箱中, 5 d 后在体式显微镜下, 检查线虫卵 的孵化情况, 计算孵化抑制率。 1. 4 噻唑膦对 2 龄幼虫的致死作用 将噻唑膦分别稀释成 25、 50、 100、 200、 400 g/ m L 的药液, 取 0 5 mL 不同浓度的药液分别和 0 5 m L 的线虫液在 1m L 离心管中混合 , 每一药剂浓度 处理重复 3 次 , 以 2 5% 丙酮溶 液处理为对照。将 离心管置于 25 培 养箱中, 分 别处理 2、 4、 8、 16、 24 、 48 h 后离心, 冲洗线虫体表药液, 4 h 后在体视 显微镜下检查死亡率, 用针刺法检查线虫的死活 , 并 计算线虫的校正死亡率。